Среда для хранения копрологического материала для паразитологических исследований

(51) 01 1/00 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ собой антифриз, в составе которого присутствует этиленгликоль в массовой доле 50-60 с другими технологическими добавками. Фиксируемый биологический субстрат(фекалии) помещается в антифриз в объемном соотношении сохраняемого материала и консерванта 11. Законсервированный таким образом материал хранится до исследования. Технические и организационные преимущества вновь предлагаемой среды для хранения копрологического материала для паразитологического исследования состоят в ее доступности в лабораторных и полевых условиях,хорошей консервирующей способности для биосубстрата и инвазионных элементов паразитов,слабой испаряемости,отсутствии летучих компонентов,дезодорации,дезинфекции и дезинвазии фекалий, просветляющем эффекте,пригодности для всех видов исследования(72) Тарасовская Наталия Евгеньевна Булекбаева Ляззат Токкановна(73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Павлодарский государственный педагогический институт Министерства образования и науки Республики Казахстан(54) СРЕДА ДЛЯ ХРАНЕНИЯ КОПРОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ(57) Изобретение относится к области биологии,ветеринарии и ветеринарно-санитарной экспертизы,в частности, к способам хранения нативных биосубстратов для паразитологических исследований. Среда для хранения копрологического материала для паразитологических исследований представляет Изобретение относится к области биологии,ветеринарии и ветеринарно-санитарной экспертизы,в частности, к способам хранения нативных биосубстратов для паразитологических исследований. Использование готовых технических и хозяйственно-бытовых веществ для хранения копрологического материала предлагалось неоднократно. Известна среда для хранения фекалий человека,включающая 1 раствор детергента (любой стиральный порошок) (Генис Д.Е. Медицинская паразитология. - М. Медицина, 1975. с.47-48). Эта же среда многократно практиковалась в отношении ряда видов гельминтов сельскохозяйственных животных (Котельников Г.А. Гельминтологические исследования животных и окружающей среды Справочник. - М. Колос, 1983. с.208, ил. с.30). Однако известная среда не в полной мере обеспечивает сохранность материала в течение длительного времени, поскольку щелочная среда вызывает автолиз яиц и постепенное снижение их количества в консервирующем растворе. Обычно рекомендуют хранить фекалии в растворах детергентов не более двух недель. Сведений о дезинфекции и дезинвазии консервируемого материала, сохранности протистофауны в известных источниках нет. К тому же при использовании 1 ных растворов стирального порошка в экспедиционно-полевых условиях приходится транспортировать большой объем фиксированного материала (при весовом соотношении фекалий и консервирующей жидкости не менее, чем 15). Известна среда для хранения фекалий для гельминтологических исследований с использованием 20-30-ного раствора силиката натрия(разведенного водой конторского силикатного клея) (Предварительный патент РК 18489 от 15.06.2007 г., кл. А 01 1/00). Единственным недостатком данного консервирующего средства можно считать быстрое высыхание при длительном хранении в негерметичной посуде с образованием твердых стеклоподобных кусочков. К тому же силикат натрия, поступающий в продажу в виде 50-ного раствора под названием Клей конторский силикатный (ГОСТ) и жидкое натриевое стекло(ГОСТ 13078-81) не всегда доступен в экспедиционно-полевых условиях, так как не является востребованным веществом при сборе полевого материала. Для надежности хранения рекомендуется трехкратное превышение массы раствора над массой копрологического материала,что создает неудобства при транспортировании экспедиционных сборов. Задачей изобретения является расширение арсенала консервирующих средств для хранения копрологического материала с увеличением длительности и надежности хранения в любых условиях, при доступности консервирующего средства,полной сохранности инвазионных элементов паразитов, достижении просветляющего эффекта для нативного исследования 2(просмотра нативного мазка). Для решения поставленной задачи предлагается использование в качестве консервирующей среды для копрологического материала антифриза,представляющего собой 60-ный водный раствор этиленгликоля с другими технологическими добавками (СТО 63252493-001-2011). Технический результат,обеспечиваемый изобретением, выражается в следующем 1) Доступность предлагаемой консервирующей среды, широко использующейся для технических и хозяйственно-бытовых целей, в любых условиях лабораторий,животноводческих хозяйств,в экспедиционнополевых выездах. 2) Хорошая консервирующая способность среды,позволяющая длительно и надежно сохранять любые инвазионные элементы в фиксированных фекальных массах (яйца и личинки гельминтов,ооцисты эймерий,инцистированные формы саркодовых и жгутиконосцев, личинки желудочных оводов). 3) Неиспаряющийся основной компонент предлагаемой технической жидкости этиленгликоль, позволяющий надежно сохранять биосубстраты без высыхания даже в негерметичной посуде. 4) Отсутствие запахов и летучих компонентов в самой консервирующей жидкости, исключающей аспирационное попадание консерванта в организм. 5) Консервирующая жидкость аннулирует все запахи от фекалий. 6) Консервант тормозит развитие всех инвазионных элементов паразитов и размножение микроорганизмов, обеспечивая дезинфекцию и дезинвазию материала. 7) Консервирующая жидкость не приводит к деформации инвазионных элементов и фрагментов паразитов, не затрудняя дифференциальную диагностику по пропагативным стадиям в фиксируемом материале. 8) Антифриз обладает просветляющими свойствами благодаря физикохимическим свойствам этиленгликоля,обеспечивая возможность непосредственного исследования консервированных материалов в нативных мазках, без использования дополнительных просветляющих средств. К тому же, в отличие от глицерина, этиленгликоль и его водная композиция в антифризе не приводят к осмотической деформации просветляемых объектов,даже временной. 9) Высохшие фекалии быстро размягчаются в консервирующей жидкости и образуют удобную для исследования консистенцию. 10) Для надежной консервации фекалий требуется минимальный объем фиксирующей жидкости (при соотношении 11), что обеспечивает не только экономию консерванта, но и удобство хранения и транспорта материала. 11) Копрологический материал может быть исследован на наличие яиц гельминтов и других инвазионных элементов паразитов с обогащением 30082 при возможности использования любых солевых растворов с высокой плотностью. Среда для хранения копрологического материала для паразитологических исследований представляет собой антифриз, в составе которого присутствует этиленгликоль в массовой доле 50-60 с другими технологическими добавками (СТО 63252493-0012011). Фиксируемые фекальные массы помещаются в антифриз в объемном соотношении сохраняемого материала и консерванта 11. Законсервированный таким образом материал хранится до исследования. Испытания предлагаемой среды для хранения паразитологического материала показали следующие результаты. Пример 1. Фекалии собаки (той-терьера) были зафиксированы в антифризе 26 ноября 2013 г. в объемном соотношении 11 через два дня после сбора. Некоторые яйца токсокары уже начали свое развитие (находились на стадии нескольких бластомеров). Помимо гельминтов, собака была заражена цистоизоспорозом,в микрофлоре кишечника преобладали дрожжеподобные грибы. Контрольный просмотр нативных мазков из фиксированного субстрата произведен через 1, 2, 3 недели, 1 месяц, 2 месяца. Изменений в состоянии яиц нет, ооцисты кокцидий, дрожжевые грибки и непереваренные остатки пищи сохранились без изменений. Оболочки яиц хорошо просветлились этиленгликолем. Запаха от копрологического материала не отмечено. В течение 4 месяцев (срок наблюдений) изменений в фиксированном материале и инвазионных элементах паразитов не произошло. Пример 2. Фекалии беспородной собаки,инвазированной токсокарозом,зафиксированы 21.12.13 г. в антифризе в объемном соотношении консерванта и материала 11 в день сбора. Большинство яиц содержали только одну эмбриональную клетку, в некоторых уже началось деление на бластомеры. Контрольный просмотр нативных мазков был сделан через 1, 2, 3 недели, 1 месяц, 1,5 месяца. Количество яиц в субстрате не уменьшилось,изменения в их состоянии не произошло. Непереваренные кормовые остатки хорошо сохранились. Запаха от фекалий и признаков микробной порчи материала не было. Фиксированный субстрат хорошо сохранился в течение всего срока наблюдений (3 месяца). Пример 3. Фекалии собаки (породы хаски) зафиксированы 9.01.14 г. в антифризе в объемном соотношении 11 в день сбора. В развитие тронулись только единичные яйца (образовались 2-4 бластомера). В микрофлоре преобладали дрожжеподобные грибы. Из непереваренных остатков пищи отмечались овощная клетчатка и крахмальные зерна. Контрольный просмотр нативных мазков,проведенные через 1, 2, 3, 4 недели после консервации биологического материала, показал полную сохранность яиц гельминтов, микрофлоры,непереваренных пищевых остатков. В течение 2,5 месяцев (срок наблюдения) изменений инвазионных элементов гельминтов, запаха и признаков микробной порчи не отмечено. Пример 4. Фекалии овец,зараженных стронгилятами, зафиксированы в антифризе через 45 дней после сбора в животноводческом хозяйстве(до этого хранились в холодильнике). Объемное соотношение консерванта и материала 11. Через 2, 3, 4 недели зафиксирована полная сохранность яиц стронгилят признаков лизиса инвазионных элементов гельминтов и уменьшения их количества не отмечено. Фекалии приобрели мягкую консистенцию, удобную для приготовления нативного мазка. Часть фекалий была исследована методом обогащения в солевом растворе достигнуто полное всплывание яиц стронгилят на поверхность. Пример 5. Фекалии кроликов были зафиксированы в антифризе в объемном соотношении 11 через неделю после доставки в лабораторию из личного хозяйства. К моменту помещения материала в консервирующую жидкость на поверхности фекалий отмечены белые пушистые колонии псевдомицелия грибов рода . В таком виде фекалии были зафиксированы в антифризе при соотношении материала и консерванта 11 по объему. Через 2, 3, 4 недели при просмотре обнаружены ооцисты эймерий, количество которых по мере хранения субстрата не уменьшилось. Хорошо сохранились дрожжеподобные грибы, имевшиеся в подпорченном материале. Дальнейшего размножения грибов и бактерий не произошло,признаков микробной порчи материала не отмечено. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Среда для хранения копрологического материала для паразитологических исследований, включающая использование готовых технических и хозяйственно-бытовых веществ, отличающаяся тем, что в качестве консервирующего вещества для копрологичсекого материала используется антифриз при обьемном соотношении консервирующей жидкости и биосубстрата 11.