Устройство для иммунохроматографического анализа наркотических и лекарственных средств в моче человека

КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ полоску, состоящую из твердой полимерной подложки, на которой последовательно уложена рабочая поверхность в виде мембраны из пористого материала, пропитанного реактивным веществом,прозрачная поверхность и белая поверхность с тестовой зоной для наблюдения результатов, при этом устройство содержит прямоугольный корпус из синтетического материала,с жестко укрепленными 3-11 многослойными полосками, в средней части корпуса выполнены прямоугольные вырезы, совпадающие с тестовой зоной полосок для наблюдения результатов, причем часть рабочей поверхности в виде мембраны пропитана конъюгированными антигенами одного из анализируемых наркотических или лекарственных средств и козьими антителами и одним из своих концов выходит за пределы корпуса, другой конец мембраны наложен на ярлык, содержащий микрочастицы коллоидного золота с коньюгированными на них специфическими моноклональными антителами, соответствующими одному из анализируемых средств при следующих минимальных концентрациях в нг/мл, а именно, морфину 300, марихуане - 50, кокаину - 300, амфетамину 1000, метамфетамину - 500, фенциклидину - 25,метадону - 300, метилендиоксиметамфетамину 1000, барбитуратам - 300, бензодиазепинам - 300 и трициклическим антидепрессантам - 1000.(54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО АНАЛИЗА НАРКОТИЧЕСКИХ И ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ В МОЧЕ ЧЕЛОВЕКА(57) Изобретение относится к медицине, в частности, к анализаторам для выявления в жидкости аналитов, в частности длядиагностики одноэтапного, быстрого, качественного и одновременного выявления наркотических лекарственных средств и их метаболитов в моче человека методом иммунохроматографического анализа. Устройство для иммунохроматографического анализа наркотических и лекарственных средств в моче человека,включающее многослойную 17479 Изобретение относится к медицине, в частности,к анализаторам для выявления в жидкости аналитов,в частности, длядиагностики одноэтапного,быстрого,качественного и одновременного выявления наркотических,лекарственных средств и их метаболитов в моче человека методом иммунохроматографического анализа. Иммунохроматографический анализ основан на иммунохимической реакции взаимодействия антиген-антител и используется в качестве индикатора реакции маркированных ферментами антител или антигенов. Благодаря широкому спектру определяемых антител или антигенов, а также возможности автоматизации при чтении результатов и постановке реакции, он отлично зарекомендовал себя при диагностике различных наркологических заболеваний. Известное устройство для проведения твердофазного гетерогенного иммуноферментного анализа включает 96-луночные полистироловые планшеты и многоканальные фотометрические анализаторы, имеющие 8 или 96 каналов (Алипов А.Н.,Баштанов А.В. Иммуноферментные фотометрические анализаторы // Пятидесятая научно-техническая конференция С-Петербургского государственного университета телекоммуникаций. Санкт-Петербург, 20-24 января, 1997 г. СанктПетербург, 1997). Однако известное устройство достаточно сложно в эксплуатации, так как при этом предполагается формирование многослойного комплекса на твердой фазе за счет последовательного проведения иммунохимических реакций, удаление на каждом этапе несвязавшихся компонентов, проведение ферментной реакции и регистрацию продукта этой реакции. Наиболее близким к предлагаемому изобретению является многослойное устройство для проведения иммунохроматографического анализа проточных или наносимых пипеткой жидкостей с целью выявления в ней аналита, а именно наркотических и лекарственных средств в моче (патент США 5500375, кл 01 33/558, 1998). Оно представлено многослойной полоской, которая содержит твердую полимерную подложку, на которой последовательно расположены рабочая поверхность с реактивным веществом, прозрачная поверхность и белая с оконным вырезом для результатов. Однако конструктивные особенности этого устройства не позволяют одноэтапно, быстро и одновременно проводить иммунохроматографические анализы на несколько наркотических и лекарственных средств, что ограничивает его информативность. Кроме того, отсутствие в нем процедурного контроля за наличием реакции антиген-антитело уменьшает его надежность и снижает качество получаемых результатов. Задачей изобретения является разработка устройства для одноэтапного,быстрого,качественного и одновременного выявления в моче 2 наркотических, лекарственных средств и их метаболитов. Технический результат - повышение надежности устройства и упрощение его эксплуатации, а также увеличение информативности диагностирования и повышение качества получаемых результатов. Технический результат достигается тем, что в устройстве для иммунохроматографического анализа наркотических и лекарственных средств в моче человека,включающее многослойную полоску, состоящую из твердой полимерной подложки, на которой последовательно уложена рабочая поверхность в виде мембраны из пористого материала, пропитанного реактивным веществом,прозрачная поверхность и белая поверхность с тестовой зоной для наблюдения результатов, при этом устройство содержит прямоугольный корпус из синтетического материала,с жестко укрепленными 3-11 многослойными полосками, в средней части корпуса выполнены прямоугольные вырезы, совпадающие с тестовой зоной полосок для наблюдения результатов, причем часть рабочей поверхности в виде мембраны пропитана коньюгированными антигенами одного из анализируемых наркотических или лекарственных средств и козьими антителами и одним из своих концов выходит за пределы корпуса, другой конец мембраны наложен на ярлык, содержащий микрочастицы коллоидного золота с коньюгированными на них специфическими моноклональными антителами, соответствующими одному из анализируемых средств при следующих минимальных концентрациях в нг/мл, а именно,морфину -300, марихуане - 50, кокаину - 300,амфетамину - 1000, метамфетамину - 500,фенциклидину 25,метадону 300,метилендиоксиметамфетамину - 1000, барбитуратам- 300, бензодиазепинам - 300 и трициклическим антидепрессантам - 1000. Технический результат достигается тем, что конструктивные особенности предлагаемого устройства позволяют одновременно, в течение 5 минут, выявить в моче человека наличие наркотических или лекарственных средств и их метаболитов методом иммунохроматографического анализа. Этот анализ является качественной пробой,при помощи которой не может быть оценено количество наркотиков и лекарственных средств и их метаболитов, присутствующих в незагрязненных примесями человеческой моче. Он дает предварительные аналитические результаты,различаемые только положительные и отрицательные образцы. В положительном результате отражено лишь то, что образец содержит наркотики или лекарственные средства в концентрациях выше пороговой, причем наличие в моче других соединений в концентрации 100 нг/мл не мешают их определению. Результаты тестирования могут быть использованы для предварительного освидетельствования лиц,подозреваемых в употреблении наркотиков на рабочих местах, а также в случае наркологической настороженности 17479 или быстрого предварительного тестирования. Чтобы получить подтвержденный аналитический результат, должен быть применен специфический альтернативный химический метод. Газхроматография, масс-спектрометрия - наиболее предпочтительные методы. Устройство представлено на фиг. 1 - общий вид,схема анализа а) отрицательный результат наркотик не выявлен б) положительный результат наркотик выявлен, в) и г) ошибка тестирования анализ необходимо повторить фиг. 2 многослойная полоска в проекциях. Устройство содержит прямоугольный корпус 1 с защитным колпачком 2 из синтетического материала, с жестко укрепленными многослойными полосками 3, количество которых зависит от выявления конкретных наркотических или лекарственных средств, в диапазоне от 3 до 11 наименований. Многослойная полоска 3 состоит из твердой полимерной подложки 4, на которой последовательно уложена рабочая поверхность 5. Она состоит из мембраны 6 - пористого материала и ярлыка 7, сверху которого расположена прозрачная поверхность 8 и белая поверхность 9 с тестовой зоной 10 для наблюдения результатов. В средней части корпуса 1 выполнены прямоугольные вырезы 11, совпадающие с тестовой зоной 10 для наблюдения результатов. Мембрана 6, пропитанная конъюгированными антигенами одного из анализируемых наркотических или лекарственных средств и козьими антителами, одним из своих концов 12 она выходит за пределы корпуса 1, а другой ее конец 13 стыкуется с поверхностью ярлыка 7. Ярлык 7 содержит микрочастицы коллоидного золота с конъюгированными на них специфическими моноклональными антителами,соответствующими одному из анализируемых средств при следующих минимальных концентрациях в нг/мл, а именно, морфину - 300,марихуане - 50, кокаину - 300, амфетамину - 1000,метамфетамину - 500, фенциклидину - 25, метадону- 300, метилендиоксиметамфетамину - 1000,барбитуратам - 300, бензодиазепинам - 300 и трициклическим антидепрессантам - 1000. Устройство работает следующим образом. Свежие образцы мочи, собранные в любое время суток помещаю в чистую стеклянную или пластиковую одноразовую емкость. С прямоугольного корпуса 1 с жестко укрепленными многослойными полосками 3 снимают защитный колпачок 2. Затем его вертикально вниз опускают в образец мочи на 30-60 секунд. При этом многослойная полоска 3 с полимерной подложкой 4 и частью рабочей поверхности 5 в виде мембраны 6,своим свободным концом 12 должна полностью погрузиться в образец до ограничительной линии. Под действием капиллярного эффекта образец поднимается вверх по пористой поверхности мембраны 6. Если наркотики или лекарственные средства присутствуют в образце в ниже минимальных, заранее оговоренных концентрациях,то они не нейтрализуют места связей, покрытых антителами частиц, тестовой зоны 10, которая пропитана козьими антителами и конъюгированными антигенами одного из анализируемых веществ. При этом неподвижный конъюгат, расположенный на ярлыке 7 и предохраняемый прозрачной поверхностью 8,захватывает покрытые антителами частицы. В результате в районе белой поверхности 9 тестовой зоны 10 появляется цветная полоса (Т). Далее образец проходит всю мембрану 6 и достигает ее конца 13, который стыкуется с поверхностью ярлыка 7, происходит реакция, при которой образуется цветная полоса (К), являющаяся процедурным контролем. Она показывает, что был добавлен нужный объем образца, и мембранное впитывание произошло. Наличие двух полос (К) и(Т) в тестовой зоне характеризуется отрицательной реакцией на наркотические или лекарственные средства (фиг. 1 а). В случае, если наркотики или лекарственные средства присутствуют в моче в минимальных концентрациях в нг/мл, а именно, по морфину - 300,марихуане - 50, кокаину - 300, амфетамину - 1000,метамфетамину - 500, фенциклидину - 25, метадону- 300, метилендиоксиметамфетамину - 1000,барбитуратам - 300, бензодиазепинам - 300 и трициклическим антидепрессантам - 1000, то они нейтрализуют места связей покрытых антителами частиц тестовой зоны 10, которая пропитана козьими антителами и конъюгированными антигенами одного из анализируемых веществ. В результате в районе белой поверхности 9 тестовой зоны 10 не появляется цветная полоса (Т). Далее образец проходит всю мембрану 6 и достигает ее конца 13, который стыкуется с поверхностью ярлыка 7, происходит реакция, при которой образуется цветная полоса (К), являющаяся процедурным контролем. Наличие одной полосы в тестовой зоне (К) характеризует положительную реакцию на наркотические или лекарственные средства (фиг 1 б, средняя полоса). Если в течение 15 минут цветные полосы не выявлены (фиг. 1 в) или появляется полоса на уровне маркировки (Т) без полосы на уровне маркировки(К) (фиг. 1 г), результаты интерпретировать нельзя. Необходимо повторить тестирование с помощью нового набора полосок. Таким образом, предлагаемое устройство позволяет одноэтапно, быстро, качественно и одновременно выявить наркотические,лекарственные средства и их метаболиты в моче человека методом иммунохроматографического анализа. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Устройство для иммунохроматографического анализа наркотических и лекарственных средств в моче человека, содержащее многослойную полоску из твердой полимерной подложки, на которой последовательно расположены рабочая поверхность в виде мембраны из пористого материала,пропитанного реактивным веществом, прозрачная поверхность и белая поверхность с тестовой зоной 3 17479 для наблюдения результатов, отличающееся тем,что оно выполнено из синтетического материала и виде прямоугольного корпуса с жестко укрепленными 3-11 многослойными полосками, в средней части корпуса выполнены прямоугольные вырезы, совпадающие с тестовой зоной полосок для наблюдения результатов, причем часть рабочей поверхности пропитана конъюгированными антигенами одного из анализируемых средств и козьими антителами и одним концом выходит за пределы корпуса, другой конец наложен на ярлык, содержащий микрочастицы коллоидного золота с конъюгированными на них специфическими моноклональными антителами, соответствующими одному из анализируемых средств при следующих минимальных концентрациях, нг/мл морфину - 300,марихуане - 50, кокаину - 300, амфетамину - 1000,метамфетамину - 500, фенциклидину - 25, метадону 300,метилендиоксиметамфетамину 1000,барбитуратам - 300, бензодиазепинам - 300 и трициклическим антидепрессантам - 1000.