Ранозаживляющая мазь “Аяфрол” на основе эфирного масла аянии кустарничковой Ajania fruticulosa (Ledeb.) Poljak

(51) 61 35/78 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ Задачей изобретения является получение ранозаживляющей мази Аяфрол, содержащей в качестве действующего вещества - эфирное масло из аянии кустарничковой(.)., основным компонентом которого является сесквитерпен хамазулен. Технический результат заявляемого изобретения достигается получением мази Аяфрол, 3,которая содержит в качестве основы полиэтиленгликоль - 1500 (ПЭГ-1500) 27 и полиэтиленгликоль-400 (ПЭГ- 400) 70 и активный компонент эфирное масло из аянии кустарничковой(.)3. 3 мазь Аяфрол обладает ранозаживляющей активностью,не проявляет аллергического,эмбриотоксического и тератогенного действия.(72) Атажанова Гаянэ Абдулкахимовна Жабаева Анара Ниханбаевна Адекенов Сергазы Мынжасарович(54) РАНОЗАЖИВЛЯЮЩАЯ МАЗЬ АЯФРОЛ НА ОСНОВЕ ЭФИРНОГО МАСЛА АЯНИИ КУСТАРНИЧКОВОЙ(57) Изобретение относится к области фармацевтической химии и технологии лекарств и касается способа получения препаратов из растительного сырья,обладающих ранозаживляющей активностью. Изобретение относится к области фармацевтической химии и технологии лекарств и касается способов получения препаратов из растительного сырья,обладающих ранозаживляющей активностью. Задачей изобретения является разработка способа получения ранозаживляющей мази Аяфрол, содержащей в качестве действующего вещества - эфирное масло из аянии кустарничковой(.) ., основным компонентом которого является сесквитерпен хамазулен (1). Известны способы выделения эфирных масел и экстрактов растений, содержащих в своем составе азуленовые соединения. 1. Патент РФ 1297279 от 27.03.1995 г. Способ получения эфирного масла,обладающего ранозаживляющей и противовоспалительной активностью. Калинкина Г.И., Березовская Т.П.,Таран Д.Д., Прищеп Т.П., Саратиков А.С.,Венгеровский А.И. Измельченную траву тысячелистника азиатского обрабатывают раствором щелочи в течение 110135 мин. при нагревании на водяной бане с обратным холодильником. Затем смесь охлаждают,нейтрализуют и подкисляют разведенной серной кислотой до 5,0. Колбу с подкисленной смесью присоединяют к аппарату для получения эфирного масла. Перегонку эфирного масла с водяным паром ведут в течение 2 часов. Выход хамазулена до 8. 2. Патент РФ 2033802 от 30.04.1995 г. Способ получения эфирного масла из полыни якутской. Березовская Т.П. Серых Е.А. Ханина М.А. Саратиков А.С. Таран Д.Д. Точную навеску сырья (400 г) полыни якутской помещают в установку для получения эфирного масла перегонкой с водяным паром. Запарник подсоединяют к парообразователю через патрубок,расположенный в нижней части запарника. Горячий водяной пар из парообразователя подается в запарник в течение 22 часов и, поднимаясь через сырье, увлекает с собой эфирное масло. Пары воды и эфирного масла, проходя через холодильник,конденсируются и скапливаются в сборнике. Эфирное масло отделяют от воды, сушат и взвешивают. Выход эфирного масла 2,05. Затем в нем фотоколориметрическим методом определяют содержание хамазулена. Выход хамазулена 39,5. Недостатками вышеуказанных способов являются 1. использование химических реактивов для извлечения эфирного масла 2. многостадийность процесса 3. ограничение доступности растительного сырья, например, полынь якутская распространена в отдельных районах Восточной Сибири, на Дальнем Востоке - только в Охотском районе 4. фотоэлектроколориметрический способ - не вполне совершенный метод для количественного определения содержания терпеноидных соединений при наличии современных хроматографических и спектральных методов. Аналогом по ранозаживляющему действию является мазь Левосин (Машковский М.Д.,Лекарственные средства.-15 изд. перераб.- М.Новая волна.-2007.- С.815). При применении данного препарата возможны побочные эффекты - подавление кроветворения,локальные аллергические проявления в виде кожной сыпи. В качестве растительного сырья в предлагаемом нами способе используют надземную часть аянии кустарничковой ((.) ),которая широко распространена на территории Центрального и Восточного Казахстана. С 2009 года аяния кустарничковая вводится в культуру на участках Международного научнопроизводственного холдинга Фитохимия - посевы составляют около 1000 м 2. Технический результат заявляемого изобретения достигается получением мази Аяфрол, 3,которая содержит в качестве основы полиэтиленгликоль - 1500 (ПЭГ-1500), 27 и полиэтиленгликоль-400 (ПЭГ- 400), 70 и активный компонент эфирное масло из аянии кустарничковой(.) ,3. Для разработки оптимального состава мази Аяфрол разработаны несколько мазевых композиций, которые были исследованы на биологическую активность и фармацевтическую доступность (таблица 1). Оценка результатов показывает,что ранозаживляющую активность проявляет 3 мазь Аяфрол на полиэтиленгликолевой основе 1 в. Мази готовят по общепринятой технологии с учетом физико-химических свойств используемых вспомогательных веществ. Основу готовят смешением полиэтиленгликоля 400 и полиэтиленгликоля-1500 на водяной бане. Затем вводятся эфирные масла аянии кустарничковой. 3 мазь Аяфрол содержит в своем составе Эфирное масло аянии кустарничковой - 3,0 г 0,003 Таблица 1 Прописи полученных мазей Ингредиент,Эфирное масло аянии кустарничковой Твин-80 Натрия карбоксилметилцеллюлоза Глицерин Димексид Вода очищенная Полиэтиленгликоль-1500 Полиэтиленгликоль-400 Исследование антимикробной активности мази на основе эфирного масла аянии кустарничковой. Объектом исследования служат следующие образцы образец 1 (эфирное масло аянии кустарничовой 1,димексид 10 полиэтиленгликоль- 1500 19 полиэтиленгликоль 400 70), образец 2 (эфирное масло аянии кустарничовой 1, твин 80 2 натрия карбоксиметилцеллюлоза 5,82 вода очищенная 81,48 глицерин 0,7), образец 3 (эфирное масло аянии кустарничовой 1, полиэтиленгликоль- 1500 29 - 400 до 70). Образцы мази подвергают исследованию на антимикробную активность. Изучение антимикробной активности вышеуказанных образцов проводят методом диффузии в агар. В качестве тест-культур взяты музейные штаммы грамположительных бактерий видов,грамотрицательных бактерий,, а также дрожжеподобных грибов. В качестве препаратов сравнения используют мазевую форму препаратов левосин (Левосин ) для бактерий и нистатин для культуры грибов С. . В качестве контроля используют образцы мазевых основ. Результаты исследования антимикробной активности образцов приведены в таблице 2. Образец 3 обладает умеренно выраженной активностью в отношении грамположительных бактерий видов,, менее выраженной активностью в отношении грамотрицательных видов,а также дрожжеподобных грибов, тогда как образцы 1 и 2 избирательно активны только в отношении. Для изучения ранозаживляющего действия эфирного масла аянии кустарничковой используют модельные мазевые формы с 1, 3, 5 эфирное масло аянии кустарничковой на жировой и гидрофильной основе. Ранозаживляющее действие модельных мазевых форм эфирного масла аянии кустарничковой изучают на модели резаной кожной раны. Раны моделируют на выстриженном участке спины животных путем иссечения участка кожи округлой формы размером 22 см (400 мм 2). Мази наносят шпателем в виде аппликаций без применения повязок и тампонов. Каждый день раны обрабатывают 3 раствором перекиси водорода. Мази используют до полной эпителизации ран. Таблица 2 Антимикробная активность мази Аяфрол на основе эфирного масла аянии кустарничковой Шифр Образец 1 (1 эфирное масло аянии кустарничовой мазевая форма) Основа 1 Образец 2 (1 эфирное масло аянии кустарничовой мазевая форма) Основа 2 Образец 3 (1 эфирное масло аянии кустарничовой мазевая форма) 6 Основа 3 Мазь Левосин Нистатиновая мазь Средние сроки заживления ран при использовании мазей на гидрофильной основе составляют для 1 и 3 мази - 13,51,0 суток, для 5 мази - 16,04,0. Средние сроки заживления ран при использовании мазей на жировой основе были более продолжительными и составляют для 1 мази - 18,82,8, для 3 - 19,22,7, и для 5 19,63,2 суток. У животных, пролеченных мазями на гидрофильной основе, площадь раневой поверхности интенсивно уменьшается по сравнению с животными, лечеными мазями на жировой основе. Так, через 13 суток у 60 животных, леченых 1 и 3 мазями на гидрофильной основе раны полностью эпителизируются, у остальных 40 эпителизация наблюдается на 15 сутки. 1 и 3 мази на гидрофильной основе по эффективности не уступают друг другу. При повышении концентрации мази до 5 заживление раневой поверхности немного замедляется. Возможно, при повышении концентрации данное эфирное масло проявляет антипролиферативный эффект. Таким образом, при изучении специфической активности мазей на основе эфирного масла аянии кустарничковой установлено, что 1 и 3 мази с эфирным маслом аянии кустарничовой на гидрофильной основе обладают ранозаживляющей активностью. Изучение влияния мази Аяфрол на генеративную функцию мазь Аяфрол не оказывает отрицательного действия и не нарушает эстральный (половой) цикл у крыс-самок хроническое ежедневное применение у крыс мази не оказывает существенного отрицательного влияния на гистоструктуру половых органов крыс достоверно уменьшает количество мест имплантации и живых плодов при применении мази Аяфрол до наступления беременности не установлено значимых признаков повреждающего действия на состояние внутренних органов и на костную систему плодов. Оценка результатов,полученных при обследовании потомства в постнатальном периоде развития у мази Аяфрол отсутствует отрицательное влияние на физическое развитие потомства крыс в постнатальном периоде развития применение мази Аяфрол не влияет на скорость созревания сенсорно-двигательных рефлексов и эмоционально-двигательное поведение и способность к тонкой координации движений потомства. Изучение репродуктивной активности субстанции аяфрола для изучения эмбриотоксичности беременным самкам белых беспородных крыс, перорально вводят раствор субстанции аяфрола. При изучении двигательной активности и эмоционального поведения крысят 4-х месячного возраста, полученных от матерей,4 которым вводят субстанцию аяфрола,регистрируемые показатели практически не меняются. Отмечается даже некоторое повышение ориентировочно-исследовательской активности крысят. Это позволяет констатировать практическое отсутствие антенатального повреждающего действия субстанции аяфрола. Таким образом,анализ результатов исследований показал отсутствие репродуктивной токсичности субстанции аяфрол. Изучение мутагенных свойств субстанции аяфрола проводят на основании учета хромосомных аберраций в клетках костного мозга и микроядер в эритроцитах самцов и самок крыс. По результатам микроядерного теста отмечается недостоверные изменения в количестве микроядер и числа хромосомных аберраций в клетках костного мозга у крыс,получавших субстанцию аяфрола. Полученные данные позволяют заключить об отсутствии мутагенного эффекта у субстанции аяфрола. Изучение аллергизирующих свойств субстанции аяфрол проводят реакцию конъюнктивальной пробы через 10 минут (гиперчувствительности немедленного типа),отмечается лишь индивидуальные реакции у двух крыс в виде зуда глаза. Через 24-48 часов (гиперчувствительность замедленного типа) никаких проявлений аллергических реакций не наблюдается. Оценку анафилактогенной активности проводят при введении разрешающей дозы субстанции аяфрол в хвостовую вену в объеме 0,1 мл. Наблюдение за животными проводят сразу же после введения препарата в течение 1 часа. Анафилактических реакций по шкалене отмечено. Сенсибилизация мышей однократным внутрикожным введением субстанции аяфрола в терапевтической и субтоксической дозе в основание хвоста мышей не приводят к повышению гиперчувствительности замедленного типа. Таким образом, выявлено, что субстанция аяфрола не проявляет аллергических реакций. Результаты экспериментальных исследований свидетельствуют, что субстанция аяфрола - эфирное масло аянии кустарничковой, за счет своего основного компонента хамазулена (до 44),обладает высокой ранозаживляющей активностью. Субстанция аяфрола не обладает репродуктивной токсичностью и мутагенным действием, не проявляет аллергических реакций. Преимущества способа получения ранозаживляюшеей мази Аяфрол на основе эфирного масла аянии кустарничковой ((.) .) 1. Способ получения ранозаживляющей мази Аяфрол на основе эфирного масла аянии кустарничковой ((.) .). 2 Мазь Аяфрол не проявляет эмбриотоксического и тератогенного действия,регистрируемого в антенатальном и постнатальном периодах развития. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Ранозаживляющая мазь, содержащая эфирное масло аянии кустарничковой,отличающаяся тем,что дополнительно содержит полиэтиленгликоль-1500 и полиэтиленгликоль-400 при следующем соотношении компонентов, масс. эфирное масло аянии кустарничковой 3,0 г 0,003 полиэтиленгликоль-1500 27,0 г 0,027 полиэтиленгликоль-400 70,0 г 0,070.