Способ определения стафилококкового бактерионосительства

(51) 61 39/116 (2010.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ использовано при диагностике стафилококкового бактрионосительства. Способ определения стафилококкового бактерионосительства, включает взятие мазка слизистой оболочки переднего отдела носа стерильным тампоном, при этом используют тампон, смоченный стерильным физиологическим раствором, после чего тампон отмывают в 1 мл стерильного физиологического раствора, жидкость центрифугируют 10 мин при 2000 об/мин, из осадка делают мазок на стекло, фиксируют метанолом и окрашивают по Граму с последующим проведением микроскопии эпителиальных клеток, и если обнаруживают 15 и более клеток, содержащих микроколонии стафилококков, то определяют стафилококковое бактерионосительство. Способ позволяет упростить и ускорить исследование, повысить точность определения.(72) Каламкарова Люция Исхаковна Куандыкова Айнаш Кенесбаевна(56) Исследование отделяемого верхних дыхательных путей// Инструкции по бактериологическому контролю качества проведения противоэпидемических мероприятий в акушерских стационарах,в отделениях хирургического профиля, в палатах и отделениях реанимации, - МЗ РК 420, 1999, пункт 9(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТАФИЛОКОККОВОГО БАКТЕРИОНОСИТЕЛЬСТВА Изобретение относится к области медицины, в частности к гигиене и санитарии, и может быть использовано при диагностике стафилококкового бактрионосительства. Известен способ определения стафилококкового бактерионосительства, включающий взятие мазка слизистой оболочки переднего отдела носа сухим стерильным тампоном, проведение прямого посева тампоном на питательную среду с последующим определением степени обсемененности поверхности питательной среды в крестах. Массивность обсеменения верхних дыхательных путей стафилококками при прямом посеве материала тампоном оценивается в крестахсливной рост колоний на чашкахсплошной рост изолированных колонийзначительный рост (до 100 колоний)единичные колонии (до 10-25). Обсемененность, выражающаяся показателем 1000 и более колониеобразующих единиц (КОЕ),взятых на тампон, является показателем высокой обсемененности возбудителем, при которой легко происходит его выделение во внешнюю среду даже при спокойном дыхании(Исследование отделяемого верхних дыхательных путей Инструкции по бактериологическому контролю качества проведения противоэпидемических мероприятий в акушерских стационарах, в отделениях хирургического профиля, в палатах и отделениях реанимации и интенсивной терапии,приказ МЗ РК 420, 1999 г, 9 пункт). Известный способ недостаточно точен, т.к. допускаются субъективные ошибки. К тому же,сливной рост может дать и сопутствующая микрофлора. При сливном росте практически невозможно идентифицировать признаки колоний. Поэтому, результат является неточным. Известен способ определения стафилококкового бактерионосительства, включающий взятие мазка слизистой оболочки переднего отдела носа сухим стерильным тампоном с последующим количественным учетом стафилококкового бактерионосительства. При этом проводят посев 0,1 мл смывной жидкости тампона на питательную среду с последующим определением степени обсемененности поверхности питательной среды путем подсчета числа выросших на чашке однородных колоний, идентичных по морфологии и пигментации с последующим определением КОЕ,снятых на тампон. Пример расчета на чашке выросло 15 колоний,значит, в 0,1 мл содержалось 15 КОЕ, во всем объеме смыва будет 15105. Итого - 750 КОЕ(Исследование отделяемого верхних дыхательных путей Инструкции по бактериологическому контролю качества проведения противоэпидемических мероприятий в акушерских стационарах, в отделениях хирургического профиля,в палатах и отделениях реанимации и интенсивной терапии, приказ МЗ РК 420, 1999 г, 9 пункт). Известный способ имеет существенные недостатки. При посеве 0,1 смывной жидкости количественный учет микроорганизмов должен 2 быть достаточно точным. При смачивании тампона объем смывной жидкости в пробирке уменьшается. Количество впитываемой тампоном жидкости зависит от объема ваты. К сожалению, из-за недостаточности современных оборудований, во многих лабораториях тампоны готовятся вручную. Поэтому, при перерасчете выросших КОЕ получается неточный результат. Еще одним из главных недостатков способа является то, что результат выдается только через 48 часов, если отрицательный. Если положительный, то сроки проведения исследования могут быть продлены до 72 часов. Задачей изобретения является разработка способа определения стафилококкового бактерионосительства,который упрощает проведение диагностики и повышает ее точность. Способ определения стафилококкового бактерионосительства, включает взятие мазка слизистой оболочки переднего отдела носа стерильным тампоном, при этом используют тампон, смоченный стерильным физиологическим раствором, после чего тампон отмывают в 1 мл стерильного физиологического раствора, жидкость центрифугируют 10 мин при 2000 об/мин, из осадка делают мазок на стекло, фиксируют метанолом и окрашивают по Граму с последующим проведением микроскопии эпителиальных клеток, и если обнаруживают 1 5 и более клеток, содержащих микроколонии стафилококков, то определяют стафилококковое бактерионосительство. Способ осуществляют следующим образом. Способ диагностики стафилококкового бактерионосительства включает в себя 1. Исследуемый материал (клетки эпителия слизистой оболочки переднего отдела носа) забирают с помощью стерильных ватных тампонов,смоченных в физиологическом растворе. 2. Тампон погружают в стерильную пробирку с 1,0 мл стерильного физраствора, встряхивают в течение 5 минут, тампон отжимают о стенки пробирки и удаляют. 3. Центрифугируют в течение 10 минут при 2000 об/мин. 4. Верхний слой жидкости удаляют при помощи пастеровской пипетки, из осадка делают мазок на чистое, хорошо обезжиренное стекло (стекла обезжиривают при помощи смеси Никифорова). 5. После подсыхания мазок фиксируют метанолом в течение 5 минут и окрашивают по Граму. 6. При микроскопии мазков просматривают не менее 50 эпителиальных клеток (учитывают клетки с хорошо видимым ядром). В том случае, если обнаруживают 15 и более клеток, содержащих микроколонии стафилококков, то определяют стафилококковое бактерионосительство. 7. Для уточнения видовой характеристики стафилококков проводят бактериологическое исследование. Пример выполнения способа. Медицинский работник хирургического стационар П., возраст 32 г., был обследован на стафилококковое бактерионосительство. Было выполнено взятие мазка слизистой оболочки переднего отдела носа стерильным тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором, затем тампон отмыли в 1 мл стерильного физиологического раствора,жидкость центрифугировали 10 мин при 2000 об/мин. Из осадка сделали мазок на обезжиренное стекло, мазок фиксировали метанолом и произвели окрашивание по Граму. Затем провели микроскопию мазка для выявления эпителиальных клеток, содержащих микроколонии стафилококков. Просмотрено 50 клеток, в 20 были обнаружены микроколонии стафилококков. У сотрудника определено стафилококковое бактерионосительство. Назначено соответствующие лечение. Разработанным способом было обследовано 400 человек, применение способа позволило в короткие сроки ( в течение 25-30 минут) сделать заключение о степени обсемененности слизистой оболочки верхних дыхательных путей стафилококком. Выявлено носителей - 85. Это позволили своевременно выявить носителей стафилококковой инфекции и принять меры по предупреждению распространения внутрибольничной инфекции стафилококковой этиологии. По способу прототипа исследовано 56 человек, и эти же лица были обследованы предлагаемым способом. Известным способом выявлено 1 1 носителей стафилококковой инфекции,использование разработанного способа из 56 выявило 19 носителей стафилококковой инфекции. Способ позволяет упростить и ускорить исследование, повысить точность определения. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ определения стафилококкового бактерионосительства, включающий взятие мазка слизистой оболочки переднего отдела носа стерильным тампоном с последующим количественным учетом стафилококкового бактерионосительства, отличающийся тем, что при этом используют тампон, смоченный стерильным физиологическим раствором, после чего тампон отмывают в 1 мл стерильного физиологического раствора, жидкость центрифугируют 10 мин при 2000 об/мин, из осадка делают мазок на стекло,фиксируют метанолом и окрашивают по Граму с последующим проведением микроскопии эпителиальных клеток, и если обнаруживают 15 и более клеток,содержащих микроколонии стафилококков, то определяют стафилококковое бактерионосительство.