Способ прогнозирования неразвивающейся беременности

(51) 01 33/48 (2009.01) 01 33/577 (2009.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ беременных пациенток на ранних сроках определяли локализацию маркеров ранней 25 и поздней 95 активации клеток на отдельных субпопуляциях лимфоцитов - 3 (зрелых лимфоцитах),4(больших гранулярных лимфоцитах) в периферической крови и при увеличении выше нормы показателей локализации 95 и снижении ниже нормы показателей локализации 25 прогнозируют неразвивающуюся беременность. Данное изобретение позволяет прогнозировать возможное прекращение развития беременности в первом триместре.(72) Елекенова Армида Бакытбековна Базылбекова Зейнеп Омирзаковна Дзоз Людмила Стефановна Утешева Жанара Аскаровна(73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Научный центр акушерства,гинекологии и перинатологии Министерства здравоохранения Республики Казахстан(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ НЕРАЗВИВАЮЩЕЙСЯ БЕРЕМЕННОСТИ(57) Изобретение относится к медицине, к акушерству, и может быть использовано для прогнозирования неразвивающейся беременности. У 23580 Изобретение относится к медицине,к акушерству, и может быть использовано для прогнозирования неразвивающейся беременности. Неразвивающаяся беременность(НБ) нарастающая по частоте и тяжести последствий причина репродуктивных потерь, одна из главных проблем мировой медицины (Радзинский В,Е.,Димитрова В.И., Майскова И.Ю.). 2009 г.). Частота неразвивающейся беременности на ранних сроках возросла с 10-20 (Салов И.А., 1998) до 45-88,6 в последние годы (2006). По зарубежным данным в Англии частота НБ составляет 2,8 (по типу гибели эмбриона - 62,5 и по типу анэмбрионии - 37,5), в США - 15( ,, 2007). В первом триместре (до 12 недель беременности) частота невынашивания беременности достигает 5070 (Доброхотова Ю.Э., Чернышенко Т.А., Аушева А.А., 2006 г.). Известен способ прогноза развития змбрио на/плода (авторское свидетельство 2107913,1998) по определению иммунореактивности сывороточных аутоантител организма женщины,направленных к антигенам (основному белку миелина, белку 100, анионному прочносвязанному белку хроматина АБХ 14-18, мембранному белку МР 65), и при получении данных об отклонении иммунореактивности сывороток от уровня нормальных значений к любому из них определяют уровень риска нарушений развития плода. Следует отметить, что данный способ оценки развития плода не позволяет прогнозировать возможное прекращение развития беременности, а только устанавливает риск нарушений развития плода. Известен способ прогнозирования неразвивающейся беременности по определению в сыворотке крови беременной, со срока 5 недель,уровня фактора роста плаценты (ФРП), при снижении которого в 2,7 и более раз относительно нормы,прогнозируют неразвивающуюся беременность (Авруцкая В.В., Крукиер И.И.,Погорелова Т.Н., Друккер Н.А., Ермолаева Н.В.,Пономарева А.Ю., ФГУ Ростовский НИИ акушерства и педиатрии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию,24.05.2006). Однако этот способ более эффективен при сроках беременности свыше 13 недель. Также известен способ диагностики неразвивающейся беременности,включающий количественное определение содержания биологически активного вещества в крови,заключающийся в том, что в плазме крови определяют активность лизосомального фермента-ацетил -глюкозаминидазы и при его уровне,составляющем 0,0142-0,0178,диагностируют начавшийся выкидыш, а при уровне 0,0092-0,0128 замершую беременность (Оразмурадов А.А.,Радзинский В.Е., Фролов В.А., Ким А., Петров ,Заякин В.А., Иванова Н.Л., Российский университет дружбы народов, 15.06.2000). Недостатком данного способа является то, что прогнозирование неразвивающейся беременности с использованием применяемых тестов чаще всего возможно в период 2 констатации факта остановки ее развития, но не позволяет прогнозировать неразвивающуюся беременность первого триместра. Задачей настоящего изобретения является разработка способа, позволяющего с высокой точностью осуществить прогноз прекращения развития беременности в первом триместре. Поставленная техническая задача достигается предлагаемым способом прогнозирования неразвивающейся беременности первого триместра путем анализа крови беременных пациенток,отличительной особенностью которого является то,что в периферической крови пациенток определяют локализацию активационных маркеров 25 и 95 на отдельных субпопуляциях лимфоцитов с фенотипом СО 3 (зрелых лимфоцитах), 4 (Тхелперах), 8 (цитотоксических лимфоцитах), 16(натуральных киллерах), 56 (больших гранулярных лимфоцитах), и при снижении показателей локализации 25 ниже следующей нормы (325) - 0,810,15 (425) 0,450,11 (825) - 0,910,14 (1625)- 0,890,12 (5625) - 0,680,20 и увеличении показателей локализации молекул апоптоза 95 на лимфоцитах выше следующей нормы(895) - 1,650,29 (1695) 3,590,54 (5695) - 1,300,48, прогнозируют возможность возникновения неразвивающейся беременности первого триместра. Апоптоз - программированная клеточная смерть является одной из важнейших составляющих поддержания корректного числа клеток в организме. Известно, что апоптоз вовлечен в механизм развития большого количества заболеваний у человека. В частности, активационный апоптоз происходит в зрелых активированных лимфоцитах и развивается в результате дисбаланса активационных сигналов (Барышников А.Ю., Шишкин Ю.В. Иммунологическая проблема апоптоза. - М., 2002. с.320) По заявленному способу были обследованы 60 беременных пациенток со сроком беременности до 12 недель, из них 30 пациенток с неразвивающейся беременностью (НБ) до 12 недель и 30 с физиологически протекающей беременностью (ФБ) до 12 недель. При исследовании осуществляют забор венозной крови пациенток натощак и проводят анализ локализации молекул активации 25, 95 ( -,кластер дифференцировки) на отдельных субпопуляциях лимфоцитов 3, 4, 8, 16, 56 в периферической крови. Исследование проводили методом двойного фенотипирования с использованием мопоклопальных антител к поверхностным антигенам лимфоцитов (НПО Сорбент/Москва,РФ) методом проточной цитометрии, по методике,модифицированной НИИ иммунологии МЗ РФ Филатов А.В. Дифференцировочные антигены субпопуляционная организация лимфоцитов человека Дисс. д.м.н. в форме научн. доклада. М., 23580 1992, с. 50. Применяли двойное фенотипирование с-меткой и с РЕ-меткой. Для раскрытия сущности изобретения в таблице 1 приведены результаты клинико-лабораторных исследований предлагаемого способа прогнозирования неразвивающейся беременности. Таблица 1 Исследование локализации маркеров 25, 95 на отдельных субпопуляциях лимфоцитов в периферической крови пациенток с неразвивающейся беременностьюЛокализация активационных маркеров на лимфоцитах 3 25 395 425 495 825 895 1625 1695 5625 5695 Группы наблюдения Основная группа,Контрольная группа. НБ(30) ФБ(30) 0,450,13 0,8 0,15 3,780,60 1,410,22 0,240,06 0,450,11 5,000,88 1,180,47 0,510,10 0,910,14 2,980,73 1,650,29 0,610,12 0,890,12 4,080,68 3,590,54 0,580,11 0,680,20 5,421,82 1,300,48 Таким образом, нормативными показателями являются числовые данные контрольной группы. При неразвивающейся беременности имело место снижение активации клеток иммунной системы 3, 4, 8, 16 по 25 маркеру, следствием чего явился дисбаланс активационных сигналов апоптоза. В результате, за счет увеличения локализации молекул апоптоза 95 практически на всех субпопуляциях лимфоцитов 3, 4, 8, 56,выявились нарушения количественных параметров иммунной системы матери, осуществляющие иммунологический надзор. Эти нарушения спровоцировали неразвивающуюся беременность первого триместра. При неразвивающейся беременности в периферической крови пациенток увеличивается локализация молекул апоптоза С 95 и снижается Локализация 25 на лимфоцитах 325 425 825 1625 5625 локализация маркера ранней активации 25 на лимфоцитах с фенотипом 3, 4, 8,16, 56. Ниже приводим примеры конкретного применения предложенного способа прогнозирования неразвивающейся беременности в отношении конкретных пациенток. Пример 1. Постановка прогноза неразвивающейся беременности до 12 недель. Беременная К.,лет, история беременности. Диагноз при постановке на учет в женскую консультацию Беременность 5-6 недель. При обследовании в анализе крови показатели локализации 25 н лимфоцитах представлены в таблице 2 а. Показатели локализации С 95 на лимфоцитах представлены в таблице 2 б. Таблица 2 а Результаты анализа беременной К. Результаты анализа беременной К. 23580 Заключение возможно возникновение неразвивающейся беременности первого триместра с вероятностью 96,7, необходимы меры коррекции иммунологических нарушений. Пример 2. Постановка прогноза физиологически протекающей беременности до 12 недель.. Диагноз при постановке на учет в женскую консультацию беременность 5-6 недель. При обследовании в анализе крови показатели локализации 25 н лимфоцитах представлены в таблице 3 а. Показатели локализации 95 н лимфоцитах представлены в таблице 3 б. Таблица 3 а Результаты анализа беременной Л. 0,96 0,56 1,0 1,4 0,90 Таблица 3 б Заключение беременность будет протекать без угрозы возникновения неразвивающейся беременности в первом триместре. Проведенные исследования позволяют определить принадлежность пациенток к группе риска по возможности возникновения неразвивающейся беременности первого триместра и определить тактику ведения пациенток с неразвивающейся беременностью в анамнезе для профилактики и пролонгирования беременности. Вышеизложенное подтверждает прогностическую ценность заявляемого метода. Таким образом, заявляемый способ является эффективным и обладает рядом преимуществ 1. Прогнозирование данной патологии возможно на ранних сроках беременности (до 12 недель). 2. Клиническое применение способа позволит осуществлять адекватную патогенетическую терапию и предотвращать неблагоприятные исходы беременности. Результаты анализа беременной Л. 1,2 0,7 1,3 3,05 0,82 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ прогнозирования неразвивающейся беременности первого триместра путем анализа крови беременных пациенток, отличающийся тем,что в периферической крови пациенток определяют локализацию активационных маркеров 25 и 95 на отдельных субпопуляциях лимфоцитов с фенотипом 3 -зрелых лимфоцитах, 4 Тхелперах, 8 -цитотоксических лимфоцитах,16 -натуральных киллерах, 56 -больших гранулярных лимфоцитах, и при снижении показателей локализации 25 ниже следующей нормы (325) - 0,810,15 (425) 0,450,11 (825) - 0,910,14 (1625) 0,890,12 (5625) - 0,680,20 и увеличении показателей локализации молекул апоптоза 95 на лимфоцитах выше следующей нормы(5695) 1,300,48,прогнозируют возможность возникновения неразвивающейся беременности первого триместра.