Способ прогноза течения злокачественных новообразований щитовидной железы

(51) 61 17/94 (2009.01) 01 33/48 (2009.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(57) Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии и эндокринологии и может быть использовано для прогнозирования течения злокачественных новообразований щитовидной железы. Данный способ применен у 137 больных с узловыми образованиями щитовидной железы,проживающих в Семипалатинском регионе. Всем пациентам выполнена тонкоигольная биопсия под контролем УЗИ. Биопсийный материал был исследован на выявление мутаций гена . Способ позволяет применить выявленные мутации в генев диагностике папиллярной формы рака щитовидной железы. Обнаружение этого маркера указывает на агрессивность течения папиллярного рака и возможность изменить тактику лечения.(72) Еспенбетова Майра Жаксимановна Атантаева Баян Жумангазыевна Сандыбаев Марат Нурланбекович(73) Республиканское государственное казенное предприятие Казахский научно-исследовательский институт онкологии и радиологии Министерства здравоохранения Республики Казахстан(56) Ярмолинский Д.Г. Молекулярно-генетический анализ опухолевых клеток щитовидной железы у белорусских пациентов Дисс. канд.мед.наук. Минск, 2006, с.148(54) СПОСОБ ПРОГНОЗА ТЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ 23086 Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии и эндокринологии и может быть использовано для диагностики узловых образований щитовидной железы. Впервые в 2003 году в научной литературе появились сообщения о том, что мутация 600 в генечасто происходит в опухолях щитовидной железы. Прототипом заявленного решения является способ исследования частоты онкогенапри папиллярном раке щитовидной железы после аварии на Чернобыльской АЭС /Ярмолинский Д.Г. Молекулярно-генетический анализ опухолевых клеток щитовидной железы у белорусских пациентов дисс. канд.мед.наук. -Минск, 2006 с. 148./ Сделан вывод о том, что соматические мутации 600 генаучаствуют в развитии папиллярного рака щитовидной железы у пациентов,заболевание которых имеет спорадическую природу. Недостаток - метод не использовался для диагностики степени риска рецидивирования и позднего метастазирования. Дело в том, что дифференцированный рак щитовидной железы может рецидивировать, и частота таких осложнений составляет в течение жизни больных до 10-15. Задачей изобретения является разработка способа прогнозирования течения рака щитовидной железы и риска развития его рецидивов после оперативного лечения Поставленная задача решается предлагаемым способом, включающим - методом тонкоигольной биопсии под контролем УЗИ у пациентов получают пунктаты щитовидной железы, на которых проводятся молекулярно-генетическое исследования на наличие мутаций. При этом применяется методика - (полимеразная цепная реакцияанализ полиморфизма длины рестрикционных фрагментов). Анализ включает следующие этапы выделение ДНК, воздействие специфической эндонуклеазой на ДНК, после денатурации ДНК проверка результатов с помощью гелевого полиакриламидного электрофореза. При наличии мутаций последовательность меняется,что проявляется в виде сдвига полосы амплифицированного фрагмента мутантной денатурированной ДНК по отношению к фрагменту ДНК. На конечном этапе анализа формируется графический образ дорожка,поперечно исчерченная чередующимися полосами, мутация гена проявлена виде сдвига полосы / ., .,.., 600. .-2003.-.88.-,43934397/. Этот метод обеспечивает прямую диагностику мутаций. Новое в заявленном решении-выявление частоты рецидивов у обследованных больных с папиллярным раком щитовидной железы при наличии мутации гена . Преимущество предлагаемого способа прогнозирования течения рака щитовидной железы заключается в том, что обнаружение этого маркера указывает на более агрессивное течение папиллярного рака щитовидной железы, большую частоту рецидивов,что требует дифференцированного подхода к лечению и тщательного наблюдения за больными в послеоперационном периоде. Пример осуществления способа. Больной Б., 1942 г. рождения, в феврале 2003 г. поступил в хирургическое отделение Семипалатинского онкологического диспансера с диагнозом рак щитовидной железы. Учитывая размеры опухоли 1,51,5 см,больному планировалась операция в объеме правосторонняя экстрафасциальная гемитиреодэктомия. При дальнейшем исследовании была обнаружена мутация в генев положении 600, в связи с чем поставлен диагноз -папиллярный рак ЩЖ. Учитывая более злокачественное течение папиллярного рака при наличии мутации в гене, было проведено лучевое лечение. Больной выписан в удовлетворительном состоянии. Назначена супрессивная гормонотерапия тироксином под контролем уровня гормонов. В настоящее время состояние больного удовлетворительное. Данный способ применен у 137 пациентов Семипалатинского региона с узловыми образованиями щитовидной железы, проживающих в Семипалатинском регионе. Всем пациентам выполнены исследования по выявлению мутаций в гене . Результаты анализа по определению мутации в генев положении 600 показаны на рисунке 1, где дан графический образ - это дорожка, поперечно исчерченная чередующимися полосами, мутация гена проявлена в виде сдвига полосы. Результаты исследования мутаций в генепредставлены в таблице 1. Таблица 1 Результаты цитологического исследования биопсийного материала и мутаций в гене Формы злокачественных и доброкачественных новообразований ЩЖ Доброкачественные опухоли Фолликулярный неоплазм Подозрение на рак Папиллярный рак Фолликулярный рак Медуллярный рак 2 23086 Продолжение таблицы 1 Недифференцированный рак 0 0 2 Злокачественная лимфома 0 0 1 Всего 19 13,93,0 137 Примечание -- различия между частотой выявления мутации в генепри папиллярном раке и в среднем по всем формам новообразований, р 0,05 При анализе данных таблицы отмечается, что основную массу составили больные с папиллярной карциномой - 77 (56,2) случаев. Из 77 пациентов с папиллярными формами РЩЖ мутации -гена были обнаружены в 19 (24,6) случаях. При других формах доброкачественных и злокачественных поражений данного органа,вошедших в исследование,мутации не были установлены. Полученные данные свидетельствуют о том, что мутации в генепроисходят только при злокачественных новообразованиях щитовидной железы, при доброкачественных опухолях данные мутации не встречаются. Среди всех форм рака щитовидной железы мутации в гененаблюдались только при папиллярных карциномах. Данные, характеризующие результаты анализа частоты развития (выявления) рецидивов и поздних метастазов папиллярного рака щитовидной железы в зависимости от наличия мутации гена ,представлены в таблице 2. Таблица 2 Частота выявления рецидивов и поздних метастазов папиллярного рака щитовидной железы в зависимости от наличия мутации гена(за 5 лет проспективного наблюдения после оперативного лечения) Группа пациентов С наличием мутации гена, 19 Без мутации гена , 58 Как видно из данных таблицы 2, частота рецидивов у обследованных больных с папиллярным раком щитовидной железы при наличии мутации генабыла в 4,6 раза выше,чем при отсутствии таковой, частота выявления поздних метастазов - в 6,1 раза выше. Анализ суммарной частоты случаев рецидивов и метастазов дал в группе наличия мутации гена(26,310,1), отсутствия - (5,22,9), причем в данном случае различия между группами были достоверными, р 0,05. На основании изложенного, следует сделать заключение - наличие мутации в генепредлагаем использовать в качестве дополнительного диагностического и прогностического критерия. Обнаружение этого маркера указывает на более агрессивное течение папиллярного рака щитовидной железы, большую частоту рецидивов и метастазов,что требует дифференцированного подхода к лечению и тщательного наблюдения за больными в послеоперационном периоде. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ прогнозирования течения злокачественных новообразований щитовидной железы,заключающийся в проведении генетического исследования по наличию мутации в генеи отличающийся тем, что определение наличия мутации в генеиспользуют для прогноза повышенного риска развития рецидивов и метастазов. Фиг.1 Результаты анализа по определению мутации в генев положении 600