Способ получения иммуностимулятора

(51) 61 35/56 (2010.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ Технический результат достигается созданием способа получения иммуностимулятора,включающего гомогенизацию тимуса животных,термическую обработку для разрушения, удаления термолабильных веществ,очистку целевого продукта, при этом отличительной особенностью является то, что в качестве исходного сырья используют тимус и селезенку бычков в соотношении 14, удаляют жировой слой,промывают 0,3 формалинизированным раствором,обсушивают, выдерживают 5-7 суток при 4 С и гомогенизируют. Из гомогената готовят 5 взвесь на стерильном физиологическом растворе рН 6,0,которую подвергают термическому воздействию путем автоклавирования при 1 атм. в течение 30-45 мин и фильтруют.(72) Тен Виктор Борисович Мустафин Батыржан Муафикович(57) Изобретение относится к ветеринарной иммунологии и касается способов получения биологических активных препаратов из животного сырья, в частности препаратов, обладающих иммуностимулирующим действием, получаемых из тимуса и селезенки животных. Технический результат - упрощение технологии получения целевого продукта с достаточно высокой иммуностимулирующей активностью. 23836 Изобретение относится к ветеринарной иммунологии и касается способов получения биологических активных препаратов из животного сырья, в частности препаратов, обладающих иммуностимулирующим действием, получаемых из тимуса и селезенки животных. Известен способ получения иммуностимулятора,включающий гомогенизацию тимусов млекопитающих, экстракцию раствором хлористого натрия,осаждение твердых частиц ткани центрифугированием, удаление из супернатанта термолабильных белков при нагревании,освобождение от пигментных и пирогенных веществ,осаждение целевого продукта с последующей очисткой путем солевого фракционирования,гель-хроматографии. А.с. СССР 1255136, МКИ А 61 35/55. - 1986. Недостатком способа является сложность и трудоемкость технологического процесса центрифугирование,фракционирование,гельхроматография. Кроме того, известный способ не обеспечивает получение препарата с достаточно высокой иммуностимулирующей активностью. Задача изобретения - создание способа получения иммуностимулятора. Технический результат - упрощение технологии получения целевого продукта с достаточно высокой иммуностимулирующей активностью. Технический результат достигается созданием способа получения иммуностимулятора,включающего гомогенизацию тимуса животных,термическую обработку для разрушения, удаления термолабильных веществ,очистку целевого продукта, при этом отличительной особенностью является то, что в качестве исходного сырья используют тимус и селезенку бычков в соотношении 14, удаляют жировой слой,промывают 0,3 формалинизированным раствором,обсушивают, выдерживают 5-7 суток при 4 С и гомогенизируют. Из гомогената готовят 5 взвесь на стерильном физиологическом растворе рН 6,0,которую подвергают термическому воздействию путем автоклавирования при 1 атм. в течение 30-45 мин и фильтруют. Анализ научной и патентной литературы аналогичных способов не выявил. Способ осуществляется следующим образом. Берут тимус и селезенку бычков 18-20 мес,находившихся в специальных условиях, в соотношении 14, удаляют жировой слой,промывают 0,3 формалинизированным раствором и обсушивают. Обработанные таким образом органы выдерживают 5-7 суток при 4 С для выработки биогенных стимуляторов и максимального выхода биологически активных веществ, в стерильных условиях измельчают в ступке или в гомогенизаторе. Из гомогената готовят целевой продукт - 5 взвесь тимуса и селезенки в соотношении 14 на стерильном физиологическом растворе рН 6,0. Затем взвесь подвергают термическому воздействию путем автоклавирования при 1 атм. в течение 30-45 мин., фильтруют с применением вакуумного насоса. Автоклавирование в течение 30-45 мин является оптимальным, обеспечивает максимум иммуностимулирующей активности вещества. Дальнейшее увеличение или уменьшение времени автоклавирования ведет к снижению активности получаемого вещества. Супернатант консервируют нейтральным 40 формалином из расчета 0,3 см 3 на 100,0 см 3 препарата и разливают во флаконы в стерильных условиях. Препарат проверяют на стерильность,безвредность и активность. Пример 1. Проводят посев препарата на питательные среды МПА, МПБ, ПГГА, ПГГБ,выдерживают в термостате в течение 10 суток при 37- 38 С. Посевы оставались стерильными в течение срока наблюдения. Пример 2. Для проверки на безвредность препарат вводят 5 белым мышам, массой 20 г по 0,5 см 3 подкожно в область брюшка, для наблюдения за местом введения и физиологическим состоянием животных. Наблюдение проводят в течение 10 дней. Установлено, что на месте введения препарата видимых изменений нет, состояние животных в пределах нормы. Пример. 3. Для проверки активности препарата берут 3 группы морских свинок, по 10 голов в каждой,инфицированных высокопатогенным штаммом . -1 в дозе 500 тыс. м.к. на животное. Первая группа животных - контрольная,препарат не вводится. Второй группе животных вводят 5 взвесь тимуса и селезенки в соотношении 1 4 по 1 см 3,подкожно, в область брюшка, 4-кратно с 7-дневным интервалом. Третьей группе животных вводят Т-активин согласно наставлениям по его применению. На 30 день животных убивают для бактериологического исследования органов. Установлено, что 60 животных 2 группы не подверглись заражению, в то время как животные,которым ввели Т-активин противостояли заражению в 40 случаев, при 100 заражении контрольных(табл. 1 ) . Пример 4. Для проверки эффективности препарата, приготовленного из тимуса и селезенки в соотношении 14 берут 3 группы животных (овцы),которым ввели 20 млн. м.к. высокопатогенного штамма .-1 в 1 см 3 подкожно, в безшерстную область за локтевым суставом. Одновременно вводят препараты. Первой группе животных вводят препарат коммерческий (Т-активин) 1 см 3 подкожно, 4-кратно с 7-дневным интервалом. Второй группе - вводят 5 взвесь тимуса и селезенки в соотношении 14 . Препарат вводят так же как и животным первой группы. Третья группа - контрольная, препарат не вводят. На 30 день после введения препаратов животных убивают. Результаты проверки эффективности препаратов представлены в табл. 2. 2 23836 Как видно из данных,препараты приготовленные из тимуса и селезенки с 5 содержанием активного начала и препарат коммерческий предохраняют животных в 40 случаев, но выделено культур у животных которым ввели испытуемый препарат в 2 раза меньше чем после введения коммерческого. Полученные результаты дают основание считать,что использование предлагаемого иммуностимулятора как самостоятельно, так и в композиции с антибактериальными,профилактическими и противопаразитарными средствами,позволит получить высокий терапевтический и профилактический эффект,стимулируя иммуногенез у животных при иммунодефицитных состояниях,повысит эффективность оздоровительных мероприятий. Предлагаемый способ отличается от разработанных простотой изготовления, высокой активностью, исключением реактивов (уксусной кислоты, хлористого цинка), сложных методов очистки путем солевого фракционирования, гельхроматографии. Экономическая эффективность изобретения заключается в уменьшении инфицирования внешней среды патогенными возбудителями, в снижении угрозы заболевания человека и животных, в устранении заноса инфекции в благополучные хозяйства и уменьшении затрат на проведение дополнительных мероприятий. Таблица 1 Результаты проверки эффективности препаратов на морских свинках Результаты проверки эффективности препаратов на овцах ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения иммуностимулятора,включающий гомогенизацию тимуса животных,термическую обработку для разрушения, удаления термолабильных веществ,очистку целевого продукта отличающийся тем, что в качестве исходного сырья используют тимус и селезенку 4 40 4 40,0 бычков в соотношении 14, удаляют жировой слой,промывают 0,3 формалинизированным раствором,обсушивают, выдерживают 5-7 суток при 4 С и гомогенизируют, готовят 5 взвесь на стерильном физиологическом растворе рН 6,0, которую подвергают термическому воздействию путем автоклавирования при 1 атм. в течение 30-45 мин и фильтруют.