Способ прогнозирования и диагностики состояния лонного сочленения

(51) 01 33/49 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ Это достигается тем, что в предлагаемом способе прогнозирования и диагностики состояния лонного сочленения, включающем диагностику лонного сочленения у беременных пациенток с применением диагностического критерия в качестве индикатора контроля,согласно изобретению,проводят молекулярно-генетическое исследование ДНК,выделенной из венозной крови, в качестве диагностического критерия используют биомаркерыполиморфные варианты генов костного метаболизма гена витамин Д рецептора,кальцитонина и коллагена 1 типа прогнозируя патологию области лонного сочленения у беременных пациенток, в качестве которых исследуют женщин казахской популяции, при наличии генотипа С/С гена витамина Д рецептора,/кальцитонина и при Т/Т гена коллагена 1 типа прогнозируют патологию лонного сочленения и при наличии генотипов Т/Т гена витамин Д рецептора, /гена кальцитонина и / гена коллагена 1 типа диагностируют нормальное состояние лонного сочленения.(72) Кыздарбаева Люция Избасаровна Кравцова Татьяна Геннадьевна Святова Гульнара Салаватовна(56) Сергеева О.П. Состояние лонного сочленения при беременности и в послеродовом периоде по данным эхографии // Казанский медицинский журнал, 2003, т.84,4, с.261-263(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ И ДИАГНОСТИКИ СОСТОЯНИЯ ЛОННОГО СОЧЛЕНЕНИЯ(57) Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству и гинекологии и может быть использовано для прогнозирования предрасположенности к патологии области лонного сочленения у пациенток казахской национальности. Техническим результатом изобретения является повышение точности диагностики, расширение функциональных возможностей и арсенала средств назначения. 22313 Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству и гинекологии и может быть использовано для прогнозирования предрасположенности к патологии области лонного сочленения у пациенток казахской национальности. Известен способ диагностики состояния области лонного сочленения, согласно которого, проводят визуально-пальпаторную диагностику лонного сочленения. При этом при помощи пальпации лонных костей в области краниального края бугорков лонной кости и визуальной оценки расположения пальпирующих пальцев врача оценивают краниальное и каудальное смещение ветви лонной кости, которое далее применяют в качестве диагностического критерия состояния коленного рефлекса.(Пат.2144315, кл. А 61 В 5/107, 5/11,2000) К недостаткам известного способа относятся недостаточная точность диагностики, ограниченные функциональные возможности и ограниченный арсенал средств назначения, так как состояние области лонного сочленения определяют визуальнопальпаторной диагностикой,диагностический критерий состояния области лонного сочленения применяют только для диагностики коленного рефлекса и проводят диагностику у пациентов любой популяции. Известен также способ диагностики состояния области лонного сочленения при беременности и в послеродовом периоде, включающий диагностику области лонного сочленения у пациенток с применением диагностического критерия,в качестве которого проводят оценку ширины лонного сочленения, которую определяют в 1 триместре беременности методом УЗИ. При этом при величине ширины лонного сочленения 6,71,7 мм диагностируют очаг воспаления в области лонного сочленения. (Сергеева О.П. Казанский медицинский журнал, 2003,т.84,4, с.261-263). К недостаткам известного способа относятся ограниченные функциональные возможности и ограниченный арсенал средств назначения, так как проводят только диагностику у беременных пациенток любой популяции. Задачей изобретения является создание способа прогнозирования и диагностики состояния лонного сочленения, позволяющего повысить точность диагностики,расширить функциональные возможности и арсенал средств назначения. Техническим результатом изобретения является повышение точности диагностики, расширение функциональных возможностей и арсенала средств назначения. Это достигается тем, что в предлагаемом способе прогнозирования и диагностики состояния лонного сочленения, включающем диагностику лонного сочленения у беременных пациенток с применением диагностического критерия в качестве индикатора контроля,согласно изобретению проводят молекулярно-генетическое исследование ДНК,выделенной из венозной крови женщин казахской популяции, в качестве диагностического критерия 2 используют полиморфные варианты генов витамина Д рецептора, кальцитонина и коллагена 1 типа,причем при наличии генотипов С/С гена витамина Д рецептора, /гена кальцитонина и Т/Т гена коллагена 1 типа прогнозируют патологию лонного сочленения, а при наличии генотипов Т/Т гена витамина Д рецептора, /гена кальцитонина и/ гена коллагена 1 типа диагностируют нормальное состояние лонного сочленения. Предлагаемый способ прогнозирования и диагностики состояния области лонного сочленения реализуют следующим образом. Для прогнозирования и диагностики проводят молекулярногенетическое исследование ДНК, выделенной из венозной крови на станции выделения ДНК 100(США). Полиморфизм генов гена витамин Д рецептора(11) исследован методом анализа длин реетрикционных фрагментов (ПДРФ-анализ) с помощью диагностического набора праймеров и рестриктаз (пр-во Гос НИИ генетики, г.Москва). Все фрагменты ДНК амплифицировали на автоматическом термоциклере (фирма(, США). ПЦР (полимеразная цепная реакция) проводили на амплификаторе(Великобритания) в 25 мкл реакционной смеси. Для анализа полиморфизма гена 35 циклов ПЦР проводят по следующей программе 1. 94 -10 сек 2. 62-30 сек 3. 72-20 сек В первом цикле денатурация - 2 мин., в последнем -5 мин. Для анализа полиморфизма гена 35 циклов ПЦР проводят по следующей программе 1. 94-10 сек 2. 60-30 сек 3. 72-20 сек В первом цикле денатурация - 2 мин., в последнем -5 мин. Для анализа полиморфизма гена 11 35 циклов ПЦР проводят по следующей программе 1. 94 -10 сек 2. 60-30 сек 3. 72-20 сек В первом цикле денатурация - 2 мин., в последнем -5 мин. Продукт амплификации подвергался гидролизу эндонуклеазной рестрикции 1, полноту которой оценивали по результатам электрофореза в 7 полиакламидном геле с последующей окраской бромистым этидием и визуализацией в проходящем УФ-свете. Статистическую обработку результатов исследования проводили с использованием стандартного пакета программ 6. 0 В качестве диагностического критерия используют биомаркерыгены ,11,прогнозируя патологию лонного сочленения у беременных пациенток, в качестве которых исследуют женщин казахской популяции,при наличии генотипа С/С гена витамина Д 22313 рецептора, /кальцитонина и при Т/Т гена коллагена 1 типа прогнозируют патологию лонного сочленения и при наличии генотипов Т/Т гена, /генаи /н 11 диагностируют нормальное состояние лонного сочленения. Проведен анализ частот генотипов у 50 беременных женщин казахской популяции с патологией лонного сочленения в настоящей беременности или перенесших в прошлых родах разрыв лонного сочленения. Контрольную группу составили 100 беременных пациенток с физиологически протекающей беременностью. Результаты представлены в таблицах 1, 2, 3 Таблица 1 Частота генотипов и аллелей гена витамина Д рецептора в основной и контрольной группах. Генотип,аллели Группа, частоты , - количество индивидуумов Беременные с Здоровые патологией беременные лонного сочленения 427,05 62 624,9 5211,46 37 374,8 63,39 1 11,0 100 100 100 684,69 324,69 Сравнение с контрольной группой по критерию х 2 Распределение генотипов гена кальцитонина в изученных выборках Генотип,аллели Здоровые патологией беременные лонного сочленения/ 3 63,39 всего 50 100 100 100 Примечание- различия статистически достоверны (р 0,05) Сравнение с контрольной группой по критерию х 2 Таблица 3 Частота генотипов гена коллагена 1 типа (11) в сравниваемых группах пациенток. Генотип,аллели Группа, частоты ,Сравнение с контрольной- количество индивидуумов группой по критерию х 2 Здоровые беременные патологией лонного сочленения/ 30 606,9 35 354,8 8,48 Т/Т 7 144,9 3 31.7 всего 50 100 100 100 Примечание- р 0,01,- р 0,001 Как видно из таблиц 1, 2, 3, при частоте генотипа сочленения. Прогнозирование и диагностику С/С гена витамина Д рецептора 6, /проводят на любом сроке беременности. кальцитонина- 6 и при Т/Т гена коллагена 1 типа Пример 1. 14 в общей популяции беременных пациенток Повторнобеременная Д. 30 лет поступила в казахской национальности прогнозируют патологию клинику заблаговременно на родоразрешение. лонного сочленения и при наличии генотипов Т/Т Из анамнеза выясненоданная беременность гена , /генаи /н 11 вторая. После первых срочных родов 4 года назад диагностируют нормальное состояние лонного произошло расхождение лонного сочленения, после 3 22313 которого женщина длительное время находилась на постельном режиме, передвигалась с помощью костылей. При поступлении предъявляет жалобы на боли в лонном сочленении при ходьбе с ранних сроков беременности. Походка нарушена утиная,пальпация над лоном болезненна, симптом Гориневской положителен. При рентгенографическом исследовании области лонного сочленения обнаружено отстояние лонных костей на 0,9 см. Клинический диагноз - беременность 38-39 недель,состояние после перенесенного расхождения лонного сочленения. Молекулярно-генетическое тестирование показало наличие генотиповС/С гена , /, Т/Т гена 11. На основании наличия у пациентки указанных генотипов в качестве биомаркеров прогнозируют развитие патологии лонного сочленения. В плановом порядке произведено кесарево сечение. Родился плод женского пола весом 3 кг 600 г длина 55 см. Выписана в удовлетворительном состоянии. Пример 2 Повторнобеременная К. 25 лет поступила в клинику заблаговременно на родоразрешение с диагнозом беременность 38-39 недель. Отягощенный акушерский анамнез. Невынашивание. При поступлении жалоб нет, походка не изменена. Пальпация симфиза безболезненна. При рентгенографическом исследовании ширина лонного сочленения - 0,65 см. Молекулярно-генетическое тестирование показало наличие генотиповТ/Т гена , /генаи /н 11. На основании наличия у пациентки указанных генотипов в качестве биомаркеров диагностируют нормальное состояние лонного сочленения. Произошли срочные роды плодом мужского пола весом 3 кг 400 г, длиной 54 см без осложнений. Повышение точности диагностики, расширение функциональных возможностей и арсенала средств назначения обеспечивается использованием в качестве биомаркеров, полиморфных вариантов генов костного метаболизма гена витамин Д рецептора, кальцитонина и коллагена 1 типа,которые позволяют осуществлять точное прогнозирование и диагностику состояния лонного сочленения у беременных женщин казахской национальности на любом сроке беременности. Таким образом предлагаемый способ прогнозирования и диагностики состояния лонного сочленения позволяет повысить точность диагностики,расширить функциональные возможности и арсенал средств назначения. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ прогнозирования и диагностики состояния лонного сочленения включающий диагностику лонного сочленения у беременных пациенток с применением диагностического критерия в качестве индикатора контроля,отличающийся тем, что проводят молекулярногенетическое исследование ДНК, выделенной из венозной крови беременных женщин казахской популяции, в качестве диагностического критерия используют полиморфные варианты генов витамина Д рецептора, кальцитонина и коллагена 1 типа,причем при наличии генотипов С/С гена витамина Д рецептора, / гена кальцитонина и Т/Т гена коллагена 1 типа прогнозируют патологию лонного сочленения, а при наличии генотипов Т/Т гена витамина Д рецептора, / гена кальцитонина и/ гена коллагена 1 типа диагностируют нормальное состояние лонного сочленения.