Способ подсчета обсемененности микроорганизмами слизистой оболочки полости рта

(51) 12 1/02 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ Способ подсчета обсемененности микроорганизмами слизистой оболочки полости рта включает взятие мазка с участка слизистой полости рта длиной 1 см, которое осуществляют стандартным стерильным тампоном с диаметром концевой части 0,5 см, затем тампон погружают в 1 мл физиологического раствора, взбалтывают в течение 10 минут, готовят десятикратные разведения полученного биологического субстрата и высевают по 0,1 мл на среды выделения,подсчитывают выросшие изолированные колонии,после чего осуществляют подсчет обсемененности 1 см 2 по формуле Х обсемененность а - количество изолированных колоний на среде культивирования, выраженное в КОЕ, 2 - коэффициент пересчета на 1 см 2,степень разведения, из которого осуществлен высев. Предлагаемый способ является простым,удобным и позволяет определить количество вегетирующих микробных клеток аутофлоры,указывающих на их этиологическую причастность к воспалительным заболеваниям слизистой оболочки полости рта, что может служить основой для объективной оценки результатов лечения и прогноза дальнейшего течения заболевания.(72) Баймуратова Майраш Аушатовна Воронина Валерия Эммануиловна Есиркепов Асилбек Абдрасилович Крылова Александра Ивановна Шаяхметова Жанаткуль Саттаровна(73) Республиканское государственное казенное предприятие Алматинский государственный институт усовершенствования врачей Министерства здравоохранения Республики Казахстан(56) Лукиных Л.М., Зеленова Е.Г., Присада Т.В. Диагностическая ценность показателя естественной колонизации буккального эпителия при стоматологических заболеваниях // Клиническая лабораторная диагностика, 1999,11, с. 37(54) СПОСОБ ПОДСЧЕТА ОБСЕМЕНЕННОСТИ МИКРООРГАНИЗМАМИ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ПОЛОСТИ РТА(57) Изобретение относится к медицине, а именно к бактериологии и стоматологии, и может быть использовано для количественного подсчета микробных клеток на слизистой оболочке различных участков полости рта. 22512 Изобретение относится к медицине, а именно к бактериологии и стоматологии, и может быть использовано для количественного подсчета микробных клеток на слизистой оболочке различных участков полости рта. Известен способ подсчета обсемененности микроорганизмами слизистой оболочки полости рта,включающий взятие мазка со слизистой полости рта с последующим микроскопическим исследованием мазка. Определение естественной колонизации осуществляют по числу адгезированных бактериальных клеток,подсчитанных при микроскопии с пересчетом на один эпителиоцит.(Лукиных Л.М., Зеленова Е.Г., Присада Т.В. и др. Диагностическая ценность показателя естественной колонизации буккального эпителия при стоматологических заболеваниях// Клиническая лабораторная диагностика. - 1999.11. - с.37.) Недостатком данного способа является его невысокая точность,поскольку невозможно осуществить количественную оценку обсемененности единицы измерения площади слизистой ротовой полости. Задачей изобретения является разработка достоверного способа подсчета обсемененности микроорганизмами слизистой оболочки полости рта. Технический результат применение предлагаемого способа позволит не только качественно, но и количественно оценить обсемененность слизистой оболочки любого участка ротовой полости путем объективного подсчета количества бактерий,дает возможность использовать результаты данного исследования для усовершенствования диагностики,коррекции лечения и прогноза развития осложнений при стоматологических заболеваниях. Указанный технический результат достигается тем, что в способе подсчета обсемененности микроорганизмами слизистой оболочки полости рта,включающем взятие мазка со слизистой полости рта,отличительной особенностью,согласно изобретению, является то, что взятие мазка с участка слизистой полости рта длиной 1 см осуществляют стандартным стерильным тампоном с диаметром концевой части 0,5 см, затем тампон погружают в 1 мл физиологического раствора,взбалтывают в течение 10 минут, готовят десятикратные разведения полученного биологического субстрата и высевают по 0,1 мл на среды выделения,подсчитывают выросшие изолированные колонии, после чего осуществляют подсчет обсемененности 1 см 2 по формуле количество изолированных колоний на среде культивирования, выраженное в КОЕ, 2 коэффициент пересчета на 1 см 2,- степень разведения, из которого осуществлен высев. Способ осуществляется следующим образом. Стоматолог движением стандартного стерильного тампона из стороны в сторону 2 концевой частью протирает участок слизистой оболочки полости рта длиной 1 см, либо по прямой,например, при взятии мазка со слизистой щек или неба, либо по дуге пришеечной части зуба, длина которой приравнивается к средней ширине зуба 1 см, поскольку по теории пределов известно, что длина дуги равна стягивающей е хорде для малых углов. После чего тампон погружают в 1 мл физиологического раствора и доставляют в бактериологическую лабораторию в течение 1 часа. Тампон взбалтывают в физиологическом растворе в течение 10 минут, затем осуществляют ряд десятикратных разведений полученного биологического субстрата. Затем по 0,1 мл субстрата из каждого разведения высевают на среды выделения и растирают шпателем. Среды помещают в термостат для культивирования аэробов и факультативных анаэробов и в анаэростат для культивирования анаэробов, при температуре 37 С на срок инкубации, соответствующий требованиям ожидаемых видов микроорганизмов. После чего осуществляют подсчет колоний (а) из разведения,где выросли изолированные колонии. Полученные результаты вносят в разработанную нами формулу количество изолированных колоний на средах культивирования, выраженное в КОЕ, 2 коэффициент пересчета на 1 см 2,- степень разведения, из которого осуществлен высев,позволяющую достоверно подсчитать обсемененность слизистой оболочки ротовой полости,выраженную в количестве колониеобразующих единиц на 1 см 2 (КОЕ/ см 2). Пример. Доставленный на бактериологическое исследование стандартный тампон с материалом,забранным стоматологом движением тампона из стороны в сторону концевой частью по участку слизистой длиной 1 см, в частности, по дуге пришеечной части 5-го нижнего левого зуба,погруженный в 1 мл физиологического раствора,предварительно взбалтывали в течение 10-15 минут,после чего осуществляли ряд последовательных десятикратных разведений до 10-4. После этого из каждого разведения дозировано вносили по 0,1 мл полученного биологического субстрата на оптимальные элективные среды выделения. По завершении первого этапа искусственного культивирования получили 8 изолятов (КОЕ) из разведения 10-4. Эти результаты внесли в разработанную формулу для осуществления расчета обсемененности. Таким образом, предлагаемый способ подсчета обсемененности слизистой оболочки ротовой полости является простым, удобным и позволяет определить количество вегетирующих микробных клеток аутофлоры,указывающих на их этиологическую причастность к воспалительным заболеваниям слизистой оболочки полости рта, что 22512 может служить основой для объективной оценки результатов лечения и прогноза дальнейшего течения заболевания. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ подсчета обсемененности микроорганизмами слизистой оболочки полости рта,включающий взятие мазка со слизистой полости рта, отличающийся тем, что взятие мазка с участка слизистой полости рта длиной 1 см осуществляют стандартным стерильным тампоном с диаметром концевой части 0,5 см, затем тампон погружают в 1 мл физиологического раствора, взбалтывают в течение 10 минут, готовят десятикратные разведения полученного биологического субстрата и высевают по 0,1 мл на среды выделения,подсчитывают выросшие изолированные колонии,после чего осуществляют подсчет обсемененности 1 см 2 по формуле где- искомая обсемененность а - количество изолированных колоний на среде культивирования,выраженное в КОЕ, 2 - коэффициент пересчета на 1 см 2,- степень разведения, из которого осуществлен высев.