Способ получения метроцитоглобулина для лечения и превентизации от аутоиммунного эндометрита у животных

(51) 61 39/00 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ для лечения и превентизации от аутоиммунных эндометритов. Техническим результатом является получение эффективного препарата для лечения и превентизации от аутоиммунизации при эндометритах. Способ получения метроцитоглобулина включает в себя следующие технические операции получение взвеси ткани из слизистой оболочки матки,иммунизация животных /собак, овец, ослов, кроликов/,получение гипериммунной сыворотки, выделение из полученной сыворотки гамма - глобулинов,растворение гамма-глобулинов в 0,9 растворе хлорида натрия, содержащего 1,8 гипосульфита натрия с лиофильным высушиванием.(72) Муралинов Каримхан КаирхановичНуркенов Жомарт Жумагалиевич Муралинова Жулдыз Каримхановна Амиргалиева Светлана Садуахасовна(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МЕТРОЦИТОГЛОБУЛИНА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРЕВЕНТИЗАЦИИ ОТ АУТОИММУННОГО ЭНДОМЕТРИТА У ЖИВОТНЫХ Изобретение относится к иммунологии, в частности к аутоиммунной патологии, к способу получения метроцитоглобулина для лечения и превентизации от аутоиммунного эндометрита Известен способ получения гамма-глобулинов из нормальной сыворотки крови с помощью фракционирования сывороточных белков этанолом(Хохлачв Н.В. и др. Препараты из крови человека. Гамма-глобулин. //Руководство по вакцинному и сывороточному делу. М., 1979, с. 322-328). Однако, полученные из нормальной сыворотки иммуноглобулины не обладают специфическими свойствами и поэтому не могут применяться для лечения и профилактики от аутоиммунизации при эндометиритах. В настоящее время специфических препаратов для лечения аутоиммунизации не существует. Применяемые методы лечения связанные с ингибированием синтеза аутоантител,цитостатическими препаратами и гормонами являются паллиативными и оказывают временное воздействие. Известен способ получения миоцитоглобулина для лечения и профилактики аутоиммунных болезней мышц. Предварительный патент 7052 от 15.02.99 г. (кл 61 39/00, 01 33/53),включающий иммунизацию животных -продуцентов взвесью мышечной ткани в адъюванте Фрейнда с получением гамма-глобулинов крови для лечения и превентизации аутоиммунных болезней мышц животных Недостатком данного способа является использование миоцитоглобулина,который предназначен только для лечения и профилактики аутоиммунных болезней мышц животных Наиболее близким техническим решением является способ получения пневмоцитоглобулина(Муралинов К.К., Сайдулдин Т.С. Способ получения гамма- глобулина для лечения и профилактики аутоиммунных болезней органов дыхания Предварительный патент 7053 от 15.02.99 г. кл. 61 35/42), включающий иммунизацию животных - продуцентов взвесью легочной ткани в адъюванте Фрейнда с получением сыворотки крови с последующим выделением из не гамма- глобулинов, путем фракционирования этанолом и стабилизацией хлоридом натрия и гипосульфитом натрия для лечения и превентизации аутоиммунных болезней органов дыхания животных. Недостатком данного способа является использование пневмоцитоглобулина, который предназначен только для лечения и профилактики аутоиммунных болезней органов дыхания животных. Задачей изобретения является получение метроцитоглобулина для лечения и профилактики аутоиммунном эндометрите,путем фракционирования этанолом и стабилизированием хлоридом натрия и гипосульфитом натрия. Технический результат достигается следующим методом животных доноров (ослов, овец кроликов) иммунизируют трижды взвесью ткани из слизистой 2 оболочки матки крупного рогатого скота в адъюванте Фрейнда подкожно из расчета 0,25 мл/кг живой массы, интервалом 7 дней. Сущностью изобретения является то, что при повреждениях тканей слизистой оболочки матки,связанных с их альтерацией и деструкцией, в организме происходят процессы аутоиммунизации,выражающееся появлением аутоантител против них. Метроцитоглобулин обладает направленным цитопатическим свойством, действуя избирательно и специфический, ингибирует синтез аутоантител блокируя идиопатические цепи иммунной системы. Взятие крови проводят на 21 день после последней иммунизации,полученную гипериммунную сыворотку - идиотип против ткани слизистой оболочки матки, проверяют на активность, которая должна быть в пределах от 15120 до 110240. Из полученного идиотипа против ткани матки выделяют иммуноглобулины методом фракционирования этанолом Осажденный иммуноглобулин растворяют в изотоническом растворе хлорида натрия содержащего 1,8 гипосульфита натрия(стабилизатор и сорбент). Препарат разливают в ампулы по 2 или 5 мл и подвергают лиофильной сушке. Перед употреблением содержимое ампулы растворяют в 2 мл дистиллированной воды. При хранении препарата в температурном режиме 4 С в течение 2-х лет препарат сохраняет первоначальную активность. Препарат вводится подкожно двукратно или трехкратно с интервалом 5-7 дней. При показаниях повторное применение по этой же схеме спустя 3-4 недели. Применение препарата полученного данным способом обуславливает лечебный эффект при аутоиммунных эндометритах у животных. Применение с профилактической целью показало его хорошее превентивное действие, на месте инъекции возможно возникновение небольшого покраснения с незначительным отеком, которое проходит в течение 2-3-х дней без последствия. Пример В качестве антигена использовали ткань из слизистой оболочки матки крупного рогатого скота,которую измельчают ножницами, затем тщательно отмывают сначала дистиллированной водой, затем физиологическим раствором до полного исчезновения видимых примесей крови,гомогенизируют с прибавлением физиологического раствора из расчета 9 мг на 1 г ткани. Полученную суспензию используют в качестве антигена. Антиген подвергают обработке антибиотиками (по 10 тыс. ЕД пенициллина и 0,01 г. стрептомицина на 1 мл материала), выдерживают 2 часа в термостате при температуре 37 С. Соотношение антигена и адъюванта берут 12. Антиген вводят подкожно, из расчта 0,25 мл/кг живой массы с интервалом 7 дней, трхкратно. В качестве животных-доноров используют ослов. Взятие крови проводят на 21 день после последней иммунизации в объме 2-3 литров. Полученную сыворотку консервируют 0,5 раствором фенола и проверяют на активность, стерильность и токсичность. На бактериальную стерильность сыворотку проверяют посевом на МПБ и питательный агар. Токсичность полученных препаратов проверяют путм подкожного введения кроликам в объме по 0,5 мл, с использованием по 3 кролика на каждую серию, а также шести белых мышей, которым вводят внутрибрюшинно по 0,3 мл, с последующим наблюдением за всеми животными в течение 10 дней. Из полученной гипериммунной сыворотки выделяли методом фракционирования этанолом иммуноглобулины, растворяли их в изотоническом растворе хлорида натрия, содержащим 1,8 гипосульфита натрия. Препарат разливали в ампулы по 2 или 5 мл и подвергали лиофильной сушке. Перед употреблением содержимое ампулы растворяли в 2 мл дистиллированной воды. Лечебный и превентивный эффект метроцитоглобулина обусловлен тем, что он обладает иммуносупрессивной активностью,которая выражается в подавлении продукции аутоантител соответствующей специфичности,несущих антигенные детерминанты, против которых направлены эти аутоантитела. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения метроцитоглобулина для лечения и превентизации от аутоиммунного эндометрита у животных, включающий подкожную гипериммунизацию животных-продуцентов взвесью ткани в адъюванте Фрейнда, с последующим получением сыворотки крови и выделением из нее гамма-глобулинов,путем фракционирования этанолом и стабилизацией хлоридом натрия и гипосульфитом натрия, отличающийся тем, что в качестве взвеси используют ткань слизистой оболочки матки.