Способ оценки эффективности лечения латентных форм язвенного колита и болезни Крона

(51) А 61 В 10/00 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(57) Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии и может быть использовано для оценки эффективности терапии латентных форм язвенного колита и болезни Крона. Техническим результатом изобретения является повышение точности и достоверности способа. Способ оценки эффективности лечения язвенного колита включает исследование биоптата прямой кишки, при этом для оценки эффективности лечения латентных форм язвенного колита и болезни Крона в биоптате, забор которого производят на 28 день лечения, определяют содержание секреторногои при значении показателя 50 мг/л лечение оценивают как эффективное.(72) Абылайулы Жангентхан Кайбуллаева Джамиля Ахтановна(73) Республиканское государственное казенное предприятие Научно-исследовательский институт кардиологии и внутренних болезней Министерства здравоохранения Республики Казахстан(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ЛАТЕНТНЫХ ФОРМ ЯЗВЕННОГО КОЛИТА И БОЛЕЗНИ КРОНА 21522 Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии и может быть использовано для оценки эффективности терапии латентных форм язвенного колита и болезни Крона. Воспалительные заболевания кишечника(язвенный колит и болезнь Крона) - хронические рецидивирующие заболевания желудочнокишечного тракта неизвестной этиологии,характеризующиеся геморрагически-гнойным воспалением с развитием местных и системных осложнений. При язвенном колите воспаление развивается в толстой кишке, при болезни Крона патологический процесс может развиться в любом отделе ЖКТ, чаще всего поражаются толстый и тонкий кишечник. Воспалительные заболевания кишечника относятся к наиболее тяжелым заболеваниям органов пищеварения. Хроническое течение, грозные осложнения, рост заболеваемости,нередко безуспешное применение даже современных препаратов в лечении обострения заболевания, а в связи с этим высокая частота необходимости оперативного вмешательства и инвалидизация, придают проблеме ЯК не только медицинское, но и социальное значение. Гуморальное звено иммунной системы имеет большое значение в поддержании защитного барьера слизистой оболочки. В физиологических условиях ежедневно в просвет кишечника освобождается секреторныйиммуноглобулин в количестве 40 мг на 1 кг массы тела.является устойчивым к действию протеаз и обладает способностью образовывать иммунные комплексы в просвете кишечника, связывать бактериальные токсины и нейтрализовывать вирусы. Образование В-лимфоцитов, вырабатывающих , находится под контролем супрессорного цитокина -. Напряженность местного иммунного ответа при язвенном колите и болезни Крона сохраняется высокой за счет перераспределения в кишку из периферической крови и активации иммунокомпетентных клеток (Т- и В-лимфоцитов,макрофагов),что приводит к хронизации воспаления. Известен способ оценки эффективности лечения латентной формы болезни Крона илеоцекальной локализации,включающий морфометрическое исследование микроциркуляторного русла, причем в биоптате слизистой оболочки подвздошной кишки определяют количество сосудов и площадь микроциркуляторного русла,ядерноплазматическое соотношение эндотелиальных клеток микроциркуляторного русла и средний диаметр просвета сосудов. Способ позволяет, опираясь на расчет показателей ангиогенеза, оценивать эффективность терапии.(Патент РФ 2290079, кл. А 61 В 10/04, 01 33/48, опубл. 27.12.2006, Б.36). Недостатком способа является его трудоемкость,необходимость дорогостоящего оборудования а также необходимость проведения многократных срезов слизистой оболочки. 2 За прототип предлагаемого изобретения выбран способ прогнозирования эффективности терапии при неспецифическом язвенном колите, при котором из биоптата слизистой оболочки прямой кишки получают взвесь клеток, затем в реакции иммунофлуоресценции выявляют клетки,содержащие ,и , определяют процентное отношение ,и-содержащих клеток и вычисляют показатель соотношения иммуноглобулин содержащих клеток - -клетки-клетки / -клетки. При показателе 2,0 и ниже клиническое улучшение наступает через 15-20 дней,при показателе 2,4 и выше клиническое улучшение наступает при тотальном поражении толстой кишки через 40 дней и позже или консервативная терапия является неэффективной.(Патент РФ 2006033, кл. 01 33/48, опубл. 15.01.1994) Недостатком данного способа является трудоемкость подсчета и вычисления процентного соотношения клеток, а также необходимость определения трех типов иммуноглобулинсодержащих клеток. Задачей изобретения является разработка способа оценки эффективности лечения латентных форм язвенного колита и болезни Крона,позволяющего определять эффективность проводимых лечебных мероприятий. Это достигается тем, что в заявляемом способе оценки эффективности лечения латентных форм язвенного колита и болезни Крона, включающем исследование биоптата прямой кишки с определением содержания секреторного ,согласно изобретению, уровень секреторногоопределяют на 28 день лечения и при значении показателя 50 мг/л, оценивают лечение как эффективное. Способ осуществляется следующим образом. У обследуемого пациента с ранее установленным диагнозом язвенного колита или болезни Крона с локализацией в толстой кишке после стандартной подготовки кишечника к фиброколоноскопическому обследованию,во время процедуры эндоскопического осмотра производят забор материала (соскоб слизистой оболочки толстой или прямой кишки). Материал помещают в пробирку с 1,5 мл изотонического раствора 0,9 натрия хлорида. Далее методом твердофазного иммуноферментного анализа проводят определение секреторногос применением тест-систем ЗАО Вектор-Бест,(Россия) с использованием моноклональных антител, обладающих высокой специфичностью к секреторному . Метод определения основан на твердофазном иммуноферментном анализе, который проводят в две стадии. На первой стадии калибровочные пробы с известной концентрациейи исследуемые образцы инкубируют в лунках планшета с иммобилизованными моноклональными антителами к секреторному компоненту . Затем планшет отмывают. На второй стадии, связавшийся в лункахвыявляют конъюгатом моноклональных антител к -цепис пероксидазой хрена. После 21522 отмывания избытка конъюгата образовавшиеся иммунные комплексы иммобилизованные моноклональные антитела -- конъюгат определяют ферментативной реакцией пероксидазы с перекисью водорода в присутствии хромогена. Интенсивность окраски хромогена пропорциональна концентрациив анализируемом образце. Концентрациюв пробах определяют по калибровочному графику. Нормальные физиологические концентрации секреторногокишечного секрета составляют 207,592,2 мг/л. У больных язвенным колитом и болезнью Крона в период обострения уровень секреторногосоставляет 12.5 мг/л. Для оценки эффективности терапии проводят изучение уровня секреторного , позволяющего судить о количестве-продуцирующих лимфоцитов и, соответственно, степени активности воспалительного процесса в кишечнике через 28 дней (фаза формирования ремиссии). Если на 28 день лечения показатель 50 мг/л, то лечение оценивают как эффективное. Секреторныйотносится к маркерам так называемого местного иммунитета. Сборка этого секреторного иммуноглобулина происходит на базальной мембране лимфоидных и эпителиальных клеток из предшественника секреторного компонента и димера сывороточного компонента в стенках пищеварительной системы. Уменьшение количествав секрете (смыве со слизистой оболочке) позволяет оценить состояние секреторного иммунитета при патологии, а также контролировать динамику лечения. Пример 1. Больной Н., 32 лет находился на стационарном лечении с диагнозом Язвенный колит, левостороннее поражение,тяжелое течение, обострение. Определениев секрете толстой кишки проводилось по вышеописанному способу. В период обострения, содержаниесоставило 6,82 мг/л. Через 28 дней уровеньсоставил 7,01 мг/л, на основании чего можно судить о неэффективности проводимой терапии и внести необходимую коррекцию в схему лечения. Действительно, в динамике развития заболевания, несмотря на проводимую терапию адекватными дозами базисных препаратов, было отмечено рефрактерное течение,сохранение диспептического и астенического синдромов, наличие патологических примесей в кале. Пример 2. Больной Г., 48 лет лечился амбулаторно, Дз. Язвенный колит, средняя степень тяжести,проктосигмоидит. Псевополипоз кишечника. Обострение. В первый день начала терапии 7,15 мг/л. Пациент получал месалазин в дозе 3,5 г/сутки, без назначения кортикостероидов. Несмотря на наличие осложнения (псевдополипоз кишечника), через 4 недели состояние значительно улучшилось,эндоскопическая картина соответствовала фазе неполной ремиссии, а уровеньсоставил 52,3 мг/л. Таким образом, увеличение содержаниясвидетельствует об адекватности проводимой терапии и высокой лечебной эффективности. Таким образом, заявляемый способ позволяет оценить степень эффективности проводимой противовоспалительной терапии. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ оценки эффективности лечения язвенного колита, включающий исследование биоптата прямой кишки, отличающийся тем, что для оценки эффективности лечения латентных форм язвенного колита и болезни Крона в биоптате, забор которого производят на 28 день лечения,определяют содержание секреторногои при значении показателя 50 мг/л лечение оценивают как эффективное.