Гибридный белок CFP10-ESAT6, индуцирующий реакцию гиперчувствительности замедленного типа в отношении M.TUBERCULOSIS, кодирующая его химерная нуклеиновая кислота и рекомбинантный плазмидный экспресирующий вектор, ее содержащий, способ получения гибридного белка и дозированная лекарственная форма для внутрикожной инъекции на его основе

(51) 07 19/00 (2010.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ ЭКСПРЕССИРУЮЩИЙ ВЕКТОР,ЕЕ СОДЕРЖАЩИЙ,СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИБРИДНОГО БЕЛКА И ДОЗИРОВАННАЯ ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА ДЛЯ ВНУТРИКОЖНОЙ ИНЪЕКЦИИ НА ЕГО ОСНОВЕ(57) Предложен новый гибридный белок 106 из М. , индуцирующий реакцию гиперчувствительности замедленного типа в отношении М. , новая химерная НК,кодирующая этот белок, способ его получения культивированием клеток штамма 21(3) .,трансформированных сконструированным рекомбинантным вектором экспрессии на основе плазмиды рЕТ 22 , в которую по сайтам рестрикцииивстроена указанная химерная нуклеиновая кислота. На основе предлагаемого гибридного белка создана дозированная лекарственная форма для внутрикожного введения для диагностики туберкулезной инфекции, которая представляет собой инъекционный раствор, содержащий 0,2 мкг белка в 0,1 мл физиологического раствора на одно введение.(72) Киселев Всеволод ИвановичПальцев Михаил Александрович(73) Закрытое акционерное общество ВЕЛЕС БИОТЕХ(74) Русакова Нина Васильевна Жукова Галина Алексеевна Ляджин Владимир Алексеевич(54) ГИБРИДНЫЙ БЕЛОК 10-6,ИНДУЦИРУЮЩИЙ РЕАКЦИЮ ГИПЕРЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ЗАМЕДЛЕННОГО ТИПА В ОТНОШЕНИИ.,КОДИРУЮЩАЯ ЕГО ХИМЕРНАЯ НУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА И РЕКОМБИНАНТНЫЙ ПЛАЗМИДНЫЙ ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Химерная нуклеиновая кислота, кодирующая гибридный белок 10-6 из .,индуцирующий реакцию гиперчувтвительности замедленного типа в отношении М. и первичная структура которого описывается аминокислотной последовательностью 1. 2. Химерная нуклеиновая кислота по п.1. которая имеет нуклеотидную последовательность 2. 3. Химерная нуклеиновая кислота по п.1,которая получена клонированием отдельных фрагментов генов Ср 10,2,3, 4,.2.3,4 6,2,3,4,,24 2, 2 3,4 в реакции ПЦР из синтетических олигонуклеотидов. 4. Рекомбинантный вектор экспрессии 22, содержащий химерную нуклеиновую кислоту, кодирующую полипептид 10-6 с аминокислотной последовательностью 1,функционально встроенную в плазмиду 22 по сайтам рестрикцииис С-концевой локализацией полигистидинов. 5. Способ получения гибридного белка 10-6 для диагностики туберкулезной инфекции, включающий культивирование штамма.,трансформированного рекомбинантным вектором экспрессии, разрушение клеток штамма в буферном растворе ультразвуком и выделение белка из очищенных телец включения и из промывок телец включения методом лигандообменной 23717 хроматографии, отличающийся тем, что в качестве рекомбинантного вектора экспрессии используют плазмидный рекомбинантный вектор 22, которым трансформируют клетки штамма 21 (3) 6. Гибридный белок 10-6 из. для диагностики туберкулезной инфекции,первичная структура которого описывается аминокислотной последовательностью 1. 7. Гибридный белок 10-6 по п.6. который получен по п.5. 8. Дозированная лекарственная форма для диагностики туберкулезной инфекции, которая представляет собой инъекционный раствор для внутрикожного введения, содержащий гибридный белок 10-6 из.,отличающаяся тем, что она содержит гибридный белок по любому из п.п. 6-7 в дозе 0,2 мкг в 0,1 мл физиологического раствора на одно введение.