3-кето-10-альфа-(14)-эпокси -1,5,7-альфа-(Н)4,6-бета-(Н)-гвай -11(13)-ен-6, 12-олид, обладающий противоопухолевой активностью

НАЦИОНАЛЬНОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(73) Научно-производственное внедренческое Малое преДприятиеТабигаГО 2)(56) Авторское свидетельство СССР . п 1336512, кл. с 07 в 307/93. 1985который обладает выраженной противоопухолевой активностью и может быть применен в химиотерапии злокачест венных опухолей.Наиболее бЛИЗКИМ К ОПИСЫВЗЕМОМУ СОЗДИНЕНИЮ ПО СТВУКТУОВ И ПО ДЕЙСТВИЮ-эпокси-15,7(Н)д,6 д(Н)-гвай 11113)-ен-6,12-олид БФС 15 Н 1804 выход 5295 т.пл. 168-170 С о(20(с 000 д хлороформ). Реагент 1 эстафиатин.Реагент 2 ВЕЗ. Реагент 3 м-хлорнадбензойная кислота. Условия реакции 1 стадия в среде хлороформа, в атмосфере аргона при 0 С.2 стадия в среде хлороформа при комнатной температуре.является сесквитерпеновый лактон гваянового типа - анобин однако, спектр. его противоопухолевой активности недостаточно широк.Целью Изобретения является изыскание новнх соединений, обладающих широким спектром противоопухолевого действия и сравнительно низкой ток-11Целевой продукт 3-кето-10 ы(1 Ц)эпокси -15 иы(н),д,6 д(н)гвай-11(13)ен-6,12-олид получают из доступного природного сесквитерпенового лактона эстафиатина (11) в две стадии иэо- у меризацией ПО эпоксигруппе молекулыНа ПЭРВОЙ СТадии при взаимодействии эстафиатина (11) с эфиратом Трехфтористого бора в хлороформе при комнатной температуре образуется кетопроизводное (111) с выходом.90. 1В ИК-спектре отмечаются полосы поглощения в области 1780 (СП лактона), 1750 (кетопруппа), 1680,1650 см(двойные связи).В спектре ПИР присутствуют сиг налы протонов вторичного метила С 4-Ме дублет 1,20 м.д. (ЗН, 3На второй стадии при эпоксиди оровании кетопроиэводного (111) м-хлорнадбензойной кислотой в хлороформе при комнатной температуре с последующим разделением смеси продуктов реакции хроматографией на силикагеле получают эпоксипроизвод-3 ное (1) с выходом 52.В ИК-спектре отмечаются полосы поглощения в области 1770 (СО -лактона), 1700 (кетогруппа) 1670 (двойная связь), 11 д 0 см 1 (эпоксигрулпа).В спектре ПМР присутствуют сигналы протонов вторичного метила С 4 Ме - дублет 1,2 д м.д. (ЗН, 36 Гц),лактонного протона Н-6 триплет- д,1 д м.д. (1 н Д 9 Гц). гем-эпоксидные протоны при С-10 - дублеты при 2,02 и 2,61 м.д. (по 1 Н каждый, 3 3,5 Гц) и экзометиленовых-протонов С-11 - дублеты при 5,58 и 6,29 м.д. (по 1 Н каждый, л 3 Гц).Изобретение иллюстрируется следующими примерами.прибавляют при 0 С в атмосфере ар гона 0,25 мл эфирата трехфтористого бора. Перемешивают в течение 5 мин затем разбавляют 6 мл хлороформа, промывают водой (3 х 20 мл), сушат надмд 0 отфильтровывают и растворитель отгоняют. Продукт перекристаллиаовывают из этилацетата. получают д 50 мг (111). Выход 90. Бесцветное кристаллическое вещество состава С 15 Н,д 03 т.пл. 1 д 0-1 д 2 С (из этил 4ацетата),БЫ 126(с 0,005, хлороформ). По ТСХ одно пятно с К 0,72.проиэводного (111) в 5 мл хлорофор ма при 0 С добавляют-7 д мг-(0.дммоль)м-хпорнадбенэойной кислоты. 3 атем температуру реакционной среды поднимают до комнатной (18 С) и перемешивают в-течение 2 д ч,-контролируя ход реакции по ТСХ в системе гексан этилацетат (119). далее смесь промывают 1 М раствором бикарбоната натРИЯ 13 х 20 мл), затем водой (2 к 10 мл),сушат над сульфатом магния, отфильтровывают, растворитель отгоняют. Остаток (100 мг 1 хроматографируют на колонке с 2 г силикагеля. 3 При элюировании колонки смесью гексан - этилацетат 1371. выделяют30 мг целевого продукта (111). Выход52. Бесцветное кристаллическое вещество состава С,5 Н О, т, пл, 16817 ОС (из этилацетата)Ек 20 (с 00 Од хлороформ), по ТСХ одно пятнос Кг 0,69 (система гексан - этилацетат, 19, проявитель - насыщенный раствор КМЦО 4).Острая токсичность 3-кето-10(1 д)-эпокси-гвай-11113)-ен-6,12-олида изучалась в 2-ном растворе диметилсульфоксида (ДМС 0) по общепринятому в токсикологии методу (В.А,Чернов,1971) на интактных мышах (масса 20-2 д г) и интактных белых беспородных крысах (масса 120-130 г) обоего пола при однократном внутрибрюшинном введении. Полученные результатыобработаны статистически (Н,А.Беленький 1963) Лддо для мышей 1 д 0170 мг/кг, для крыс - 280-310 мг/кг. При вскрытии павших животных макроскопически отмечены полнокровность внутренних органов, расширение сосудов 6 рыжейки тонкой.и толстой кишки. Хроническая токсичность. В опытах с перевиваемыми-опухолями максимально переносимые дозы (МПД) веществапри ежедневном внутрибрюшинном вве дении в течение 5 дней составляли для мышей 15 мг/кг, для крыс 25 мг/кг. В этих дозах не наблюдалось выраженного токсического действия на животных и их гибели. При вскрытии забитых в конце животных изменений со стороны внутренних органов не выявлено. противоопухолевая активность 3-кето-10(1 Ц)-эпокси-гвай-11(13)-ен-6,12-олида изучалась на мышах и крысах с исходными лимфосаркомой Плисса(ЛСП), карциносаркомой Уокера (КСУ) саркомой ЦБ (С-дБ), альвеолярным раком печени (РС-1), саркомой 180(С-180), саркомой 37 (С-37), лимфоцитарной лейкемией.Р-338, лимфоидной лейкемией Ь-210. Противоопухолевое действие вещества определялось прив 2-ном растворе диметилсульфоксида (ДМСО) в течение 5 дней в МПД. Лечение животных после трансплантации опухолей начиналось через 2 д ч для мышей и с момента измеримыхопу холевых узлов для крыс. Контрольные и подопытные группы содержали по 615 животных. для оценки противоопухолевой активности 3-кето-10(1 д)-эпокси-гвай-11(13)-ен-6,12-олида пользовались процентом торможения роста опухолей, определяемым непосредственно после окончания лечения (В.А.Чернов, 1971). Результаты исследований обрабатывались статистически с вычислением Е критерия по Стьюденту. 3-Кето-10(1 д)-эпокси-гвай-11(13)-ен-6,12-олид (1) в максимально переносимой дозе (МПД) значительно тормозит рост карциносаркомы Уокераже оказывал выраженное действие на развитие исходных лейкоза лимфоцитарной лейкемии Р-398 (удлинение продолжительности жизни на 10 Ц),лимфоидной лейкемии Ь 1210 (УПЖ- 62). Изучаемый 3-кето-10(1 д)-эпокси-гвай-11(13)-ен-6,12 олида (1) в максимально переносимых дозах вызывал выраженный противоопухолевый эффект в отношении саркомы-д 5, резистентнойТаким образом, 3-кето-10(1 д)-эпокси-гвай-11(13)-ен-6,12-олид (1) малое токсичен при внутрибрюшинном введении и в максимально переносимых дозах обладает выраженным противоопухолевым действием.При сравнении со структурным аналогом испытуемого вещества эстафиатином (Т-1) выявлено различие в спектре противоопухолевого действия. К аналоГУ (Т 1) малочувствительны лимфосаркома Плисса (23,3 ингибирования),саркома 5 (312) саркома-180(26,Ц) лейкоз лимфоцитарной лейкемии Р-388 (УПЖ-16,1) и лимфоидная лейкемия Ь 1210 (УЛ-12 д), а также саркома-ДБ, резистентная к 5-фторурацилу (213 торможения).другой структурный аналог заявляемого соединения сесквитерпеновый лактон гваянового типа анобин выделенный из тысячелистника благородного, отличается по спектру противоопухолевого действия при МПД 20 30 мг/кг ингибирует рост опухолевых штаммов лимфосаркомы Плисса (602), альвеолярного рака печени РС-1 (751), КЭРЦИНОМЫ Герена (852), лимфосаркомы Плисса, устойчивой к проспидину (952)Следовательно, 3-кето 10(1 Ц)-эпокси-гвай-11(13)-ен-6,12-олид обладает сравнительно более широким спектром ,противоопухолевой активности в отношении штаммов лимфосаркомы Плисса,карциносаркомы Уокера, саркомы-дБ,альвеолярного рака печени РС 1 саркомы-180, саркомы-Ц 5 резистентной к 5 Фторурацилу, лимфоцитарной лейкеМИИ Р 388 И лимфоидной лейкемии Ь-1210.В условиях эксперимента препарат колхамин обладает следующим спектром противоопухолевого действия в дозе 2,0 МГ/кг при ежедневном внутрибрюшинном введении животным в течениет 5 дней слабо тормозит рост лимфосаркомы Плисса (5 д,5), карциносаркомы Уокера (3 О 1) саркомы-д 5 (2 О,д 2) альвеолярного рака печени РС-1 (265 Ъ саркомы-180 (1 дд). В сравнении с колхамином изучаемое вещество малотоксично МПД в хронических опытах составляет 15-25 мг/кг против2,0 мг/кг для колхамина. В отличие от колхамина к данному веществу высокочувствительны лимфосаркома Плисса,карциносаркома Уокера саркома-дБ,саркома-180 (689-90,9). Кроме того,З-кето 10(1 Ц)-эпокси-гвай-11(13)доступность исходного для синтеза природного лактона эстафиатина. который обнаружен в более 5 видах растений.3-Кето-10(1 д)-эпокси-эстафиатин в сравнении со структурными аналогамиэстафиатином и анобином обладает ши роким спектром выраженной противоопу 8холевой активности ингибирует на Ч 36-90,9 рост опухолевых штаммов лимфосаркомы Плисса карциносаркомы Уокера саркомы-дБ, альвеолярного рака печени. саркомы-180, саркомы-37 и удлиняет среднюю продолжительность жизни (УПЖ) при лейкемии Р-388 и Ь-1210 на 6210 д. чКроме того, в сравнении с широко применяемым в онкологической практике препаратом колхамином 3-кето-10(1 д)7 эпокси-эстафиатин малотоксичен МПД в хронических опытах при внутрибрюшинном введении составляет 15-25 мг/кг против 1-2 мг/кг для колхамина.Верстка КазпатентШ Исп 0 лНИтелЬДЬГорбуН 0 в Ответственный за выпуск ЭЗ. Фаизова