Лекарственный препарат “RENESSANS”, обладающий антибактериальным, противоязвенным и иммуномоделирующим действием и его применение

(51) 61 33/18 (2011.01) 61 33/14 (2011.01) 61 31/70 (2011.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ антибактериального,противоязвенного и иммуномодулирующего действия, которые могут быть использованы в инъекционной форме. Лекарственный препаратсодержит компоненты при следующем их соотношении,(мас.) Йод 0,4 - 2,0 Йодид калия 0,8 - 4,0 Крахмал 10,0- 40,0 Кислота аскобиновая 0,4- 2,0 Глюкоза 1,2- 4,8 Хлорид натрия 0,3- 1,8 Вода очищенная остальное. Фармацевтически эффективное количество препарата вводят внутривенно, внутримышечно или перорально.(76) Бегалиев Шокан Сабирханович Нугербекова Кульшат Магзумовна(56) Предварительный патент РК 13765, кл. А 61 33/18, 2003 Предварительный патент РК 6730, кл. А 61 33/18, 1998 Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к получению йодосодержащих лекарственных препаратов. Препараты йода в настоящее время занимают важное место среди современных антисептиков. Возбудители многих инфекций чувствительны к йодсодержащим препаратам, которые проявляют фунгицидное,цистоцидное,антипротозойное действия, обладают активностью в отношении некоторых спор и не формируют приобретенной устойчивости к ним. Проблема использования йода состоит в том, что в высокой концентрации он является токсичным,раздражает кожу и слизистые оболочки. Однако в комплексе с полисахаридами и полимерами йод в значительной мере теряет токсичность, действует более медленно и продолжительно (в течение 5 ч),сохраняя при этом антивирусные и антимикробные свойства (Никулин В.Н., Герасименко В.В., 2008 Свирская Е., 2008). Йод проявляет также фунгицидное, цистоцидное. антипротозойное действие, обладает активностью в отношении некоторых спор. При резорбтивном действии он активно участвует в обменных процессах организма,повышает лецитинхолестериновый коэффициент, липопротеиназную и фибринолитическую активность крови замедляет свертываемость крови снижает уровень холестерина и -липопротеинов. Комплексы йода с полимерами (йодинол,йоданат, йодовидон, повидон-йод, йодопирон,йодоформ, хиниофон) применяют в качестве антисептиков для орошения миндалин при хроническом тонзиллите, гнойном отите, синусите,кератите,фурункулезе,периодонтите,конъюнктивите, для обработки ран и операционного поля. Известно, что повидон-йод (йод в виде комплекса со связывающим его йодофором поливинилпирролидоном) обладает большим спектром антибактериального и антивирусного действия, чем другие известные антисептики. Он проявляет активность против многих видов вирусов,включая ВИЧ, в суспензионных опытах..,-. , 1997 г., 195, Прилож. 2, с. 29-35. Противоинфекционные средства,содержащие повидон-иод, могут использоваться для борьбы с болезнями,вызванными ВИЧ,хламидиями,гонококками, трепонемой и вирусом простого герпеса.,. -,,, /- - ЕР 08239961, 01 59/12, 61 К 9/00, заяв. 15.08.96, опубл. 18.02.98. ,.5545401, 61 31/79, 61 33/18, заяв. 02.06.94,опубл. 13.08.96. Известен препарат Иодомидол, обладающий антивирусным и антибактериальным действием 2 патент РК 6730, заяв. 26.01.96, опубл. 16.11.98,содержащий йод, йодид калия или натрия,синтетический водорастворимый полимер,выполняющий роль полимерной матрицы, смесь природных полимеров, например поли-, моно- и олигосахаридов, а также воду при следующем соотношении компонентов, г/л йод 6-10, йодид калия или натрия 9-15,синтетический водорастворимый полимер 2-4, моно-, олиго-и полисахариды 8-120, вода и остальное. Этот препарат обладает относительно высокой токсичностью и предназначен исключительно для лечения вирусных и других бактериальных заболеваний животных. Также известен лечебный препарат, обладающий бактерицидным и вирулицидным действием,содержащий йод, йодид калия или натрия,синтетический водорастворимый полимер,природные полимеры, например полисахариды, и монои олигосахариды,при следующем соотношении компонентов, г/л йод 6-10, йодид калия или натрия 9-15,синтетический водорастворимый полимер 2-4, природный полимер(полисахариды) и моно-и олигосахариды 8-120, вода и остальное ( 5435 1, А 61 33/18, А 61 31/715). Недостатком данного препарата является его относительно высокая токсичность. Воздействовать на вирусы, уже проникшие в клетки, сложно, так как сама клетка надежно защищает их от любого воздействия. Именно в клетке ведет разрушительную работу приспособленный вирус. Проблема состоит в том, чтобы на молекулярном уровне подавить специфические процессы биологического синтеза вирусных частиц, не затронув, по возможности, жизнедеятельности незараженных вирусом клеток. Наиболее близким по технической сущности является препарат бальзам Возрождение(Предварительный патент РК 13765, кл. А 61 К 33/18, от 01.10.2003). Бальзам Возрождение содержит (мас.) 0,51,5 йод, 1,5-1,7 йодистый калий, 14,0-16,0 крахмал,2,0-3,0 глюкозу, 8,0-10,0 глицерин, 2,0-3,0 молочную кислоту, 0,8-1,0 натрия хлорид, 2,0-3,0 яблочный уксус и, остальное, дистиллированная вода. Однако бальзам Возрождение является биологически активной добавкой, без выявленного бактерицидного действия по отношению к микобактериям и характеризуется низкой бактерицидной активностью по отношению к спорам, спорообразующим бактериям и грибам. Бальзам предназначен для применения исключительно перорально и исключает введение фармацевтического состава субъекту путем внутривенной или внутримышечной инъекции, что в свою очередь ограничивает область применения. Задачей изобретения является создание лекарственного препарата антибактериального,противоязвенного и иммуномодулирующего действия малой токсичности с возможностью его применения в инъекционной форме, а также способа его получения. Техническим результатом изобретения является расширение ассортимента лекарственных препаратов антибактериального, противоязвенного и иммуномодулирующего действия малой токсичности с возможностью применения в форме инъекций. Технический результат достигается лекарственным препаратом, включающем йод,йодид калия крахмал, кислоту аскорбиновую,глюкозу, хлорид натрия и очищенную воду при следующем соотношении компонентов (мас.) Йод 0,4 - 2,0 Йодид калия 0,8 - 4,0 Крахмал 10,0-40,0 Кислота аскорбиновая 0,4- 2,0 Глюкоза 1,2- 4,8 Хлорид натрия 0,3-1,8 Вода очищенная остальное. Неожиданно обнаружено,что изменение содержания компонентов в композиции, а именно йода,йодида калия,крахмала,кислоты аскорбиновой глюкозы и хлорида натрия в водном растворе позволяет получить препарат, пригодный для использования в инъекционном виде. Он содержит меньшее количество компонентов, а именно - 6, относительно прототипа, в составе которого 9 компонентов. Отличительными признаками заявленной композиции от прототипа является состав композиции и концентрация компонентов. Композиция, не содержащая двух кислотных компонентов - кислоты молочной и уксуса яблочного, а также трехатомного спирта глицерина и содержащая (в мас.) йод - 0,4 - 2,0 калия йодид - 0,8 - 4,0 крахмал- 10,0-40,0 кислота аскорбиновая - 0,4-2,0 глюкоза - 1,2-4,8 хлорид натрия - 0,3- 1,8, является оптимальным составом,что позволило сформировать сбалансированную систему компонентов, устойчивую в водном растворе. Для формирования препарата как целостной субстанции были применены современные принципы комбинаторной химии. Одна из главных функций компонентов, используемых в составе препарата, заключается в формировании особой структуры, которая бы сохраняла окислительную способность йода в состоянии, при котором реализовывалась возможность транспорта этих частиц на большие расстояния для распределения его в конечном итоге по всему организму. Одна из главных функций компонентов,используемых в составе препарата, заключается в формировании особой структуры, которая сохраняет окислительную способность йода в некотором умеренном состоянии для того, чтобы была возможность транспорта этих частиц на большие расстояния для распространения его по всему организму. Образование указанной системы обеспечивает оптимальный состав при следующем соотношении компонентов (мас.) йод - 0,4 - 2,0 калия йодид - 0,8 - 4,0 крахмал - 10,0-40,0 кислота аскорбиновая - 0,4-2,0 глюкоза - 1,2-4,8 хлорид натрия - 0,3-1,8, дистиллированная вода - остальное. Указанный состав и определенные концентрации компонентов в водном растворе образуют йоднополимерный комплекс, выполняющий роль матрицы и образующий ассоциаты, из которых выделяется активный действующий агент - активная форма йода. В образовании матрицы и ассоциатов принимает участие крахмал и глюкоза, т.е. поли- и моносахара, имеющие различные по активности функционаьные группы. Введение в состав лекарственного препарата йодида калия позволяет добиться образования физико-химической системы,длительное время предотвращающая дезактивацию главного действующего агента. В настоящее время хорошо известно, что углеводы являются обязательными компонентами бактериальных клеточных стенок, первыми вступающими в контакт с иммунной системой макроорганизма. Благодаря этому обстоятельству, механизмы врожденного иммунитета включают в себя этапы распознавания бактериальных карбогидратов и гликоконъюгатов, связанные с функцией ряда клеточных рецепторов лектинового типа,обнаруженных недавно на поверхности фагоцитирующих клеток. При настаивании крахмала с водой, даже с горячей, крахмальные зерна лишь разбухают, и только небольшая часть полисахаридов крахмала переходит в раствор. Коллоидный раствор крахмала(крахмальный клейстер) готовят, размешивая в небольшом количестве воды, и выливают постепенно в кипящую воду при сильном перемешивании. Согласно общепринятому в настоящее время мнению, образование комплекса амилоза-йод связано со спиральной конформацией цепи амилозы, в центре спирали которой образуется каналообразная полость с размерами, достаточными для размещения молекул йода. Комплекс крахмалйод образует гексагональные кристаллы. Обнаружено, что образование йодного комплекса не изменяет вязкости растворов амилозы. При изучении структуры йодно-крахмального комплекса установлено, что это соединение включения с донорноакцепторной связью и валентностью, определяющейся отношением одного атома йода к восьми мономерным звеньям полимера, с зарядом йодной компоненты равном нулю. В присутствии крахмала молекулы 2 распадаются с образованием сложных ионов 3 и ,причем, в образовании йодкрахмального комплекса принимает участие, только сложный анион 3,который исчезает из раствора. Сложный анионнапротив, остается в растворе, не входя в комплекс. Концентрация его резко повышается за счет расщепления 2. Исследование йодкрахмальной реакции дает основание представить ее механизм в следующем виде 22 Н 2 крахмалкрахмалйодкрахмал Компоненты препарата обеспечивают селективное окисление главным действующим 3 агентом, йодом, жизненно важных молекулярных компонентов вирусов и бактерий. Таким образом, компоненты заявленного препарата, с одной стороны, направлены на поддержание его стабильности и структурированности, а с другой, ответственны за прямое проявление двух основных свойств антимикробного и иммуномодулирующего, так как в составе предложенного препарата оптимальным образом сочетаются как компоненты антимикробного характера,так и иммуномодулирующего действия. В совокупности существенные признаки лекарственного препарата обеспечивают циркуляцию препарата в организме в активном состоянии, что и позволяет применять его в инъекционной форме. Способ приготовления лекарственного препаратаосуществляют следующим образом. Готовят растворы кристаллического йода и йодида калия, хлористого натрия и аскорбиновой кислоты в дистиллированной воде, в также суспензию крахмала в воде. Все растворы смешивают и доводят до 1 литра воды. Сведения,подтверждающие возможность осуществления изобретения. Пример осуществления способа получения препарата. 10 г. кристаллического йода измельчают и 16 г иодида калия растворяют в небольшом количестве очищенной воды. К 150 г крахмала добавляют очищенную воду для приготовления суспензии. Готовят растворы хлористого натрия (9,0 г) и аскорбиновой кислоты (10,0 г) все перемешивают и доводят до одного литра очищенной водой. Приготовленный лекарственный препарат имеет вид сиропообразной жидкости, цвета от черного до темно - синего с запахом характерным препаратам йода. Примеры,подтверждающие свойства и возможности применения препарата. Для исследования безопасности применения лекарственного препаратаего вводили животным внутибрюшинно в различных дозах в неразведенном виде и с разведением в физиологическом растворе. При подборе дозы руководствовались рекомендациями о максимально допустимых количествах жидкости для введения в брюшную полость, которая для крыс составляет 5 мл. Выбор дозы препарата для инъекций определяли согласно классификации токсичности химических веществ в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76. Препарат вводили ежедневно однократно внутрибрюшинно. В период эксперимента крысы были разделены на контрольные и опытные группы. Опытных было четыре группы, различные по дозам и срокам введения препарата. Препарат вводился животным внутрибрюшинно с разведением в физиологическом растворе хлорида натрия, а также в неразведенном виде. 1. Животным первой группы ежедневно внутрибрюшинно вводились по 0,06 мл препарата 3,0 мл физиологического раствора, что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 1,7 раза. Крысы забивались через 5, 10 и 15 дней после начала эксперимента. 2. Животным второй группы однократно вводили по 0,66 мл препарата 3,0 мл физиологического раствора, что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 11 раз, забой животных производили через 5 дней после начала введения. 3. Животным третьей группы однократно вводили по 2 мл препарата 3,0 мл физиологического раствора,что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 33 раза и забивали животных через 10 дней после начала эксперимента. 4. Животным четвертой группы однократно вводили 5 мл чистого препарата без разведения, что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 83 раза, и забивали животных через 15 суток после начала эксперимента. Основные данные результатов анализа морфологического состава крови и лейкоцитарной формулы приведены в таблице 1. Как видно из таблицы 1, изучаемый препарат не вызвал статистически достоверных изменений со стороны форменных элементов крови экспериментальных животных, по сравнению с контрольными крысами,следовательно, исследуемый препарат не оказывал токсического воздействия на систему крови. Результаты гистологического исследования органов животных контрольной и опытной групп показали,что препаратне вызвал изменений гистологической структуры внутренних органов экспериментальных животных,что также подтверждает нетоксичность препарата. Исследование антимикробного действия препарата проводили в опытахметодом двукратных серийных разведений на жидких питательных средах. Растворы йодистого крахмала и йодамилозы готовили действием рассчитанного количества полийодида калия на 0,2-1 растворы полисахаридов. Концентрация молекулярного йода в растворах варьировала от 0,27 до 1, концентрация йодполисахарида составляла около 1. Для изучения антибактериального действия препаратов исходные растворы разводились физиологическим раствором хлорида натрия. К каждому разведению йодполисахарида прибавлялась взвесь бактерий на физиологическом растворе в количестве 5 млн. клеток,приготовленная на суточной агаровой культуре испытуемого штамма. После 15-минутной экспозиции из каждого разведения препарата производили высев на мясопептонный агар в чашки Петри. Результаты определяли через сутки по отсутствию роста бактерий, что указывало на полную бактерицидную активность раствора йодвысокополимера. Результаты исследования представлены в таблице 2. Были проведены исследования по изучению противоязвенной эффективности препаратана 10 больных язвенной болезнью желудка и 12-типерстной кишки в течение 2-х недель показали высокий противоязвенный эффект препарата. Так, при монотерапии препаратомзаживление язв наблюдали в 9-ти случаях независимо от их локализации (4 - язвы желудка медиогастральные и антральные, и 5 язв ДПК). Только в одном случае прием препарата привел к усилению боли (язва ДПК) и потребовалось назначение инъекции противовоспалительного препарата у всех 9-ти больных при контрольной эзофагогастроскопии установлено полное заживление язв, при этом купирование боли наблюдалось на 1-2-й день приема препарата. Во всех случаях не было обнаружено зависимости заживляющего эффекта препарата от размеров язв, возраста и пола больных. Полученные данные показывают высокую противоязвенную эффективность препаратаи связаны с его репаративными свойствами. У 13 волонтеров, получавших препарат в течение 27 дней, дважды была проведена оценка иммунного статуса (перед назначением и после 27 дней приема). Исследования были проведены на базе лаборатории иммунологии Медицинского центра Сункар, имеющей официальную лицензию Алматинского городского управления здравоохранения на выполнение клиникоиммунологических исследований. Оценка иммунного статуса включала определение в периферической (венозной) крови общего количества лейкоцитов, лимфоцитов,лейкоформулы, относительного и абсолютного содержания основных субпопуляций лимфоцитов(общих Т-лимфоцитов,их хелперных и супрессорных субпопуляций В-лимфоцитов,натуральных киллеров),неспецифической функциональной активности Т-лимфоцитов, уровни основных классов сывороточных иммуноглобулинов и циркулирующих иммунных комплексов, фагоцитарную и функциональнометаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов). Основные субпопуляции лимфоцитов идентифицировали с помощью коммерческих наборов моноклональных антител к кластерам СВ 3, СВ 4, СВ 8-, СВ 16, СВ 72 (российского производства) методом непрямой иммунофлюоресценции на микроскопе Люмам И 3 неспецифическую функциональную активность Т-лимфоцитов изучали с помощью прямой реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) при стимуляции клеток ФГА-Р концентрацию основных классов сывороточных иммуноглобулинов (, , А) определяли традиционным методом иммунодиффузии в агаре с использованием коммерческих наборов моноспецифических антииммуноглобулиновых сывороток концентрацию общего- иммуноферментным методом циркулирующих иммунных комплексов - с 5 помощью реакции преципитации в ПЭГ-6000, с последующей спектрофотометрией осадков фагоцитарную активность нейтрофильных лейкоцитов изучали в реакции фагоцитоза с частицами латекса и теста восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест), при этом осуществлялась параллельная постановка как спонтанного, так и стимулированного пирогеналом,вариантов обоих тестов (табл. 3). Таким образом, предложенный лекарственный препарат , можно использовать как для внутреннего применения, так и для инъекций. Установлено, что антимикробное действие не только сопоставимо с действием водных растворов йода, но и в ряде случаев превосходит их. Результаты оценки иммунного статуса в процессе апробации лекарственного препарата показали наличие иммуннокоррегирующего эффекта. Оптимальными лекарственными формами препаратаявляются суспензия для приема внутрь и суспензии для инъекций. Препаратявляется нетоксичным, обладает противомикробным действием, противоязвенным эффектом и иммунокорригирующими свойствами. Таким образом, в результате проведенных исследований разработан состав йодвысокополимера с условным названием. Учитывая широкий спектр фармакологической активности препаратов йодвысокополимеров, мы разработали технологию производства препаратав двух лекарственных формах - суспензии для внутреннего использования и суспензии для инъекции. Исследования по стандартизации и определению сроков хранения. Препарат , суспензия для приема внутрь Описание. Сиропообразная жидкость от темносинего до черного цвета, с характерным вкусом и запахом,свойственным препаратам йода. Подлинность. К 5 мл препарата прибавляли 5 мл раствора натрия тиосульфата 0,1 М раствор мгновенно обесцвечивается (йод). рН. От 3,0 до 5,0(потенциометрический, ГФ , вып. 1, стр. 113). Сухой остаток. Не менее 9,0 (ГФ , вып. 2, стр. 148). Плотность. 1,03-1,08 г/см 3 (ГФ , вып.1, стр. 24). Микробиологическая чистота. Не допускается наличие бактерий семейства ,и. Препарат , суспензия для инъекций Описание. Сиропообразная жидкость от темносинего до черного цвета, с характерным вкусом и запахом свойственным препаратам йода. Подлинность. К 5 мл препарата прибавляли 5 мл раствора натрия тиосульфата 0,1 М раствор мгновенно обесцвечивается (йод) рН. От 3,0 до 5,0 Стерильность. Препарат стерилен. Испытания проводят методом Прямого посева в соответствии с требованиями ГФ , вып.2, стр. 187. Пирогенность. Препарат апирогенен. Тест-доза 0,1 мг препарата разведенная в 1 мл воды для инъекций на 1 кг массы животного, внутривенно(ГФ , вып. 2, стр. 183). Токсичность. Препарат нетоксичен. Тест-доза 0,1 мг препарата, разведенная в 0,5 мл воды для инъекций, внутривенно (ГФ , вып.2, стр. 182). Срок наблюдения 48 час. Испытания стабильности препарата ,суспензии для внутреннего применения, в соответствии с Руководством //2736/99. Результаты испытаний стабильности суспензии для внутреннего применения препаратаи суспензии для инъекций препаратаприведены в таблицах 1 и 2, соответственно. Таким образом, результаты исследования по стандартизации препаратапо физико-химическим показателям для суспензии для внутреннего применения и для суспензии для инъекций показали,что разработанные лекарственные препараты соответствуют требованиям нормативных документов. Определены сроки годности препаратов для внутривенного применения и для инъекции по всем параметрам качества и количественного определения и установлен срок годности для обоих препаратов в 2 года. Исследование специфической биологической активности и безвредности препарата лекарственного препарата . Исследование антимикробного действия препарата проводилось в опытахметодом двукратных серийных разведений на жидких питательных средах. Растворы йодистого крахмала и йодамилозы готовились действием рассчитанного количества полийодида калия на 0,2-1 растворы полисахаридов. Концентрация молекулярного йода в растворах варьировала от 0,27 до 1,концентрация йодполисахарида составляла около 1. Для изучения антибактериального действия препаратов исходные растворы разводили физиологическим раствором хлорида натрия. К каждому разведению йодполисахарида прибавлялась взвесь бактерий на физиологическом растворе в количестве 5 млн клеток, приготовленная на суточной агаровой культуре испытуемого штамма. После 15-минутной экспозиции из каждого разведения препарата производился высев на мясопептонный агар в чашки Петри. Результаты учитывали через сутки по отсутствию роста бактерий, что свидетельствует о полной бактерицидной активности раствора лекарственного препарата . Результаты исследования представлены в таблице 1. Таблица 1 Антибактериальный спектр йодполисахаридов Тест-микроб Концентрация йода, при которой наблюдается полное отсутствие роста микробов, /мл Йод крахмал Йодамилоза.2785310 5,8 2,73/84 20 6,5 3,45/85 10 10 101755 10 10 10 Проведены исследования по изучению приема препарата. Во всех случаях не было противоязвенной эффективности препарата обнаружено зависимости заживляющего эффектана 10 больных язвенной болезнью препарата от размеров язв, возраста и пола больных. желудка и 12-типерстной кишки в течение 2-х Полученные данные показывают высокую недель показали высокий противоязвенный эффект противоязвенную эффективность препарата препарата. Так, при монотерапии препаратоми связаны с его репаративнымизаживление язв наблюдалось в 9-ти свойствами. У 13 волонтеров, получавших препарат случаях независимо от их локализации (4 - язвы в течение 27 дней, дважды была проведена оценка желудка медиогастральные и антральные, и 5 язв иммунного статуса (перед назначением и после 27 ДПК). Только в одном случае прием препарата дней приема). Исследования были проведены на привел к усилению боли (язва ДПК) и базе лаборатории иммунологии Медицинского потребовалось назначение инъекции центра Сункар, имеющей официальную лицензию противовоспалительного препарата. У всех 9-ти Алматинского городского управления больных при контрольной эзофагогастроскопии здравоохранения на выполнение клиникоустановлено полное заживление язв, при этом иммунологических исследований. купирование боли наблюдалось на 1-2-й день 6 Оценка иммунного статуса включала определение в периферической (венозной) крови общего количества лейкоцитов, лимфоцитов,лейкоформулы, относительного и абсолютного содержания основных субпопуляций лимфоцитов(общих Т-лимфоцитов,их хелперных и супрессорных субпопуляций,В-лимфоцитов,натуральных киллеров),неспецифической функциональной активности Т-лимфоцитов, уровни основных классов сывороточных иммуноглобулинов и циркулирующих иммунных комплексов, фагоцитарную и функциональнометаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов). Основные субпопуляции лимфоцитов идентифицировали с помощью коммерческих наборов моноклональных антител к кластерам СВ 3, СВ 4, СВ 8-, СВ 16, СВ 72 (российского производства) методом непрямой иммунофлюоресценции на микроскопе Люмам И 3 неспецифическую функциональную активность Т-лимфоцитов изучали с помощью прямой реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) при стимуляции клеток ФГА-Р концентрацию основных классов сывороточных иммуноглобулинов определяли традиционным методом иммунодиффузии в агаре с использованием коммерческих наборов моноспецифических антииммуноглобулиновых сывороток концентрацию общего- иммуноферментным методом циркулирующих иммунных комплексов - с помощью реакции преципитации в ПЭГ-6000, с последующей спектрофотометрией осадков фагоцитарную активность нейтрофильных лейкоцитов изучали в реакции фагоцитоза с частицами латекса и теста восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест), при этом осуществлялась параллельная постановка как спонтанного, так и стимулированного пирогеналом,вариантов обоих тестов. При попытке определения достоверного влияния приема препарата на иммунологическую реактивность организма по средним значениям нами не было установлено статистически достоверного эффекта (табл. 2). Таблица 2 Среднегрупповые значения изученных иммунологических параметров в процессе исследования Иммунологические показатели До начала По окончании 3 49,21,7 51,61,1 0,05 4 33,50,7 35,60,7 0, 05 8(8) 21,61,3 22,70,8 0,0516 14,11,5 15,91,2 0,05 7216,51,5 17,1 1,3 0,05 4/8 1,620,11 1,580,11 0,05 ИТМЛ 0,630,03 0,610,13 0,05( г/л ) 0,630,08 0,980,07 0,05(г/л) 9,190,83 9,660,66 0,05(г/л) 1,480,20 1,570,29 0,05(МЕ/мл) 73,07 2,26 60,155,49 0,05 ЦЖ (усл.Ед.) 11,071,22 10,080,83 0,05 НСТспонт.18,130,92 20,082,06 0,05 НСТстим.40,11,25 35 ,0 3 , 7 0,05 ИСнст 2,240,06 2,260,07 0,05 ФАспонт. 18,40,36 19,00,76 0,05 ФАстим.38,51,51 40,61,Д 0,05 ИСфа 2,240,1 2,160,07 0,05 Исключение составляют значения брюшную полость, которая для крыс составляет 5 сывороточного иммуноглобулина класса М, мл. Выбор дозы препарата для инъекций был показавшие статистически достоверное нарастание определен согласно классификации, токсичности его концентрации (с 0,630,08 г/л до 0,980,07 г/л). химических веществ в соответствии с ГОСТ В результате проведенных исследований и был 12.1.007-76. Препарат вводился ежедневно установлен иммунокорригирующий эффект однократно внутрибрюшинно,при помощи препаратав условиях нормы. одноразовых шприцев, предварительно разведенный Возможно, в условиях патологии этот эффект физиологическим раствором. проявится более четко. В период эксперимента крысы были разделены Для исследования безопасности применения на контрольные и опытные группы. Опытных было лекарственного препаратачетыре группы, различные по дозам и срокам животным внутрибрюшинно в различных дозах в введения препарата. Препарат вводили животным неразведенном виде и с разведением в внутрибрюшинно с разведением в физиологическом физиологическом растворе. При подборе дозы растворе хлорида натрия, а также в неразведенном руководствовались рекомендациями о максимально виде. допустимых количествах жидкости, для введения в 7 1.Животным первой группы ежедневно внутрибрюшинно вводились по 0,06 мл препарата 3,0 мл физиологического раствора, что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 1,7 раза. Крысы забивались через 5, 10 и 15 дней после начала эксперимента. 2.Животным второй группы однократно вводили по 0,66 мл препарата 3,0 мл физиологического раствора, что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 11 раз, забой животных производили через 5 дней после начала введения. 3.Животным третьей группы однократно вводили по 2 мл препарата 3,0 мл физиологического раствора,что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 33 раза и забивали животных через 10 дней после начала эксперимента. 4.Животным четвертой группы однократно вводили 5 мл чистого препарата без разведения, что превышает рекомендуемую лечебную дозу в 83 раза, и забивали животных через 15 суток после начала эксперимента. Основные данные результатов анализа морфологического состава крови и лейкоцитарной формулы приводятся в таблице 3. Таблица 3 Морфологический состав крови экспериментальных животных Показатели 9 Как видно из таблицы 3, изучаемый препарат не вызвал статистически достоверных изменений со стороны форменных элементов крови экспериментальных животных, по сравнению с контрольными крысами,следовательно,исследуемый препарат не оказывал токсического воздействия на систему крови. Результаты гистологического исследования органов животных контрольной и опытной групп показали, что препаратне вызвал изменений гистологической структуры внутренних органов экспериментальных животных, что также указывает на нетоксичность изучаемого препарата. Таким образом, разработанный лекарственный препарата обладает антибактериальным,противоязвенным и иммуномодулирующим действием при малой токсичности и возможностью применения в инъекционной форме. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Лекарственный препарат, обладающий антибактериальным противоязвенным и иммуномодулирующим действием, содержащий йод,йодистый калий,крахмал,глюкозу, аскорбиновую кислоту,натрия хлорид и дистиллированную воду, отличающийся тем, что содержит компоненты при следующем соотношении(мас.) Йод 0,4-2,0 Йодид калия 0,8-4,0 Крахмал 10,0-40,0 Кислота аскорбиновая 0,4-2,0 Глюкоза 1,2-4,8 Хлорид натрия 0,3-1,8 Вода очищенная остальное. 2. Лекарственный препарат по п.1,отличающийся тем, что предназначен для внутривенного,внутримышечного или перорального введения пациенту в фармацевтически эффективном количестве. 3. Применение лекарственного препарата по пп.1-2 для лечения зараженных вирусными и бактериальными инфекциями млекопитающих,включая человека. 4. Применение лекарственного препарата по п.1 для лечения язвенной болезни млекопитающих,включая человека. 5. Применение лекарственного препарата по п.1 для повышения иммунитета млекопитающих,включая человека.