Способ получения дерматоцитоглобулина для лечения и превентизации аллергических и аутоиммунных дерматитов

(51) 61 35/12 (2006.01) 61 35/36 (2006.01) 61 17/00 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ Техническим результатом является получение эффективного препарата для лечения и превентизаций аллергизации и аутоиммунизации при дерматитах. Способ получения дерматоцитоглобулина включает в себя следующие технические операции получение взвеси ткани из тканей эпидермиса,дермы и подкожной клетчатки крупного рогатого скота или лошади, гипериммунизация животных собак,овец,ослов,кроликов/,получение гипериммунной сыворотки,выделение из полученной сыворотки гамма-глобулинов,растворение гамма-глобулинов в 0,9 растворе хлорида натрия, содержащего 1,8 гипосульфита натрия с лиофильным высушиванием.(72) Омарбекова Гульжан КабылжановнаМуралинов Каримхан Каирханович Муралинова Жулдыз КаримхановнаКозинда Оскар(56) Предварительный патент РК 17718, кл А 61 35/16, А 61 Р 37/08, 15.09.2006(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДЕРМАТОЦИТОГЛОБУЛИНА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРЕВЕНТИЗАЦИИ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ И АУТОИММУННЫХ ДЕРМАТИТОВ(57) Изобретение относится к области ветеринарной иммунологии, в частности, к способам получения дерматоцитоглобулина для лечения и превентизаций от аллергических и аутоиммунных дерматитов. Изобретение относится к Ветеринарной иммунологии, в частности к аллергической патологии. Известен способ получения гамма-глобулинов из нормальной сыворотки крови с помощью фракционирования сывороточных белков этанолом(Хохлачв Н.В. и др. Препараты из крови человека. Гамма-глобулин. //Руководство по вакцинному и сывороточному делу. М., 1979, с.322-328). Однако, полученные из нормальной сыворотки иммуноглобулины не обладают специфическими свойствами и поэтому не могут применяться для лечения и профилактики от аллергизации при дерматитах. В настоящее время специфические препараты направленного действия для лечения аллергизации не разработаны. Применяемые методы лечения связанные с ингибированием синтеза аутоантител,при иммунологической фазе аллергического процесса цитостатическими препаратами и гормонами оказывают только временное действие. Известен способ получения 02426540 С 1 201108202011/232009142700/15 20091119 Предложено применение арбидола (1-метил-2-фенилтиометил-3-карбэтокси 4-диметиламино-метил-5-ок си-6-бромин-дола гидрохлорида моногидрата) или его фармацевтический приемлемых солей и/или гидратов для изготовления топических лекарственных средств, предназначенных для лечения воспалительных и аллергических заболеваний кожи и топическая фармацевтическая композиция на его основе. Показано лечебное действие - уменьшение повреждения кожи на стандартных моделях аллергического и контактного дерматита с минимальным количеством побочных эффектов. Недостатком данного способа является использование этого препарата,который предназначен только для лечения аутоиммунных болезней мышц животных. Наиболее близким техническим решением является способ получения Предварительный Патент (А)(11) 17718 (51)7 А 61 К 35/16, А 61 Р 37/08(45) 15.09.2006, бюл. 9 (72) Муралинов Каримхан Каирханович Омарбекова Ур-жан Жакатаевна Сайдулдин Тлеуберды Сайдулдаевич Саттарова Рано Сейто-маровна Муралинова Жулдыз Каримхановна (73) . Способ получения антииммуноглобулина для лечения и превентизаций аллергических болезней животных, включающий подкожную гипериммунизацию животныхпродуцентов конъюгатомЕ-БСА с адъювантом Фрейнда, с последующим получением от них сыворотки крови, выделением гаммаглобулинов путм фракционирования этанолом,стабилизированных хлоридом натрия и гипосульфитом натрия, отличающийся, тем, что в качестве взвеси используют конъюгатЕ-БСА. Недостатком данного способа является использование антииммуноглобулина, который предназначен только для лечения и профилактики аллергических болезней животных. 2 Техническим результатом является способ получения дерматоцитоглобулина для лечения и профилактики аллергических и аутоиммунных дерматитов, путем фракционирования этанолом и стабилизированием хлоридом натрия и гипосульфитом натрия. Технический результат достигается следующим методом животных доноров (ослов, овец и кроликов) иммунизируют трижды взвесью тканей эпидермиса, дермы и подкожной клетчатки лошади или крупного рогатого скота в адъюванте Фрейнда подкожно из расчета 0,25 мл/кг живой массы,интервалом 7 дней. Взятие крови проводят на 21 день после последней иммунизации,полученную гипериммунную сыворотку - идиотип против ткани тканей эпидермиса, дермы и подкожной клетчатки,проверяют на активность, которая должна быть в пределах от 15120 до 110240. Из полученного идиотипа против ткани тканей эпидермиса, дермы и подкожной клетчатки выделяют иммуноглобулины методом фракционирования этанолом/ Осажденный иммуноглобулин растворяют в изотоническом растворе хлорида натрия содержащего 1,8 гипосульфита натрия(стабилизатор и сорбент). Препарат разливают в ампулы по 2 или 5 мл и подвергают лиофильной сушке. Перед употреблением содержимое ампулы растворяют в 2 мл дистиллированной воды. При хранении препарата в температурном режиме 4 С в течение 2-х лет препарат сохраняет первоначальную активность. Препарат вводится подкожно двукратно или трехкратно с интервалом 5-7 дней. При показаниях повторное применение по этой же схеме спустя 3-4 недели. Применение препарата полученного данным способом обуславливает лечебный эффект при аллергических и аутоиммунных дерматитах у животных. Применение с профилактической целью показало его хорошее превентивное действие, на месте инъекции возможно возникновение небольшого покраснения с незначительным отеком,которое проходит в течение 2-3-х дней без последствий. Пример В качестве антигена использовали ткань из тканей эпидермиса, дермы и подкожной клетчатки крупного рогатого скота или лошади, которую измельчают ножницами, затем тщательно отмывают сначала дистиллированной водой,затем физиологическим раствором до полного исчезновения видимых примесей крови,гомогенизируют с прибавлением физиологического раствора из расчета 9 мг на 1 г ткани. Полученную суспензию используют в качестве антигена. Антиген подвергают обработке антибиотиками (по 10 тыс ЕД пенициллина и 0,01 г. стрептомицина на 1 мл материала), выдерживают 2 часа в термостате при температуре 37 С. Соотношение антигена и адъюванта Фрейнда, берут 12. Антиген вводят подкожно, из расчта 0,25 мл/кг живой массы с интервалом 7 дней, трхкратно. В качестве животных-доноров используют ослов,овец или кроликов. Взятие крови от ослов проводят на 21-й день после последней иммунизации в объме 2-3 литров. Полученную сыворотку консервируют 0,5 раствором фенола и проверяют на активность, стерильность и токсичность. На бактериальную стерильность сыворотку проверяют посевом на МПБ и питательный агар. Токсичность полученных препаратов проверяют путм подкожного введения кроликам в объме по 0,5 мл, с использованием по 3 кролика на каждую серию, а также шести белых мышей, которым вводят внутрибрю-шинно по 0,3 мл, с последующим наблюдением за всеми животными в течение 10 дней. Из полученной гипериммунной сыворотки выделяли, методом фракционирования этанолом,иммуноглобулины, растворяли их в изотоническом растворе хлорида натрия, содержащим 1,8 гипосульфита натрия. Препарат разливали в ампулы по 2 или 5 мл и подвергали лиофильной сушке. Перед употреблением содержимое ампулы растворяли в 2 мл дистиллированной воды. Дерматоцитоглобулин применялся для лечения или профилактики аллергических и аутоиммунных дерматитов у животных принадлежащих населению г. Алматы и Алматинской области. Всего дерматоцитоглобулин был применен с положительным лечебным эффектом на 42 лошадях,68 коровах, 87 собаках и 146 овцах. Введение дерматоцитоглобулина позволило вылечить или полностью предотвратить у животных аллергизацию и аутоиммунизацию при дерматитах. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения дерматоцитоглобулина для лечения и превентизаций от аллергических и аутоиммунных дерматитов у животных,включающий подкожную гипериммунизацию животных-продуцентов взвесью с адъювантом Фрейнда, с последующим получением от них сыворотки крови, выделением гамма-глобулинов путм фракционирования этанолом,стабилизированных хлоридом натрия и гипосульфитом натрия, отличающийся, тем, что в качестве взвеси используют ткань из тканей эпидермиса, дермы и подкожной клетчатки крупного рогатого скота или лошади.