Способ получения средства, обладающего рострегулирующим действием

(51) 01 65/00 (2006.01) 01 21/00 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ Технический результат - расширение арсенала растительных средств,обладающих рострегулирующим действием. Технический результат достигается способом получения средства,обладающего рострегулирующим действием, путем экстракции растительного сырья водным этиловым спиртом при комнатной температуре с последующим фильтрованием и сгущением экстракта в вакууме до получения целевого продукта, но в отличие от известного в качестве растительного сырья используют надземную массу гребенщика жестковолосистого ( ), а экстракцию ведут при соотношении растительное сырье экстрагент- 13-15 в течение 3-х суток. Биологическую активность средства,полученного из гребенщика жестковолосистого исследовали в лаборатории биологически активных веществ Института физиологии, генетики и биоинженерии растений.(72) Умбетова Алмагуль Кендебаевна Абилов Жарылкасын Абдуахитович Достанова Раушан Хажигумаровна Орманбаева Амангуль Мамыржановна Султанова Нургуль Адайбаевна(73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Казахский национальный университет им. аль-Фараби Министерства образования и науки Республики Казахстан(57) Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к способу получения растительного средства,обладающего рострегулирующим действием. Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности, к способам повышения всхожести и роста сельскохозяйственных культур. Предложен способ получения средства,обладающего рострегулирующим действием, путем экстракции растительного сырья (надземная масса гребенщика жестковолосистого) 50 водным этиловым спиртом при соотношении сырьеэкстрагент - 13-15 в течении 3-х суток при комнатной температуре. Биологическую активность средства,полученного из гребенщика жестковолосистого,исследовали на ростовых биотестах - отрезках колеоптилей и семян пшеницы сорта Отан,повторность опытов трехкратная, в лаборатории биологически активных веществ Института физиологии, генетики и биоинженерии растений. Известен способ получения средства для повышения всхожести семян и стимуляции роста растений сельскохозяйственных,культур,предусматривающий обработку семян природным регулятором роста, при этом в качестве регулятора роста используют экстракт растений рода ,полученный экстракцией зеленой массы растений щелочным раствором при рН 9,5. Средство приготовлено следующим образом. Пример 1. Измельченную зеленую массу можжевельника туркестанского подвергают экстракции щелочным раствором (рН 9,5) из расчета 5 л раствора на 1 кг зеленой массы в течение суток. По окончании экстрагирования массу отфильтровывают, полученный экстракт доводят до рН 6,8. Пример 2. Препарат готовят по примеру 1, но в качестве сырья используют зеленую массу можжевельника обыкновенного (арча) (Патент РК,15889, МПК 8 01 65/00, А 01 С 1/00, опубл. 15.09.2009, бюлл. 9). Недостатком данного способа является необходимость использования водно-щелочных растворов, приводящих к быстрому окислению и деструкции биологически активных компонентов,что может отразиться на активности. Известен способ получения средства,обладающего рострегулирующим действием, путем экстракции растительного сырья 50 водным ацетоном. Средство приготовлено следующим образом 200 г растительного сырья (надземная масса поташника олиственного) заливают 50-ным водным ацетоном в соотношении сырьеэкстрагент- 13-15 (500-650 мл) и настаивают в течение 3-х суток при комнатной температуре. Полученный экстракт сгущают в вакууме до получения целевого продукта (10 г) (Предпатент РК, 18740, МПК 01 65/00, опубл. 17.09.2007, бюлл. 9). Недостатком данного способа является использование легколетучего растворителя ацетона. Наиболее близким аналогом является способ регулирования роста злаковых культур водорастворимым экстрактом корней молочая светоплодного, который применяется в концентрации 0,01-0,3. Средство 2 приготовлено следующим образом 250 г мелкоизмельченных корней молочая светлоплодного предварительно обезжиривают,затем настаивают смесью воды и ацетона. Полученный экстракт концентрируют до небольшого объема и экстрагируют этилацетатом. Этилацетатную вытяжку концентрируют до получения целевого продукта (Предпатент РК,7951, МПК 01 65/00, опубл. 15.09.1999, бюлл. 9). Недостатком данного способа является необходимость использования предварительного обезжирования растительного сырья, что ведет к продолжительному процессу экстракции. Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа получения рострегулирующего средства растительного происхождения. Технический результат - расширение арсенала растительных средств,обладающих рострегулирующим действием. Технический результат достигается способом получения средства,обладающего рострегулирующим действием, путем экстракции растительного сырья водным этиловым спиртом при комнатной температуре с последующим фильтрованием и сгущением экстракта в вакууме до получения целевого продукта, но в отличие от известного в качестве растительного сырья используют надземную массу гребенщика жестковолосистого ( ), а экстракцию ведут при соотношении растительное сырье экстрагент 13-15 в течение 3-х суток. Данный способ получения средства из растительного сырья не требует сложного приготовления, не длителен, 50-ный водный раствор этилового спирта (11) в соотношении сырья к экстрагенту 13-15 извлекает максимальное количество биологически активных веществ. Настаивание растительного сырья водным раствором спирта при комнатной температуре исключает процесс окисления и деструкции соединений способствует продолжительному хранению водно-спиртового экстракта. Способ осуществляется следующим образом измельченное сырье надземной массы гребенщика жестковолосистого заливают 50 этиловым спиртом в соотношении сырьеэкстрагент - 13-15 в течение 3-х суток при комнатной температуре,экстракт фильтруют и сгущают в вакууме до получения целевого продукта. Пример 1. 200 г растительного сырья (надземная масса гребенщика жестковолосистого) заливают 50-ным этиловым спиртом в соотношении сырьеэкстрагент - 13-15 (500-650 мл) и настаивают в течение 3-х суток при комнатной температуре. Полученный экстракт сгущают в вакууме до получения целевого продукта (10 г). Оптимальные условия получения средства из гребенщика жестковолосистого определены экспериментально и подтверждены данными,представленными в таблицах 1-3. Наиболее приемлемым растворителем,обеспечивающим выход максимального количества биологически активных веществ из растительного сырья, является водный раствор этилового спирта. При сравнительном исследовании этилового спирта и воды в различном соотношении, но в равных объемах, наибольшее количество биологически активных веществ извлекается при соотношении вода-этиловый спирт 11. Таблица 1 Влияние соотношения растворителей на полноту получения средства при экстракции надземной массы гребенщика жестковолосистого В соответствии с полученными данными, в качестве подходящего растворителя был выбран водный раствор этилового спирта в соотношении 11. Для определения оптимального объема Выводы Экстрагируется большое количество полярных соединений Экстрагируется большое количество полярных соединений Результат достигается одновременно,экстрагируются все полифенольные соединения Экстрагируется большое количество неполярных соединений Экстрагируется большое количество неполярных соединений растворителя при постоянстве массы сырья и времени, изменяли объем растворителя от 2 до 10 кратного избытка (таблица 2). Таблица 2 Влияние соотношения растворителей при экстракции растительного сырья гребенщика жестковолосистогоп/п На основании полученных экспериментальных данных, представленных в таблице 2, оптимальное соотношение сырья и растворителя с максимальной экстракцией суммы биологически активных веществ Выводы Недостаточное количество растворителя, сырье впитывает в себя много растворителя Результат достигается Результат достигается Расход большого количества растворителя Расход большого количества растворителя из растения возможно при 3-5-кратном избытке растворителя. Было изучено время экстракции при постоянстве всех других параметров (масса, объем) (таблица 3). Таблица 3 Влияние времени экстракции из растительного сырья гребенщика жестковолосистого на конечный продуктп/п Неполная экстракция основного продукта Неполная экстракция основного продукта Результат достигается частично Результат достигается 3 Учитывая полученные данные, было выбрано 72-х часовое время экстракции надземной массы гребенщика жестковолосистого. Биологическую активность средства,полученного из гребенщика жестковолосистого,исследовали в лаборатории биологически активных веществ Института физиологии, генетики и биоинженерии растений. Росторегулирующая активность испытана на экстрактах, полученных из соцветий Данные приведены в таблице 4. В результате изучения ростовой активности веществ на колеоптилях пшеницы было выявлено их Выводы частично Максимальный выход основного продукта Максимальный выход основного продукта стимулирующее действие при низких концентрациях (0,0005-0,001) и ингибирование растяжения клеток при высоких концентрациях(0,005-0,5). При изучении действия НС-5 на рост отрезков колеоптилей пшеницы в присутствии 5 мг/л было выявлено,что экстрактами снимают стимулирующее влияние фитогормона. При изучении влияния НС-5 на прорастание семян пшеницы выявлено,что 0,05 растворы ингибируют рост корней, не уменьшая количества образовавшихся корней. Данные приведены в таблице 5. Таблица 4 Влияние НС-5 на рост отрезков колеоптилей пшеницы Концентрация экстрактов, в НС-5 Прирост отрезков колеоптилей вот контроля 0,001 0,005 0,01 0,02 0,085 0,17 101,5 92,3 97,3 92,6 70,9 70,0 Влияние НС-5 на прорастание семян пшеницы Из данных биологического скрининга следует,что НС-5, полученный из ., обладает высокой рострегулирующей активностью. Таким образом, результаты проведенного биологического скрининга позволяют рекомендовать экстракты, полученные из . в качестве потенциальных лекарственных средств в медицине, а также для нужд сельского хозяйства. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения средства, обладающего рострегулирующим действием,включающий экстракцию растительного сырья этиловым спиртом при комнатной температуре, фильтрацию и сгущение в вакууме до получения целевого продукта, отличающийся тем, что в качестве растительного сырья используют надземную массу гребенщика жестковолосистого, а экстракцию ведут при соотношении сырьеэкстрагент - 13-15 в течение 3-х суток.