Способ получения противотрихомонадного, противолямблиозного и противовоспалительного средства “Саусалин” из соссюреи солончаковой Saussurea salsa (Pall.) Spreng.

(51) 61 36/00 (2009.01) 61 36/28 (2009.01) 61 33/00 (2009.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ противолямблиозным и противовоспалительным действием. Целью изобретения является способ получения экологически чистого экстракта из(соссюрея солончаковая),обладающего противотрихомонадным,противолямблиозным и противовоспалительным действием, который может быть использован в медицине как фитопрепарат широкого действия. Технический результат заявляемого изобретения достигается тем, что используется экологически безопасный способ получения сухого экстракта соссюреи солончаковой с количественным содержанием действующего вещества сесквитерпенового лактона цинаропикрина (2,22,61). Препарат Саусалин, полученный из соссюреи солончаковой(.) . не имеет побочных эффектов и хорошо переносится больными,обладает выраженным противотрихомонадным, противолямблиозным и противовоспалительным эффектом.(56) 1) Нурмухаметова К.А. Исследование некоторых видов соссюреи как противопаразитарного средства. Автореф. канд. фарм. наук. Пермь, 2000, с.23 2) Машковский М.Д. Лекарственные средства.М. Медицина, Том 2, издание 12-ое, с.415-417(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВОТРИХОМОНАДНОГО,ПРОТИВОЛЯМБЛИОЗНОГО И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА САУСАЛИН ИЗ СОССЮРЕИ СОЛОНЧАКОВОЙ(.)(57) Изобретение относится к области биоорганической химии, фармацевтической химии и технологии лекарств и касается способа получения из растительного сырья биологически активных веществ, обладающих, противотрихомонадным, 23374 Изобретение относится к области биоорганической химии, фармацевтической химии и технологии лекарств и касается способа получения из растительного сырья биологически активных веществ, обладающих, противотрихомонадным,противолямблиозным и противовоспалительным действием. Задачей изобретения является способ получения экологически чистого экстракта из(соссюрея солончаковая),обладающего противотрихомонадным,противолямблиозным и противовоспалительным действием,обусловленного наличием сесквитерпенового лактона цинаропикрина (1),который может быть использован в медицине как лекарственный препарат широкого действия. Близкими аналогами по составу являются экстракты соссюреи иволистной ((.) ), полученные с использованием различных растворителей 0,5 хлороформно-водное извлечение и 4070 и 90-этанольные экстракты,среди которых 70 спиртовый экстракт обладает сравнительно высокой противолямблиозной активностью (Федотова В.Е. Голубушка иволистная как противолямблиозное средство. Автореф. дисс. канд. мед. наук. - Новосибирск. - 1969. с.156 Саратиков А.С, Федотова В.Е. Экстракт голубушки как противолямблиозное средство Аптечное дело. 1952. -3. - Том . с.26-28 Нурмухаметова К. А. Исследование некоторых видов соссгореи как противопаразитарного средства. Автореф. дисс. канд. фарм. Наук.-Пермь.-2000 - с.23). Недостатком известного способа получения является то, что жидкие экстракты готовят методом реперколяции,состоящий из трех периодов, продолжительность которых составляет несколько дней и месяцев. Другой недостаток в том, что хлороформ является токсичным органическим растворителем, запрещен по(международные стандарты) к применению в фармацевтическом производстве. И самый основной недостаток - в полученных экстрактах отмечается низкое содержание действующего вещества сесквитерпенового лактона цинаропикрина (от 0,8 до 1,4). Известен аналог по назначению метронидазол препарат, который выпускается в виде таблеток(метронидазол, трихопол, флагил, гинальгин,орвагил), влагалищных свечей (Клион Д, вагимид,метрофит) /Машковский М.Д. Лекарственные средства, М Медицина.-1993.-Том 2.-Издание 12.с.415-417/. Данный препарат имеет существенные недостатки часто развивается устойчивость 2 трихомонад к метронидазолу и сохраняются условия для рецидива болезни и реинфекции, а также отмечены случаи аллергической реакции на метронидазол. В качестве лекарственного сырья в предлагаемом нами способе используют надземную часть соссюреи солончаковой (), которая широко распространена на территории Центрального Казахстана, плотность запаса сухой надземной массы составляет 255,417,9 г/м 2, а эксплуатационный запас сухой надземной массы составляет 5,7 т с объемом ежегодных заготовок 1,9 т сухого сырья. Технический результат заявляемого изобретения достигается тем, что используется экологически безопасный способ получения сухого экстракта соссюреи солончаковой с содержанием действующего вещества - сесквитерпенового лактона цинаропикрина(2,2-2,61),включающий экстракцию сырья смесью этилацетатспирт в соотношении (41), упаривание жидкого экстракта,очистку густого экстракта от гидрофобных веществ смесью этиловый спирт-вода в соотношении (21), очистку экстракта от водорастворимых веществ этилацетатом, получение очищенного густого экстракта, последующую сублимационную сушку очищенного густого экстракта,получение субстанции препарата Саусалин. Способ 1. Для удаления неполярных компонентов 5 кг травы соссюреи солончаковой загружают в люк экстрактора, после герметизации люка в экстрактор подают жидкий диоксид углерода СО 2 при регулируемом давлении 150 атм. и температуре 60 С. Время экстракции 3 часа. Выход неполярной фракции составляет 1,1 в пересчете на воздушносухое сырье, содержание цинаропикрина 0,01 в пересчете на массу СО 2-экстракта. 4 кг сырья соссюреи солончаковой (после СО 2 экстракции) в 5 мешочках, сшитых из бязи, по 0,8 кг в каждом, помещают в емкость для экстрагирования сырья, заливают 96 этиловым спиртом в количестве 60 кг и экстрагируют при температуре 60 С. После охлаждения жидкий экстракт сливают и экстракцию повторяют еще 2 раза при тех же условиях. По истечении времени экстрагирования, жидкий экстракт заливают в роторный испаритель. В роторном испарителе проводится процесс сгущения жидкого экстракта при температуре 60 С. Полученный густой экстракт массой 2,5 кг равномерно распределяется на четыре лотка,толщина слоя 5 мм, смачивается этиловым спиртом 96 в количестве 0,250 л. Лотки загружаются в сублиматор, температура понижается до -40 С,замораживание продолжается в течение 6 часов,давление в сублимационной камере составляет 510-2 мм рт. ст. Через 6 часов после начала сушки температуру постепенно повышают до 40 С, со скоростью 5 С в час. Досушивание при 40 С продолжается в течение 12 часов. 23374 На протяжении всего процесса сушки проводят постоянное наблюдение за давлением конденсата и давлением воды. Полученный сухой экстракт помещают в фарфоровую ступку и растирают до порошкообразного состояния. Количественное определение содержания действующего вещества цинаропикрина в субстанции препарата Саусалин проводят методом обращенно-фазовой ВЭЖХ высокого давления на приборе 1100 в изократическом режиме в следующих условиях аналитическая колонка,заполненная сорбентом-18, 4,6 х 150 мм, с размером частиц 5 мкм- состав подвижной фазы метанол - вода в соотношении 11- детектирование при длине волны 204 нм температура колонки - комнатная- скорость подвижной фазы 0,500 мл/мин- объем вводимой пробы 20 мкл. Обработку данных проводят с использованием программного обеспечения . Выход субстанции препарата Саусалин составляет 18,5 в пересчете на воздушно-сухое сырье после С 2-экстракции. Содержание действующего вещества цинаропикрина 0,15 в пересчете на субстанцию препарата Саусалин. Способ 2. Для удаления неполярных компонентов 5 кг травы соссюреи солончаковой загружают в люк экстрактора, после герметизации люка в экстрактор подают жидкий С 2 при регулируемом давлении 150 атм. и температуре 60 С. Время экстракции 3 часа. Выход неполярной фракции составляет 1,1 в пересчете на воздушно-сухое сырье, содержание цинаропикрина 0,01 в пересчете на массу СО 2 экстракта. 4 кг соссюреи солончаковой (после С 2 экстракции) в 5 мешочках, сшитых из бязи, по 0,8 кг в каждом, помещают в емкость для экстрагирования сырья, заливают 96 этиловым спиртом в количестве 60 кг и экстрагируют при температуре 60 С. После охлаждения жидкий экстракт сливают и экстракцию повторяют еще 2 раза при тех же условиях. По истечении времени экстрагирования, жидкий экстракт заливают в роторный испаритель. В роторном испарителе проводится процесс сгущения жидкого экстракта при температуре 60 С. Затем экстракт соссюреи солончаковой очищают от гидрофобных веществ. Полученный густой экстракт помещают в плоскодонную коническую колбу и при постоянном перемешивании растворяют в горячем 96 - ном этаноле при температуре 70 С и добавляют воды очищенной, нагретой до аналогичной температуры(соотношение масса густого экстракта - масса этилового спирта 13 соотношение массы этилового спирта - масса воды 21). Полученный раствор оставляют в темном месте на сутки до образования темно - зеленого коагулянта (осадка). Водно-спиртовый раствор экстракта фильтруют через бумажный фильтр. Полученный осадок(гидрофобный балласт липиды, хлорофиллы и т.д.) повторно обрабатывают 2 раза. Далее проводят очистку экстракта от водорастворимых веществ этил ацетатом. Для отделения водного слоя фильтрат помещают в делительную воронку объемом 2 литра и обрабатывают 3 раза этилацетатом в соотношении фильтрат-этилацетат 31. Водный слой отделяют и утилизируют, а этилацетатно-спиртовый раствор отгоняется на роторном испарителе под вакуммом. Полученный густой экстракт массой 2,5 кг равномерно распределяется на четыре лотка,толщина слоя 5 мм, смачивается этиловым спиртом 96 в количестве 0,250 л. Лотки загружаются в сублиматор, температура понижается до -40 С,замораживание продолжается в течение 6 часов,давление в сублимационной камере составляет 510-2 мм рт. ст. Через 6 часов после начала сушки температуру постепенно повышают до 40 С, со скоростью 5 С в час. Досушивание при 40 С продолжается в течение 12 часов. На протяжении всего процесса сушки проводят постоянное наблюдение за давлением конденсата и давлением воды. Полученный сухой экстракт помещают в фарфоровую ступку и растирают до порошкообразного состояния. Количественное определение содержания действующего вещества цинаропикрина в субстанции препарата Саусалин проводят методом обращенно-фазовой ВЭЖХ высокого давления на приборе 1100 в изократическом режиме. Обработку данных проводят с использованием программного обеспечения . Выход субстанции препарата Саусалин составляет 13,4 в пересчете на воздушно-сухое сырье после СО 2-экстракции. Содержание действующего вещества цинаропикрина 0,21 в пересчете на субстанцию препарата Саусалин. Способ 3. Для удаления неполярных компонентов 5 кг травы соссюреи солончаковой загружают в люк экстрактора, после герметизации люка в экстрактор подают жидкий СО 2 при регулируемом давлении 150 атм. и температуре 60 С. Время экстракции 3 часа. Выход неполярной фракции составляет 1,1 в пересчете на воздушно-сухое сырье, содержание цинаропикрипа 0,01 в пересчете на массу СО 2 экстракта. 4 кг сырья соссюреи солончаковой (после С 2 экстракции) в 5 мешочках, сшитых из бязи, по 0,8 кг в каждом, помещают в емкость для экстрагирования сырья, затем заливают заранее приготовленный экстрагент - смесь этилацетат этиловый спирт (41) в количестве 60 кг,экстрагируют при температуре 60 С. После 3 23374 охлаждения жидкий экстракт сливают и экстракцию повторяют еще 2 раза при тех же условиях. По истечении времени экстрагирования, жидкий экстракт заливают в роторный испаритель. В роторном испарителе проводится процесс сгущения жидкого экстракта при температуре 60 С. Затем экстракт соссюреи солончаковой очищают от гидрофобных веществ. Полученный густой экстракт помещают в плоскодонную коническую колбу и при постоянном перемешивании растворяют в горячем 96-ном этаноле при температуре 70 С и добавляют воды очищенной, нагретой до аналогичной температуры(соотношение масса густого экстракта - масса этилового спирта 13 соотношение массы этилового спирта - масса воды 21). Полученный раствор оставляют в темном месте на сутки до образования темно - зеленого коагулянта (осадок). Водно-спиртовый раствор экстракта фильтруют через бумажный фильтр. Полученный осадок(гидрофобный балласт липиды, хлорофиллы и т.д.) повторно обрабатывают 2 раза. Далее проводят очистку экстракта от водорастворимых веществ этилацетатом. Для отделения водного слоя фильтрат помещают в делительную воронку объемом 2 литра и обрабатывают этилацетатом в соотношении фильтрат-этилаиетат (31) 3 раза. Водный слой отделяют и утилизируют, а этилацетатно-спиртовый раствор отгоняется на роторном испарителе. Полученный густой экстракт массой 2,5 кг равномерно распределяется на четыре лотка,толщина слоя 5 мм, смачивается этиловым спиртом 96 в количестве 0,250 л. Лотки загружаются в сублиматор, температура понижается до -40 С,замораживание продолжается в течение 6 часов,давление в сублимационной камере составляет 5102 мм рт. ст. Через 6 часов после начала сушки температуру постепенно повышают до 40 С, со скоростью 5 С в час. Досушивание при 40 С продолжается в течение 12 часов. На протяжении - всего процесса сушки проводят постоянное наблюдение за давлением конденсата и давлением воды. Полученный сухой экстракт помещают в фарфоровую ступку и растирают до порошкообразного состояния. Количественное определение содержания действующего вещества цинаропикрина в субстанции препарата Саусалин проводят методом обращенно-фазовой ВЭЖХ высокого давления на приборе 1100 в изократическом режиме. Обработку данных производят с использованием программного обеспечения . Выход субстанции препарата Саусалин составляет 1,87 в пересчете на воздушно-сухое сырье после СО 2-экстракции. Содержание действующего вещества цинаропикрина 2,24 в пересчете на субстанцию препарата Саусалин. Способ 4. 4 8 кг травы соссюреи солончаковой в 30 мешочках, сшитых из бязи, по 0,8 кг в каждом,помещают в емкость для экстрагирования сырья,затем заливают заранее приготовленный экстрагент- смесь этилацетат - этиловый спирт (41) в количестве 120 кг, экстрагируют при температуре 60 С. После охлаждения жидкий экстракт сливают и экстракцию повторяют еще 2 раза при тех же условиях. По истечении времени экстрагирования, жидкий экстракт заливают в роторный испаритель. В роторном испарителе проводится процесс сгущения жидкого экстракта при температуре 60 С. Затем экстракт соссюреи солончаковой очищают от гидрофобных веществ. Полученный густой экстракт помещают в плоскодонную коническую колбу и при постоянном перемешивании растворяют в горячем 96 - ном этаноле при температуре 70 С и добавляют дистиллированную воду нагретую до аналогичной температуры (соотношение масса густого экстракта- масса этилового спирта 13 соотношение массы этилового спирта - масса воды 21). Полученный раствор оставляют в темном месте на сутки до выпадения осадка с образованием темно - зеленого коагулянта. Водно-спиртовый раствор экстракта фильтруют через бумажный фильтр. Полученный осадок(гидрофобный балласт липиды, хлорофиллы и т.д.) повторно обрабатывают 2 раза. Далее проводят очистку экстракта от водорастворимых веществ этилацетатом. Для отделения водного слоя фильтрат помещают в делительную воронку объемом 2 литра и обрабатывают 3 раза этилацетатом в соотношении фильтрат-этил ацетат 31. Водный слой отделяют и утилизируют, а этилацетатно-спиртовый раствор отгоняется на роторном испарителе под вакуммом. Полученный очищенный густой экстракт массой 2,5 кг равномерно распределяется на четыре лотка,толщина слоя 5 мм, смачивается этиловым спиртом 96 в количестве 0,250 л. Лотки загружаются в сублиматор, температура понижается до -40 С,замораживание продолжается в течение 6 часов,давление в сублимационной камере составляет 510-2 мм рт. ст. Через 6 часов после начала сушки температуру постепенно повышают до 40 С, со скоростью 5 С в час. Досушивание при 40 С продолжается в течение 12 часов. На протяжении всего процесса сушки проводят постоянное наблюдение за давлением конденсата и давлением воды. Полученный сухой экстракт помещают в фарфоровую ступку и растирают до порошкообразного состояния. Количественное определение содержания действующего вещества цинаропикрина в субстанции препарата Саусалин проводят методом обращенно-фазовой ВЭЖХ высокого давления на приборе 1100 в изократическом режиме. 23374 Обработку данных производят с использованием программного обеспечения . Выход субстанции препарата Саусалин составляет 2,92 в пересчете на воздушно-сухое сырье. Содержание действующего вещества цинаропикрина 2,61 в пересчете на субстанцию препарата Саусалин. Оптимальным является применение способа 4,который позволяет получать сухой экстракт соссюреи солончаковой с количественным выходом 2,92 и количественным содержанием действующего вещества -сесквитерпенового лактона цинаропикрина 2,2-2,61. Полученную субстанцию препарата Саусалин взвешивают по 0,1 кг и используют для получения таблетированной формы. Для получения таблетированной формы противотрихомонадного, противолямблиозного и противовоспалительного препарата Саусалин 0,7 г сухой экстракт соссюреи солончаковой смешивают со вспомогательными веществами кислота винная, натрия бикарбонат, натрия крахмала гликолят, кальция стеарат. Таблетки содержат в своем составе сухой экстракт соссюреи солончаковой - 0,12 г кислота винная - 0,252 г натрия бикарбонат - 0,25 г натрия крахмала гликолят - 0,071 г кальция стеарат - 0,007 г. Клинические испытания препарата Саусалин. С целью предварительной оценки безопасности и переносимости препарата Саусалин проведенафаза клинических испытаний на 30 здоровых добровольцах в возрасте 18-30 лет из числа студентов, прошедших медицинский осмотр на базе Казахской медицинской академии и студенческой поликлиники 3 г. Астаны. Изучена оценка влияния препарата Саусалин на клиническое состояние волонтеров и исследование общеклинических анализов (общий анализ крови и общий анализ мочи) и влияние препарата Саусалин на биохимические показатели печени (АЛТ, , билирубин и его фракции,тимоловая проба, общий белок) у волонтеров. Препарат принимают в суточной дозе 1,0 грамм в течение десяти дней. Кратность приема 1 таблетка утром и вечером, натощак, запивая большим количеством воды. При проведении 1 фазы клинических испытаний у волонтеров каких-либо изменений со стороны общего состояния и самочувствия не выявлено,жалоб не отмечено. В эксперименте у волонтеров проведено исследование гемограммы до приема исследуемого препарата, а также через 10 дней после приема. При сопоставлении исследуемых показателей общего анализа крови достоверно значимых изменений в гемограмме не выявлено. За исключением лимфоцитов, где через десять дней на фоне приема препарата Саусалин у исследуемых лиц отмечается увеличение относительного количества лимфоцитов в 1,8 раза (Р 0,001), что указывает на иммунотропное действие исследуемого препарата. Наряду с показателями гемограммы у исследуемых лиц до приема препарата и через десять дней после приема препарата проведено изучение общего анализа мочи. Не наблюдается существенных изменений со стороны общего анализа мочи до исследования и после. За исключением количества кристаллов, количество которых до приема препаратов составляло 0,220,1,а после 0, что свидетельствует о положительном воздействии препарата на обмен веществ. При изучении биохимических показателей крови у волонтеров отмечается увеличение в пределах нормативных показателей количества билирубина в 1,3 раза (Р 0,05) в сравнении с первоначальными показателями. Таким образом, на основании проведенных исследований установлено,что препарат Саусалин в дозе 0,5 грамм 2 раза в день в течение 10 дней не оказывает токсического влияния на организм исследуемых волонтеров и является безопасным для использования в клинике. Клинические испытания препарата Саусалин при хроническом описторхозе и остром лямблиозе. На базе областной инфекционной больницы города Караганды для проведения клинических испытаний было отобрано 22 больных с хроническим лямблиозом, принимавших препарат Саусалин и 22 больных, которые получали препарат Метронидазол. В основной группе преобладают женщины 86,4, а в контрольной мужчины 59. Средний возраст основной группы составил 29,51,4 лет, контрольной - 36,11,6 лет. Среди клинических форм в основной группе преобладала смешанная форма у 15 из 22 (68,2), а в контрольной - кишечная форма у 20 из 22 (90,9) пациентов. У испытуемых оценивают объективные и субъективные данные, а также изменение лабораторных показателей до и после окончания курса приема изучаемого препарата и препарата сравнения. В качестве показателя безопасности служит ежедневная регистрация возможных побочных,аллергических и токсических реакций, результаты лабораторных данных - общий анализ крови и мочи в начале и конце применения препарата, а также изменение биохимических данных в крови. При проведении клинического исследования у испытуемых до исследования, во время и после проведения исследования определяются следующие основные и второстепенные показатели- общее соматическое состояние, включающее объективные и субъективные данные (тяжесть и боли в гепатодуоденальной зоне снижение аппетита)- кал на я/г (в конце исследования троекратно),наличие яиц описторхисов в дуоденальном содержимом исследование кала и дуоденального содержимого на вегетативные формы лямблий и их цисты. В качестве клинических признаков лямблиоза чаще всего обнаруживается обложенный язык, боли в животе, неустойчивый стул, склонность к запорам,слабость, снижение аппетита, раздражительность и явления атопического дерматита. Характерной особенностью патологии является преимущественное поражение билиарного тракта, о чм свидетельствуют данные УЗИ-обследования ГДЗ (гепатодуоденальной зоны). В основной группе отмечается деформирование желчного пузыря с уплотненными стенками у 18 больных, диффузные изменения в поджелудочной железе у 8 больных и явления застойной желчи у 11 больных. В контрольной группе деформирование желчного пузыря регистрировалось у 13 больных, диффузные изменения в поджелудочной железе - у 10 больных и явления застойной желчи - у 13 больных. Признаком паразитарного поражения стенок желчных протоков является их уплотнение в виде гиперэхогенных структур, выраженность изменений вариабельна и зависит от тяжести и длительности заболевания. До начала лечения у 100 больных обеих групп при копрологическом исследовании обнаружены цисты лямблий, при дуоденальном зондировании в основной группе у 15 (68,2) больных обнаружены единичные лямблии, в контрольной группе только у 2 (9) больных. Больным обеих групп назначаются препараты,способствующие улучшению моторно-эвакуаторной функций желчевыводящих и гастороинтестинальной систем и препараты, коррегирующие токсикоаллергические реакции. После приема препарата Саусалин у всех больных прослеживается улучшение общего состояния и нормализация характера стула,практически у всех улучшается аппетит, угасают явления атонического дерматита в виде шелушения и уменьшения очага поражения. На момент выписки при контрольном исследовании кала на простейшие и при контрольном зондировании через двое суток от момента отмены препарата в 100 отмечается санация от лямблиоза. Эффективность противолямблиозной терапии оценивается по результатам клинического выздоровления при повторном исследовании через 21 день после лечения испражнений па цисты лямблий. В контрольной группе у 5 (22,7) больных отмечается повторное выделение лямблий при копрологическом исследовании, чего в основной группе не наблюдается. Изменений со стороны периферической крови в обеих группах не отмечается показатели гемоглобина, количество лейкоцитов и показатели СОЭ (скорость оседания эритроцитов) были в пределах нормы, а количество эозинофилов вне превышало 5. 6 Со стороны биохимических показателей сыворотки крови, у пациентов обеих групп, какихлибо патологических отклонений не выявлено. После проведения 2 фазы клинических исследований у больных ухудшения общего состояния и самочувствия, связанного с побочным действием препарата, не отмечается только у 1 больного отмечается чувство горечи во рту. На базе городской инфекционной больницы г.Астаны препаратом Саусалин пролечено 24 больных с диагнозом хронический описторхоз и 24 больных с диагнозом хронический описторхоз препаратом Бильтрицид. При объективном обследовании выявлено, что до начала лечения препаратом Саусалин отсутствуют патологические изменения органов и систем лишь у 3 (12,5) больных, у остальных 21(87,5) выявлена патология в виде астенического синдрома -9 (37,5) больных, дисфункция желчного пузыря - 4 (16,6), гастроинтестинальный синдром 6(16,6),холангиохолецистит-11),функциональная гипербилирубинемия по типу Жильбера -3 (12,5),у 9 (37,5) больных выявлен токсикоаллергический синдром в виде крапивницы и зуда кожи различной локализации. При объективном обследовании больных контрольной группы установлено, что до начала лечения Бильтрицидом отсутствуют патологические изменения органов и систем лишь у 6 (25) больных, у остальных 18 (75) выявлена патология в виде астенического синдрома - 4 (16,6) больных,дисфункция желчного пузыря-1(16,6), панкреатит - 1 (4,1), функциональная гипербилирубинемия по типу Жильбера - 4 (16,6),у 12 (50,0) больных выявлен токсикоаллергический синдром в виде крапивницы и зуда кожи различной локализации, у одного больного была аллопеция (4,1). При проведении общего анализа крови в основной группе отмечается следующие изменения лейкопения у 4 (12,5), умеренный лейкоцитоз у 1(4,1) больного,умеренно выраженная эозинофилия у 4 (16,6) больных, изменений со стороны показателей красной крови ни у одного больного не было. Исследование биохимических показателей функции печени до начала лечения показывает, что повышение общего билирубина за счет неконъюгированной фракции было у 3 (12,5) больных, повышение АЛТ в 1,5-3 раза у 2 (8,2) больных. В контрольной группе результаты общего анализа крови представлены следующим образом лейкопения у 4 (12,5), умеренный лейкоцитоз у 2(8,2) больных, умеренно выраженная эозинофилня у 4 (16,6) больных, повышение СОЭ - 2 (8,2) больных, изменений со стороны показателей красной крови ни у одного больного не было. Исследование биохимических показателей функции печени до начала лечения показывает, что повышение общего билирубина за счет неконъюгированной фракции было у 4 (16,6) 23374 больных, повышение АЛТ в 1,2 раза у 1 (4,1) больного, у 2 (8,2) больных была повышена тимоловая проба. При проведении инструментальных методов исследования в основной группе установлено,патология желудка и двенадцатиперстной кишки,выявленная эндоскопически, имеет место у 13(53,3) больных чаще в виде хронического гастродуоденита, реже катарального дуоденита,гастрита, фолликулярного бульбита, рефлюксгастрита. При УЗИ органов брюшной полости выявлена сочетанная патология в виде диффузных изменений паренхимы печени в 6 (25,0) случаях,диффузных изменений паренхимы поджелудочной железы в 13 (53,3), хронического холецистита в 11(45,1), желчно-каменной болезни и дискинезии желчевыводящих путей по 3 (12,5) случаев. В контрольной группе при проведении инструментальных методов исследования выявляется эндоскопически патология желудка и двенадцатиперстной кишки у 9 (37,5) больных. При УЗИ органов брюшной полости выявляется сочетанная патология в виде диффузных изменений паренхимы печени в 5 (21,0) случаях, диффузных изменений паренхимы поджелудочной железы в 9(37,5), хронического холецистита в 9 (37,5),желчно-каменной болезни 1 (4,1), дискинезии желчевыводящих путей у 3 (12,5) больных. Во время проведения клинических исследований на фоне прима препарата Саусалин у больных ухудшения общего самочувствия и состояния не отмечается. По результатом проведения клинических испытаний у больных ухудшения со стороны общего состояния и самочувствия, связанное с побочным действием препарата Саусалин, не выявлено В результате лечения больных лямблиозом в основной группе наблюдается нормализация стула,угасание явлений атонического дерматита практически у всех больных. При приеме препарата Саусалин отмечается 100 санация от лямблиоза при контрольном дуоденальном зондировании и контрольной копроскопии на простейшие. Оценка эффективности экстракта соссюреи солончаковой на модели трихомонадного вагинита. Трихомонадный вагинит белых крыс воспроизводят после специальной подготовки животных, которая включает два этапа - проведение операции кастрации и создание состояния течки, достигаемой введением эстрогенных препаратов. Для заражения крыс используют 2-х дневные штаммы, выделенные со слизистых оболочек пациентов,страдающих мочеполовым трихомониазом. Животных делят на 4 группы по 5 животных в каждой. В основной группе самкам во влагалище вводят свечи с экстрактом соссюреи солончаковой(действующее вещество составляет 15 мг) на основе масла какао, в группе сравнения используют свечи Метрофит по 20 мг/кг, в контрольной группе 1 вводят свечи плацебо (масло какао), а контрольная группа 2 - животные без лечения. Все лекарственные средства вводят ежедневно 1 раз в день в течение семи дней. При бактериоскопическом исследования выявляется, что при создании модели в мазках определяется большое количество трихомонад- свыше 25 в поле зрения. В процессе лечения в контрольных группах снижения простейших в поле зрения к концу эксперимента не происходит, остается свыше 25 в поле зрения. При лечении препаратом сравнения на седьмые сутки отмечается положительная динамика снижение простейших до -до 25 в поле зрения, на седьмые сутки- - от 15 до 20 в поле зрения, при окончании эксперимента наблюдаются единичные трихомонады в препарате . При лечении свечами с экстрактом соссюреи солончаковой уже па пятые сутки лечения наблюдаются единичные трихомонады в поле зрения , а к седьмым суткам в мазке простейших не наблюдается. Согласно морфологическим данным при введении свечей с экстрактом соссюреи солончаковой лабораторным животным, уже на пятые сутки определяется положительная динамика в сравнении с препаратом Метрофит, а в конце эксперимента при сравнительном гистологическом исследовании слизистой оболочки матки признаков воспаления не выявляется. Таким образом, свечи с экстрактом соссюреи солончаковой эффективны при лечении экспериментального трихомонадного вагинита и по активности превосходят препарат Метрофит. Противовоспалительное действие экстракта соссюреи солончаковой оценивается на модели острого гнойного эндометрита 24 белых беспородных крыс, разделенных на 4 группы по 6 животных в каждой. В основной группе животным вводят свечи на основе масла какао с экстрактом соссюреи солончаковой в дозе 15 мг, в группе сравнения используют свечи Клион Д 0,5 г,поделенные на 4 равные части по 125 мг действующего вещества, в контрольной группе 1 вводят свечи только с масло какао, а в контрольной группе 2 лечение не проводятся. Все препараты вводят ежедневно 1 раз в день в течение недели. О характере и степени выраженности воспалительной реакции судят по гистологическим изменениям в тканях матки, маточных труб и влагалища. Для этого на 1, 3, 5 и 7 сутки забивают по одному животному из каждой группы с последующим взятием влагалища и матки на морфологическое исследование. При использовании влагалищных свечей с экстрактом соссюреи солончаковой на 3 сутки при сравнительном гистологическом исследовании структур слизистой оболочки матки выявляется отек тканей эндометрия в клетках эпителия,выстилающих поверхность эндометрия и его железистые структуры, отмечается дистрофические изменения в виде набухания и вакуолизации цитоплазмы сохраняется умеренно выраженная гиперемия сосудов, стромы эндометрия. 7 23374 На пятые сутки в группе с экстрактом соссюреи солончаковой соединительно-тканная строма эндометрия была богата кровеносными сосудами и клеточными элементами лимфоплазмоцитарная инфильтрация сохраняется по периферии отдельных маточных желез в виде узкого ободка отмечается выраженная пролиферативная активность железистого эпителия маточные железы становятся более глубокими основная масса волокнистой стромы слизистой оболочки представляется нежными эластическими волокнами, которые формируют сеть вокруг сосудов и клеточных элементов. При воздействии экстракта соссюреи солончаковой в конце эксперимента при сравнительном гистологическом исследовании слизистой оболочки матки признаков воспаления не выявляется. Структура слизистой оболочки матки крыс характерна для стадии эструса. Таким образом, на модели острого гнойного эндометрита установлено противовоспалительное действие экстракта соссюреи солончаковой. Преимущества способа получения нового противотрихомонадного, противолямблиозного и противовоспалительного средства из соссюреи солончаковой ((.) .) 1. Доступность растительного сырья - соссюрея солончаковая ((.) .) широко распространена на территории Центрального Казахстана(эксплуатационный запас сухой надземной массы составляет 5,7 т с объемом ежегодных заготовок 1,9 т сухого сырья) 2 Способ получения субстанции препарата является экологически чистым, так как для экстракции и обработки используют этилацетат и этиловый спирт. Применение данного способа позволяет получать сухой экстракт соссюреи,солончаковой с количественным содержанием действующего вещества - сесквитерпенового лактона цинаропикрина (2,2-2,61) 3. Препарат Саусалин не имеет побочных эффектов и хорошо переносится больными,обладает выраженным противотрихомонадным,противолямблиозным и противовоспалительным эффектом. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ получения противотрихомонадного,противолямблиозного и противовоспалительного средства Саусалин из(.), включающий экстракцию сырья, его обработку, отличающийся тем, что в качестве сырья используют соссюрею солончаковую((.) ), экстракцию сырья проводят смесью этил ацетат-спирт (41), очистку густого экстракта от гидрофобных веществ - смесью этиловый спирт-вода в соотношении (21), и водорастворимых веществ этилацетатом,сублимационную сушку очищенного экстракта. 2. Лекарственное средство по п. 1,отличающееся тем, что в качестве биологически активного компонента содержит сухой экстракт соссюреи солончаковой,при следующем соотношении ингредиентов на одну таблетку,массой 0,7 г сухой экстракт соссюреи солончаковой - 0, 12 г кислота винная - 0,252 г натрия бикарбонат - 0,25 г натрия крахмала гликолят - 0,071 г кальция стеарат - 0,007 г.