Способ моделирования экспериментального гипопитуитаризма у собак

(51) 09 23/30 (2011.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(57) Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии. Способ моделирования экспериментального гипопитуитаризма у собак, включает вскрытие черепной коробки и твердой мозговой оболочки на уровне пересечения лобной, теменной и височной кости с ориентиром на зрительные нервы,определение расположения гипофиза, при этом после вскрытия полости черепа и твердой мозговой оболочки, последнюю отслаивают от костей черепа,приподнимают височную долю мозга и зрительные нервы, находят задний край хиазмы и серый бугор,подводят лигатуру к воронке гипофиза, затем лигатуру прижимают так, чтобы выключать портальные вены гипофиза. Способ позволяет сохранить воронку гипофиза,капсулу гипофиза, доли гипофиза и пещеристые синусы.(72) Жаныбеков Джурсунхан Есенбекович Каракушикова Айгуль Садвокасовна Искиндирова Айман Мансуровна(73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Казахский национальный медицинский университет им. С.Д.Асфендиярова Министерства здравоохранения Республики Казахстан(56) Харабаджахъян А.В., Дорохов Р.Н. К методике частичного удаления гипофиза у собак // Доклады к 3-ей объединенной научной конференции медицинского и научно- исследовательского институтов, Ростов-на-Дону, 1966, часть 2, с. 249250(54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ГИПОПИТУИТАРИЗМА У СОБАК Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии. Известен способ определения локализации гипофиза для проведения эксперимента у собак,включающий выполнение определения локализации и зондирования, при этом локализацию определяют по внешним костным ориентирам, а именно по переднему краю внутренней стороны скуловых отростков височной кости, зондирование осуществляют длинной иглой (Алексеев В.А. Определение локализации гипофиза по костным ориентирам. - Материалы 1-ой конференции патофизиологов Северного Кавказа,посвященная 120-летию со дня рождения И.И. Меченикова. - Махачкала. - 1965. - с. 16-17). Недостатками известного способа является то, что локализация гипофиза определяется только по внешним ориентирам, также зондирование длинной иглой может к привести повреждению не только гипофиза, но и пещеристых синусов, воронки гипофиза и самого мозга. Наиболее близким к заявленному способу является способ моделирования экспериментального гипопитуитаризма у собак, включающий проведения вскрытия черепной коробки и твердой мозговой оболочки на уровне пересечения лобной, теменной и височной кости с ориентиром на зрительные нервы,определение нахождения гипофиза, с последующим вскрытием капсулы гипофиза и удалением части или всего гипофиза (Харабаджахъян А.В., Дорохов Р.Н. К методике частичного удаления гипофиза у собак. Доклады к 3-ей объединенной научной конференции медицинского и научно-исследовательских институтов. - г. Ростов-на-Дону.- 1966.- часть 2 .- с. 249-250). Недостатками известного способа является то, что возникают сложности при удалении части или всего гипофиза, существует риск повреждения стенки кавернозных синусов, что может привести к развитию кровотечения, а также возможен отрыв ножки гипофиза от мозга. Задачей изобретения является разработка способа моделирования экспериментального гипопитуитаризма у собак, при использовании которого снижается травматичность, сохраняется анатомическая целостность портальных сосудов ножки гипофиза, капсулы гипофиза, пещеристой пазухи. Способ моделирования экспериментального гипопитуитаризма у собак, включает вскрытие черепной коробки и твердой мозговой оболочки на уровне пересечения лобной, теменной и височной кости с ориентиром на зрительные нервы, определение расположения гипофиза, при этом после вскрытия полости черепа и твердой мозговой оболочки,последнюю отслаивают от костей черепа,приподнимают височную долю мозга и зрительные нервы, находят задний край хиазмы и серый бугор,подводят лигатуру к воронке гипофиза, затем лигатуру прижимают так, чтобы выключать портальные вены гипофиза. Способ осуществляют следующим образом. Доступ осуществляют поэтапно-этап вскрытие полости черепа. Собаку фиксируют животом кверху. Рот собаки максимально открывают, чтобы мышечный отросток нижней челюсти опустился ниже скуловой дуги. Проводят дугообразный разрез кожи, чтобы середина его проходила параллельно орбитальной связки. Кожный лоскут отворачивают назад и книзу. Далее пересекают скуловую дугу в 2-х местах впереди у места при креплении орбитальной связки и сзади, несколько отступя в переди от суставного бугорка нижнечелюстной ямки височной кости. Височную мыщцу с поверхностными и глубокими фасциями отсекают вдоль места ее прикрепления к теменной и лобным костям с ориентиром на зрительные нервы, тупым путем отслаивают назад и книзу. Выкроенный таким путем мышечно-фасциальный лоскут позволяет сохранить в целостности глубокую височную артерию,которая его кровоснабжает и открывает место пересечения лобной кости с теменной и височной. В этом месте осторожно трепаном Гальта делают отверстие с таким расчетом, чтобы не повредить твердую мозговую оболочку.-этап вскрытие и отслоение твердой мозговой оболочки от костей черепа. В трепанационном отверстии проводят вертикальный разрез твердой мозговой оболочки мозга и осторожно отслаивают ее от костей черепа. Осторожно,изогнутым микрошпателем отодвигают височную долю мозга кверху и сразу же становится виден зрительный нерв,который также отодвигают к верху, пройдя вдоль него сзади от хиазмы и к низу от серого бугра, находят воронку гипофиза. Следует помнить, что пещеристые синусы у собак имеет тонкую стенку и очень легко повреждены.-этап мобилизация ножки гипофиза. К воронке гипофиза подводят лигатуру и прижимают ее, таким образом, чтобы выключить портальные вены гипофиза.- этап завершение операции. В конце операции,осторожно извлекают микрошпатель. Мышечнофасциальный лоскут укладывают на место и фиксируют кетгутом к апоневрозу, скуловую дугу укрепляют с помощью толстого шелка. Кожу зашивают наглухо. Этот способ позволяет как в остром, так и в хроническом опыте производить выключение всего гипофиза. Пример выполнения способа. Клиническую картину гипопитуитаризма у экспериментальных животных наблюдали на 15, 20 и 30 сутки. При этом обращали внимание на следующие клинические показатели 1 - общее состояние животного 2-апетит 3- двигательные реакции 4 реакция на внешние раздражения 5-состояние шерстного покрова животного 6-наличие отеков 7 частота пульса 8 - количество дыхательных движений 9-температуру 10-состояние ЖКТ 11-вес животного 12-состояние половых желез (яичка). Так на 15 сутки после гипофизэктомии у животных наблюдалось снижение аппетита, вплоть до отказа от пищи, снижение реакции на внешние раздражения. Также животные старались меньше двигаться, почти не отвечали на зов. При пальпации наблюдалось смягчение половых желез (яичек). На 20 сутки у экспериментальных животных отмечалось резкое ухудшение общего состояния. Малоподвижность приводила к отеку мягких тканей,особенно головы и туловища животного. Частота дыхания 415 в 1 минуту, пульс 835 в 1 минуту. Пульс слабый. Снижение веса животного. Яички мягкие на ощупь. На 30 сутки слабая реакция на внешние раздражения, аппетит резко угнетен, одышка при движении, количество дыхательных движений 468 в 1 минуту, пульс 763 в 1 минуту. Отек мягких тканей головы животного, снижение моторики желудочнокишечного тракта, появление рвоты после приема питии, задержка акта дефекации. Шерсть животного стала более мягкой. При пальпации половые железы(яички) дряблые, размеры их резко уменьшены. Нарушения сердечной деятельности подопытных животных выражались в развитии брадикардии. Таким образом, экспериментальная модель гипопитуитаризма позволила проследить динамику клинических проявлений недостаточности функции гипофиза,которая выражалась в развитии дыхательной и сердечно-сосудистой недостаточности,в отеке мягких тканей головы, снижение двигательной активности, угнетением реакции на внешние раздражения, нарушением моторики желудочнокишечного тракта, мягкости шерстного покрова,дряблости и уменьшением размеров семенников собаки. Все выше указанное свидетельствует о нарушении функции аденгогипофиза вырабатывающего тропные гормоны. Морфо-функциональное состояние гипофиза после экспериментального гипопитуитаризма исследованы также на 15, 20 и 30 сутки. Через 15 суток после гипофизэктомии микроскопически ткань гипофиза серо-красная, гомогенная. Абсолютный вес гипофиза 78 4,1 мг (норма 703,2 мг). На исследованных препаратах после экспериментального гипопитуитаризма в различных отделах аденогипофиза отмечается увеличение размеров капиллярного русла (таблица 1). Таблица 1 Морфометрические показатели капиллярного русло гипофиза после экспериментального гипопитуитаризма Сроки наблюдения Контроль 15 сутки 20 сутки 30 сутки Средние размеры капилляров аденогипофиза (мкм) 8,01,0 14,0 2,0 16,02,1 19,03,3 Средние размеры капилляров в ножке гипофиза (мкм) 14,01,5 18,01,4 19,01,5 18,01,4 Таким образом динамика морфологических изменений в аденогипофизе на 20-30 сутки после начала эксперимента характеризовались резко выраженными изменениями в тканевой структуре гипофиза, выражающиеся в отеке не только капсулы гипофиза, но и его паренхимы. Железистые клетки расположены беспорядочно в строме гипофиза. Границы клеток нечеткие, окраска их красителями бледнее по сравнению с контролем. Основную массу составляют хромофобные клетки. Происходит снижение количества базофильных и ацидофильных клеток. Наблюдается резкое полнокровие аденогипофиза с геморрагической инфильтрацией капсулы и кровоизлиянием в ткань передней доли гипофиза,т.е. развивается полная картина расстройства кровообращения в гипофиз. Моделирование гипопитуитаризма проведено на 30 собаках. Средние размеры синусоидов аденогипофиза (мкм) 22,02,7 42,04,5 43,04,6 29,03,2 Объем капилярного русла (мм 3) 0,27 0,36 0,37 0,31 Способ позволяет снизить травматичность,сохранить воронку гипофиза, капсулу гипофиза, доли гипофиза и пещеристые синусы. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ моделирования экспериментального гипопитуитаризма у собак, включающий вскрытие черепной коробки и твердой мозговой оболочки на уровне пересечения лобной, теменной и височной кости с ориентиром на зрительные нервы,определение расположения гипофиза,отличающийся тем, что после вскрытия полости черепа и твердой мозговой оболочки, последнюю отслаивают от костей черепа, приподнимают височную долю мозга и зрительные нервы, находят задний край хиазмы и серый бугор, подводят лигатуру к воронке гипофиза, затем лигатуру прижимают так, чтобы выключать портальные вены гипофиза.