Способ получения экстракта из почек тополя бальзамического, обладающего ростостимулирующей активностью

(51) 01 65/00 (2011.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ постоянной,стабильной ростостимулирующей активностью, и может быть использовано в сельском хозяйстве для повышения урожайности культурных растений. В составе масла почек тополя определены компоненты (насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты) ответственные за ростостимулирующую активность препарата, определен химический состав экстракта,обеспечивающий постоянную,стабильную ростостимулирующую активность и предложен способ получения препарата требуемого химического состава из почек тополя собранных в фазу пробуждения. Преимущество предлагаемого способа получения экстракта из почек тополя является постоянная,стабильная ростостимулирующая активность,и как следствие повышение продуктивности растениеводства.(72) Поляков Владилен Васильевич Лопухин Николай Степанович Бондаренко Римма Александровна(73) Товарищество с ограниченной ответственностью Научно-исследовательский институт сельскохозяйственных инновационных технологий(56) Предварительный патент РК 19397, кл. 61 36/00, 5, 15.05.2008(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭКСТРАКТА ИЗ ПОЧЕК ТОПОЛЯ БАЛЬЗАМИЧЕСКОГО,ОБЛАДАЮЩЕГО РОСТОСТИМУЛИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТЬЮ(57) Изобретение относится к области биологически активных соединений, а именно к получению экстракта из почек тополя,обладающего(апрель), высушивание на воздухе, экстракцию органическим растворителем,фильтрацию и упаривание до получения целевого продукта. Для получения предлагаемого экстракта почки тополя бальзамического высушивают на воздухе и экстрагируют растворителем в течение 6 часов. Затем экстракт упаривают на водяной бане при 50 С до сиропообразного состояния и затем под вакуумом с помощью водоструйного насоса - до полного удаления растворителя. Поставленная цель достигается тем, что в составе экстракта из почек тополя бальзамического определены компоненты(насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты) ответственные за ростостимулирующую активность препарата,определен химический состав, обеспечивающий постоянную,стабильную ростостимулирующую активность и предложен способ получения экстракта требуемого химического состава из почек тополя,собранных в фазу пробуждения. Сущность изобретения поясняется следующим. С целью выявления причин непостоянства ростостимулирующей активности экстракта почек тополя бальзамического в соответствии с ГОСТ 1203884 (Семена сельскохозяйственных культур. Методы определения всхожести) был проведен эксперимент на семенах капусты белокочанной, сорт Подарок, по схеме (таблица 1) Вариант 1 - контрольный, замачивание семян в дистиллированной воде. Вариант 2 - замачивание семян в 0,05 водном растворе экстракта из почек тополя, собранных в фазу покоя (январь). Вариант 3 - замачивание семян в 0,05 водном растворе экстракта из почек тополя, собранных в фазу пробуждения (апрель). Таблица 1 Параметры показателей качества семян капусты белокочанной сорт Подарок Изобретение относится к области биологически активных соединений, а именно к получению экстракта из почек тополя, обладающего постоянной,стабильной ростостимулирующей активностью, и может быть использовано в сельском хозяйстве для повышения урожайности культурных растений. Известны вещества для регулирования роста растений путем предпосевной обработки семян органические кислоты (Смирнов В.А., Осадчая Л.И.1060163 А 15.12.83), салициловый натрий(Мансуров Н.Х., Набиев М.И.897194 А 15.01.82) щавелевокислый аммоний (Смирнов В.А., Ермоленко В.П.1119646 А 23.10.84), гибберелин (Меньшиков И.Н., Баскаков Ю.А. Химия гербицидов и стимуляторы роста растений.- М. Хим. литература,1962.- с.201-203). Однако известные вещества имеют низкую эффективность и высокую стоимость. Наиболее близким аналогом способа получения предлагаемого экстракта является способ получения экстракта из почек тополя бальзамического,обладающего противоопухолевой активностью,включающего сбор почек в фазу покоя, сушку почек на воздухе,экстракцию органическими растворителями с последующей фильтрацией и упариванием экстракта. (Предварительный патент РК 19397). Недостатком описанного экстракта является низкая ростостимулирующая активность. Задачей изобретения является создание способа получения экстракта из почек тополя бальзамического,обладающего стабильно высокой ростостимулирующей активностью. Способ получения предлагаемого экстракта из почек тополя бальзамического,обладающего ростостимулирующей активностью, включает сбор почек тополя бальзамического в фазу пробуждения Как видно из приведенных данных наблюдается значительная разница ростостимулирующей активности препаратов Варианта 2 и Варианта 3, то есть экстракт из почек, собранных в фазу покоя первоначально приводит даже к торможению развития растений о чем свидетельствует низкая энергия прорастания 42-45 в сравнении с контролем (54-60), и экстрактом из почек,собранных в фазу пробуждения (86-88). Принимая во внимание, что темпы роста и развития растительного организма непосредственно зависят от напряженности энергетического обмена,было прослежено изменение интенсивности дыхания капусты белокочанной в зависимости от различных условий (таблица 2). Вариант 1 - контрольный, посев семян замоченных в дистиллированной воде. Вариант 2 - посев семян замоченных в 0,05 водном растворе экстракта из почек тополя,собранных в фазу покоя. Вариант 3 - посев семян замоченных в 0,05 водном растворе экстракта из почек тополя,собранных в фазу пробуждения. Вариант 4 - контрольный, посев сухих семян. Вариант 5 - посев сухих семян и некорневая подкормка в онтогенезе 0,005 водным раствором экстракта из почек тополя, собранных в фазу покоя. Вариант 6 - посев сухих семян и некорневая подкормка в онтогенезе 0,005 водным раствором экстракта из почек тополя, собранных в фазу пробуждения. Таблица 2 Интенсивность дыхания капусты белокочанной в зависимости от различных условий Вариант Интенсивность дыхания растений, мг СО 2/1 г сухого вещества возраст - 30 дней возраст - 60 дней 1,0 1,2 2,7 0,5 0,3 0,8 0,4 1,9 1,7 Как видно из приведенных данных ростостимулирующая активность экстракта из почек тополя, собранных в фазу пробуждения в 2,7-5,7 раза выше контроля и в 2,3-4,3 раза выше активности экстракта из почек тополя, собранных в фазу покоя. С целью выявления химических компонент ответственных за повышение ростостимулирующей активности экстракта из почек тополя бальзамического было прослежено количественное и качественное изменение химического состава в онтогенезе за период ноябрь-апрель (таблица 3). Таблица 3 Изменение химического состава экстракта из почек тополя бальзамического в онтогенезе Карбоновые кислоты Жирные кислоты Полифенолы Углеводы Фенолглюкозиды Фенолокислоты Витамины Микроэлементы Как видно из приведенных данных, при переходе почек из фазы покоя в фазу пробуждения количество фенолглюзидов, фенолокислот, витамин и микроэлементов меняется незначительно,количество карбоновых кислот с 8,5 уменьшается до 2,5, полифенолов уменьшается с 32,6 до 6,8 и происходит только увеличение количества жирных кислот с 44,6 до 70,5 и углеводов с 9,6 до 16,6. Среднее значение содержания в Период сбора почек Фаза покоя Ноябрь- Фаза пробуждения Февраль Апрель 8,5 2,5 44,6 70,5 32,6 6,8 9,6 16,6 3,4 2,2 0,76 0,98 0,40 0,35 0,11 0,11 Учитывая огромную роль жирных кислот, в особенности ненасыщенных, в обменных реакциях,обеспечении роста и нормальных структурных функций было прослежено количественное и качественное содержание жирных кислот в составе масла почек тополя бальзамического в онтогенезе Таблица 4 Изменение содержания жирных кислот в составе масла почек тополя бальзамического в онтогенезе Среднее значение содержания в масле почек тополя,Период сбора почек Фаза покоя Фаза пробуждения Ноябрь-Февраль Апрель Летучие жирные кислоты Каприловая 1,17 отсутствует Нонановая 1,39 1,33 Ундекановая 22,23 отсутствует Лауриновая 6,27 2,59 Тридекановая 0,63 отсутствует Подитог 31,69 3,92 Насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты Миристиновая 0,17 3,08 Миристоолеиновая 0,09 отсутствует Маргиновая 2,05 отсутствует Пентадекановая отсутствует 0,77 Пальмитиновая 0,54 12,95 Гексадекандиеновая 0,47 отсутствует Стеариновая отсутствует 16,24 Олеиновая 0,29 15,47 Линолевая 0,24 3,43 Линоленовая 1,84 2,45 Париноровая 0,41 отсутствует Арахиновая отсутствует 1,96 Эйкозен-13 -овая 0,81 отсутствует Эйкозен-11,14-овая 4,52 отсутствует Арахидоновая 0,26 1,54 Генейкозановая 0,33 1,89 Эруковая 0,32 отсутствует Трикозановая 0,24 1,19 Трикозен-15-овая 0,24 2,59 Невроновая 0,08 2,52 Подитог 12,90 66,08 Итого 44,60 70,00 Как видно из приведенных данных содержание насыщенных и ненасыщенных жирных кислот при переходе почек от фазы покоя к фазе пробуждения увеличивается с 12,90 до 66,08, чем и объясняется высокая ростостимулирующая активность экстракта из почек тополя, собранных в фазу пробуждения. В таблице 5 приведен химический состав экстракта почек тополя, собранных в фазу пробуждения, по результатам исследований. Таблица 5 Химический состав экстракта почек тополя, собранных в фазу пробуждения (время сбора апрель,Северо-Казахстанская область) Наименование компонент Карбоновые кислоты в том числе Уксусная Гликолевая Пировиноградная Щавелевая Малоновая Наименование компонент Янтарная Глутаровая Адипиновая Щавелевоуксусная Салициловая Яблочная Кетоглутаровая Аконитовая Винная Лимонная и изолимонная Жирные кислоты в том числе Летучие жирные кислоты в том числе Нонановая Лауриновая Насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты в том числе Миристиновая Пентадекановая Пальмитиновая Стеариновая Олеиновая Линолевая Линоленовая Арахиновая Арахидоновая Генейкозановая Трикозановая Трикозен-15-овая Невроновая Полифенолы в том числе Апигенин Хризин Пиноцембрин Галангин Кемпферол Кверцетин Тектохризин Изорамнетин Генкванин Пиностробин Мироцетин Изальпинин Рамноцитрин Рамназин Углеводы Глюкоза Фруктоза Сахароза Рибоза Фенолгликозиды Салицин Популин Тремулоидин Саликортин Фенолокислоты Галловая Кофейная Феруловая Коричная Микроэлементы Цинк Марганец Медь Йод Экстракт из почек тополя, собранных в фазу пробуждения, вязкая прозрачная жидкость желтого цвета, растворима в спирте, ацетоне, эфире, с водой образует эмульсию. Плотность при 20 С 0,987 г/куб.см. Показатель преломления 1,521. Число омыления 310,9 йодное число 50,6. Качественный и количественный состав кислот определяли методом газожидкостной хроматографии в виде метиловых эфиров в следующих условиях хроматограф Цвет - 109,детектор пламенно-ионизационный, стеклянная колонка (3000,4 см), наполнитель целит 545 с 15 полиэтиленгликольсукцинатом. Скорость газаносителя азота 50 л/мин. Программирование температуры от 80-185 С. Карбоновые кислоты идентифицировали методом внутреннего стандарта(адипиновая кислота), для жирных кислот внутренним стандартом являлась пальмитиновая кислота, а также методом сравнения времени удерживания известных образцов. Анализ углеводов, полифенолов, фенолокислот, витаминов проведен методом тонкослойной хроматографии на пластинкахв различных системах растворителей с последующей обработкой реагентами и идентификацией. Количественный анализ микроэлементов проведен спектрофотометрическим методом на спектрофотометре-11. Эффективность изобретения подтверждена производственной апробацией предлагаемого экстракта при выращивании яровой пшеницы. Опыты проводились в течении 3 лет, с охватом площадей более 10000 га. Контроль - обработка семян препаратом Дивиденд-экстрим в дозе 0,4 л/тн, обработка посевов гербицидами в стадию кущения. Опыт - обработка семян препаратом Дивидендэкстрим в дозе 0,2 л/тн. совместно с экстрактом из почек тополя, собранных в фазу пробуждения, в дозе 0,150 л/тн, обработка посевов в стадию кущения - баковая смесь -гербицидэкстракт из почек тополя, собранных в фазу пробуждения, в дозе 0,030 л/га. В процессе работ на всех стадиях вегетации яровой пшеницы осуществлялся контроль параметров ответственных за продуктивность Таблица 6 Влияние обработки семян и посевов яровой пшеницы экстрактом из почек тополя бальзамического,собранных в фазу пробуждения, на показатели продуктивности. Параметры Дополнительная эффективность протравливания семян,Повышение лабораторной энергии прорастания семян,Повышение лабораторной всхожести,Параметры Повышение полевой всхожести,Увеличение числа продуктивных колосьев,Увеличение числа зерен в колосе,Увеличение массы зерен с колоса,Увеличение массы 1000 зерен,Снижение семян сорняков в зерне,Снижение фузариозных зерен,Повышение энергии прорастания выращенных семян,Повышение всхожести выращенных семян,Повышение массовой доли содержания клейковины,Дополнительная урожайность, ц/га ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения экстракта из почек тополя бальзамического, включающий сушку почек тополя бальзамического на воздухе,экстракцию органическими растворителями с последующей фильтрацией и упариванием экстракта,отличающийся тем, что используют почки тополя бальзамического, собранные в фазу пробуждения.