Штамм гриба Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin BCu 2-06 для получения биопрепарата против прямокрылых насекомых сельскохозяйственных культур

(51) 12 1/20 (2010.01) 01 63/00 (2010.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ ПОЛУЧЕНИЯ БИОПРЕПАРАТА ПРОТИВ ПРЯМОКРЫЛЫХ НАСЕКОМЫХ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ КУЛЬТУР(57) Предложенный штамм выделен из жука долгоносика, найденного в предгорьях Заилийского Алатау летом 2006 г. Обладает высокой биологической активностью в отношении личинок пустынного пруса. Смертность личинок пруса в вариантах с прототипом (штамм гриба В-21) составила на первые сутки - 10, на третьи - 20, на пятые - 45 и на седьмые - 55. При испытании предлагаемого штамма ВС 2-06 эти показатели были 15, 20, 85 и 100 соответственно. Гибель пруса в контроле (обработка водой) на 1-7 сутки была 2,5. Штамм ВС 2-06 проявил также более высокую скорость роста на среде Чапека по сравнению с прототипом.(72) Сагитов Абай ОразулыЛеднев Георгий Рэмович ( Дуйсембеков Бахытжан Алишерович Лукина Анастасия ВикторовнаСлямова Назира ДусупкановнаСмагулова Шолпан БерекболовнаУспанов Алибек Маратович(73) Товарищество с ограниченной ответственностью Казахский научноисследовательский институт защиты и карантина растений 23762 Объект, из которого выделен штамм - Выделен из трупа долгоносиков . Где собран предгорья Заилийского Алатау,ущелье реки Чапай. Когда собран июль 2006. Кем собран Леднев Г.Р., ВИЗР Кем выделен Лукина А.В., Смагулова Ш.Б.,Леднев Г.Р. На какую среду выделен агаризованная среда Чапека следующего состава (г/л) 3 - 2,0 КН 2 Р 04- 1 , 0 КС 1 - 0 , 5472 - 0 , 5472- 0,01 сахароза - 30 г 18 г агар-агара,дистиллированная вода -1000 мл. Для устранения развития посторонней грибной и бактериальной микрофлоры в данную среду дополнительно вносилось 0,04 г молочной кислоты, которая снижала рН до 5,5-6. Микроморфология Штамм ВСи 2-06 относится к виду. Гифы септированные,бесцветные. Конидиеносцы расположены вдоль гиф единолично или парами друг против друга, собраны рыхлые мутовки. Конидии шаровидные 2,1-2,81,9-2,6 мкм. На вершине бутылевидного конидиеносца расположен характерный зигзагообразный вырост. Фиалиды прямые, короткие. Макроморфология на плотных питательных средах Колонии на агаризованной среде Чапека округлые, ватообразные, слегка приподнятые,белого цвета, толщиной 1,5-6 мкм, диаметром 23-25 мм на 10-е сутки культивирования. Агар не окрашивают Фиг. 1). На рыбном агаре (состав, (г/л) рыбный экстракт- 3, пептон - 5, вода водопроводная - 1000 мл, агарагар - 15) Округлые колонии светло-бежевого цвета,мучнистые. Рельеф-слабовыпуклый. Пигментация питательной среды - светлокоричневого цвета, выражена сильнее к центру колонии. Колонии на среде Сабуро белого цвета, позднее слегка желтеют, агар не окрашивают, пушистые,синнем не образуют. Состав среды Сабуро (г/л) глюкоза - 40, пептон - 10, агар-агар - 18, вода водопроводная - 1000 мл. Биологическая активность на тест-объектах Оценивалась на личинках пустынного пруса 1-2 возрастов, активность высокая (табл. 1) Биологические свойства на лабораторных животных (патогенность) Принадлежит к 3-му классу опасности для теплокровных животных. Рекомендации по поддержанию роста и хранению культуры Хранение на скошенной агаризованной среде,при температуре 4 С. Пересев два раза в год. Используется модифицированная среда Сабуро. Таблица 1 Динамика гибели пустынного пруса при перкутанном заражении штаммами гриба В. , титр спор 1107 Штамм Смертность , сутки Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии, в частности, к получению средств защиты от прямокрылых и представляет собой штамм гриба для получения вышеуказанного средства. Экспериментальные препаративные формы препарата В.производятся в США (под названием биотрол), во Франции (колеопе), в Чехии(боверол, боверосил) и в бывшем СССР (боверин зерновой). Среди коммерческих микоинсектицидных препаратов следует упомянуть, ,-, ,-, -2561,-201,-1200(///.). Недостатком указанных препаратов в условиях Казахстана является несовпадение оптимума развития штаммов с климатическими условиями Республики. Известен штамм грибаВ-21(Гештовт Н.Ю. Энтомопатогенные грибы. Биотехнологические аспекты. - Алматы, 2002, с. 123-124). Основным недостатком указанного штамма является проявление им активности при умеренных температурах (20-25) и высокой влажности (более 80), что существенно снижает эффективность использования препарата в условиях континентального Казахстана. Задачей изобретения является получение нового штамма, обладающего более высокой активностью в условиях Казахстана в отношении насекомыхлистоедов, в частности, пустынного пруса. Прус пустынный обитает в пустынных ландшафтах, предгорьях, на пустырях, межах, по берегам оросительных каналов,обочинам дорог, по окраинам сельскохозяйственных посевов. Иногда вредит бахчам, огородам, чайным и тунговым плантациям в Закавказье посевам богарной пшеницы,хлопчатника,люцерны,огородным и бахчевым культурам, эфироносам,выгонам, пастбищам в Средней Азии. В Казахстане повреждает посевы мягкой пшеницы и люцерны, а также пустынные пастбища. Задние голени сверху оранжевые или оранжевокрасные. Внутренняя сторона задних бедер с почти полными черными поперечными перевязями, или почти черная с 2 светлыми неполным перевязями или с большим черным яйцевидным пятном. Длина тела самки 13,2-24,2 самца - 19,0-40,7 мм надкрылья самки - 7,9-23,2 самца - 15,9-33,4 мм. Географическое распространение Казахстан(кроме севера) Россия Северный Кавказ, юго-запад Забайкалья Закавказье Средняя Азия юг Европы Северная Африка Западная Азия до Пакистана и Северо-Западной Индии Северо-Западный Китай Монголия. НСР 29,02 20,71 Как видно из таблицы 1, смертность личинок и на седьмые - 58. При испытании предлагаемого колорадского жука в контроле была на 1-7 сутки 10- штамма ВС 2-06 эти показатели были 15, 20, 85 и 15, по прототипу (штамм В-21) составляла на 100 соответственно. первые сутки 15, на третьи - 22, на пятые - 49 Таблица 2 Динамика прироста колоний грибана среде Чапека Диаметр колоний, мм (сутки) 2 -06 24,160,72 42,50,28 55,160,44 63,160,16 Из результатов эксперимента по динамике прирост диаметра колоний на среде Чапека по прироста колоний (таблица 2) видно, что на сравнению со стандартным. агаризованной среде Чапека предлагаемый штамм ВС 2-06 проявляет более высокую скорость роста ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ(на 24,16- 63,16), чем стандартный штамм В-21. Как видно из приведенных таблиц,Штамм грибапредлагаемый штамм гриба-06, депонированный в ДГП 2 обеспечивает 100-ную гибель пустынного пруса Республиканская коллекция микроорганизмов на седьмые сутки эксперимента против 55 в опыте НЦБ РК МОН РК под регистрационном номером с контрольным штаммом(по прототипу).0249, для получения биопрепарата против Предлагаемый штамм проявил также более быстрый прямокрылых насекомых сельскохозяйственных культур.