Способ доставки рифампицина в легкие и костный мозг с помощью эритроцитарных фармакоцитов в эксперименте

(51) 61 39/395 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ рифампицина в легкие и костный мозг с помощью аутологичных эритроцитарных фармакоцитов. Сущность способа Рифампицин включается методом обратимого гипоосмотического гемолизав так называемые тени эритроцитов эритроцитарные фармакоциты (ЭФ), максимальной разовой дозе 600 мг, из расчета на массу тела животного 25 мг/кг. После приготовления эритроцитарных фармакоцитов данным методом рифампицин вводится внутривенно медленно в бедренную вену животного. Таким образом, введение рифампицина в составе аутологичных эритроцитов позволяет больше и длительнее поддерживать высокую концентрацию антибиотика в сыворотке крови и внутренних органах, в частности, ткани легкого и губчатом веществе трубчатых костей, т.е. местах, обычно поражаемых туберкулезным процессом.(76) Цой Олег Гиленович Тайгулов Ерлан Агзамович Иманбаева Юлия Шокановна Бисенова Неля Михайловна Гуляев Александр Евгеньевич(56) Елизарьев А.Ю. Эфферентная терапия в предоперационной подготовке больных облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей Автореф. канд. мед. наук, Барнаул,1993 г(54) СПОСОБ ДОСТАВКИ РИФАМПИЦИНА В ЛЕГКИЕ И КОСТНЫЙ МОЗГ С ПОМОЩЬЮ ЭРИТРОЦИТАРНЫХ ФАРМАКОЦИТОВ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ(57) Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к фармакологии. Задачей предлагаемого изобретения является доставка Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии и фтизиатрии и в перспективе после доклинических испытаний,может быть использовано при лечении туберкулеза легких и других органов. Общеизвестно, что рифампицин,являющийся широко используемым антибиотиком базового этиотропного лечения туберкулеза,способен при введении в организм создавать в участках пораженной легочной ткани высокие и длительно сохраняющиеся бактериостатические концентрации. Данный антибиотик хорошо проникает в ткани и жидкие среды организма и обнаруживается в терапевтических концентрациях в плевральном экссудате, слюне, мокроте, содержимом каверн,костной ткани. Наибольшая его концентрация создается в тканях печени и почек. Способы введения рифампицина, такие как,пероральный и внутривенный, предлагаемые на сегодняшний день, режимы и схемы лечения туберкулеза, не всегда эффективны в плане профилактики или предупреждения развития устойчивости микобактерий туберкулеза к рифампицину. Всегда затруднительно создание концентраций рифампицина,превышающих среднетерапевтические и неизменяющихся до последующего введения стационарной концентрации в плазме и так называемых целевых органах (в данном случае - в легких и в губчатом веществе костей). Перспективность разработки методов направ ленного транспорта различных лекарственных препаратов осуществляемого клетками крови доказана рядом экспериментальных и клинических исследований Пивень Л.И., 2002 г В этой связи, наиболее удобными и малозатратными являются транспортные системы на основе собственных клеток крови не покрытых собственными антителами к органу мишени,эритроцитов (Генинг Т.П., Колкер И.И., Жумадилов Ж.Ш. Использование форменных элементов крови для направленной доставки химиотерапевтических и диагностических препаратов в очаг поражения // Антибиотики и химиотерапия. - 1988.-11.- с.867871. Цой О.Г. и др. 2011 г..,, ,// ., 1976,.4, . 70-83 Сарбаш В.И.,Тихонова А.Г., и др. Эритроциты - носители лекарственных препаратов. Российский химический журн. 200751(1)143-9 Пивень Л.И. Особенности фармакокинетики направленного транспорта антибиотиков, осуществляемого клетками крови Автореферат диссканд. мед. наук - Караганда,2002 г., с.20.2002 г., Цой О.Г. и др.2011 г. Самохин Г.П., и др. Эритроцит как потенциальный контейнер для направленного транспорта лекарств к 2 поврежднным участкам сосудистого русла // Бюллетень Всесоюз. кардиологического научного центра АМН СССР. - 1986. -1. - с.84-89 СипливаяЛ.Е.,и др. Иммуномодулирующая активность некоторых аминогликозидов, введнных в эритроцитарных носителях // Тр.4-го Рос. нац. конгресса Человек и лекарство - с.47-52. 2000 г. Конопля А.И., и др. Иммунотропное действие фторхинолонов, адсорбированных на мембранах эритроцитов и включнных в эритроцитарную строму // Морфогенез и регенерация. Сб. научных трудов, посвящнный 80-летию со дня рождения проф. Давида Ароновича Сигалевича. - Курск,КГМУ - 1999. с.24-27 Кирдей Е.Г., и др. О перспективах развития экстракорпоральной иммунокоррекции с использованием аутологичных клеток крови // Акт. Вопр. эксперим. и клин мет. Иркутск. - 1994. - с.101-104 Тайгулов Е.А. и др. Эритроцитарные фармакоциты в гепатобиллиарной хирургии - Алматы Медицина баспасы 2002 г. Жумадилов Ж.Ш., и др. Особенности включения некоторых антибиотиков в эритроцитарные тени систему целенаправленной доставки химио терапевтических препаратов // Антибиотики и химиотерапия. - 1990.- 11.- с.54-56 Дмитриева Л.А., и др. Характер и условия сорбции эритроцитами биологически активных веществ // Сибирский мед. Журн. - 1995. -2. - с.23-25), и их микровезикул (Генинг М.П., и др. // Антибиотики и химиотерапия 1988 г.,1, с.867-871), тромбоцитов( ,, ////. , 1978, . 298, . 1101-1107), лейкоцитов (Лохвицкий , и др. Способ лечения хирургической инфекции.1805390 А 1 Гордеев М.С. и др., 2000 г... // . -, 1979,155-166),также тромбоцитарно-лейкоцитарной взвеси (Елизарьев А.Ю., Эфферентная терапия в предоперационной подготовке больных облитерирующим атеро склерозом артерий нижних конечностей // Автореф. дисс.канд. мед. наук. - Барнаул. 1993 г.). Авторы считают, что органоспецифичность форменных элементов крови будет определяться в первую очередь следующими свойствами способностью лейкоцитов мигрировать в очаг воспаления,эритроцитов - фиксироваться эритрофагоцити рующими клетками, (в основном печени и селезнки), тромбоцитов - адгезировать на поврежднных участках интимы сосуда. Однако,несмотря на многочисленные исследования, идея использования аутологичных эритроцитов в качестве клеточных контейнеров для доставки рифампицина в очаги туберкулезного поражения остается до настоящего времени нереализованной. Задачей предлагаемого изобретения является внутривенное введение рифампицина в организм экспериментальных животных (кролики) с помощью аутологичных эритроцитарных фармакоцитов. Способ осуществляют следующим образом. Рифампицин включался методом обратимого гипоосмотического гемолизав так называемые тени эритроцитов - эритроцитарные фармакоциты (ЭФ) Жумадилов Ж.Ш., 1992 г., в максимальной разовой терапевтической дозе 600 мг,из расчета на массу тела животного-25 мг, который затем вводили внутривенно, однократно в бедренную вену беспородных кроликов массой 2800-3000 г, являющийся основной группой (15 животных). Контрольной группе (15 кроликов) рифампицин вводили традиционно внутривенно в бедренную вену в той же дозе. Эксперимент прекращали через 12 и 24 часов. Фармакокинетику рифампицина в сыворотке крови и тканях определяли методом диффузии в агар. В качестве тест микроба использовали штамм.Выбор состава питательных сред, тест-микробов и посевных доз, приготовление рабочих растворов рифампицина и используемого биологического материала производился по стандартному образцу мутности (10 единиц - 1109 в 1 мл.) Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских и биологических препаратов им. Л Тарасевича и данных литературы Пивень Л.И., 2002 Дмитриева и др. 1965. Биологическая активность рифампицина определялась методом последовательных разведений в жидких и плотных питательных средах. Расчет активности препарата производился по (средней) стандартной кривой. В случае прекращения эксперимента через 12 часов, определяемая концентрация рифампицина в сыворотке крови и в органах, с высокой степенью статистической достоверности (р 0,001) была выше во всех исследуемых биологических тканях у животных основной группы, т.е. получавших препарат в составе эритроцитарных фармакоцитов. Так, в сыворотке крови это превышение было в 4 раза, в легких - в 3,7 раза, костном мозге - в 3,1 раза. Через сутки после введения препарата, он определялся лишь в печени у кроликов основной группы в очень небольших концентрациях. Данный способ введения рифампицина позволяет применять его в фтизиатрии, в качестве таргетной терапии различных форм туберкулеза, что особенно важно при длительных курсах лечения, так как для них практически не определены средне терапевтические величины фармакокинетических параметров и существует давлению широкий диапазон концентраций, который связывают с достижением клинического эффекта. Кроме того,это позволяет уменьшить разовые дозы и удлинить время между введением препарата. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ доставки рифампицина в легкие и костный мозг в эксперименте, отличающийся тем,что вводят рифампицин включенный в аутологичные тени эритроцитов внутривенно,однократно в максимальной разовой терапевтической дозе из расчета 25 мг/кг животного.