Применение эфирного масла почек тополя бальзамического в качестве радиопротекторного средства.

(51) 61 36/76 (2009.01) 61 43/00 (2009.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(57) Изобретение относится к области медицины, а именно к радиологии применение эфирного масла почек тополя бальзамического в качестве радиопротектора, защищающего живой организм от вредного воздействия радиации в дозе 200-300 рентген. Определен состав эфирного масла почек тополя бальзамического, найдены компоненты ответственные за антиоксидантную и иммуностимулирующую активности препарата,опытным путем подтверждена эффективность защиты живого организма от вредного воздействия радиации. Преимуществами предлагаемого радиопротекторного средства являются эффективность, простота применения, отсутствие вредных побочных явлений.(72) Поляков Владилен Васильевич Лопухин Николай Степанович Бондаренко Римма Александровна(73) Товарищество с ограниченной ответственностью Научно-исследовательский институт сельскохозяйственных инновационных технологий(56) Предварительный патент РК 20194, кл. А 61 36/00, А 61 135/00, А 61 Р 43/00, 01 11/00, 2008(54) ПРИМЕНЕНИЕ ЭФИРНОГО МАСЛА ПОЧЕК ТОПОЛЯ БАЛЬЗАМИЧЕСКОГО В КАЧЕСТВЕ РАДИОПРОТЕКТОРНОГО СРЕДСТВА Изобретение относится к области медицины, а именно к радиологии применение эфирного масла почек тополя бальзамического в качестве радиопротектора. Известно,что поражающее действие ионизирующей радиации может быть в значительной степени ослаблено путем различных противолучевых средств, проблема поиска которых продолжает оставаться актуальной (Кудряшов Ю.Б.,Гончаренко Е.Н. Современные проблемы противолучевой химической защиты организмов. Радиацион. биол. радиоэкол. 1992.-39, 2-3,с. 197-211). Стимулятор репаративных процессов организма Этаден повышает выживаемость животных,облученных в условиях экранирования у них части костного мозга, доза облучения 500-600 рентген(А.с.1359938 А, Стимулятор репаративных процессов организма Русаков,Г.С. Новоселова, Г.А. Смирнова, А.В. Ельцов,Х.Л. Александр. Бюл. 24 30.06.88). Недостатком являются вредные побочные явления. Известно применение препарата Тополин(спиртовой экстракт почек тополя бальзамического) в качестве радиопротектора./Предварительный патент РК 20194 от 04.01.2007 Поляков В.В.,Подгорная С.И.),недостатком является встречающаяся аллергенность препарата. Задача изобретения предложение неаллергенного, без вредных побочных явлений радиопротекторного средства. Предлагаемое эфирное масло почек тополя бальзамического представляет собой подвижную жидкость желтого цвета с бальзамическим запахом,горьковатого вкуса со следующими константами Р 200,76 г/см 3, 20 1,3715, к.ч. 2,01-10,5 эф.ч. 8,0214,1 масло растворимо в 90 спирте, бензоле,ацетоне плохо растворимо в 70 и 80 спирте. Нами исследован компонентный состав эфирного масла почек тополя бальзамического методом газожидкостной хроматографии в сочетании с массспектрометрией и идентифицировано 36 компонентов. Химический состав эфирного масла почек тополя бальзамического и биологические активности проявляемые компонентами, приведены в таблице 1. Таблица 1 Монотерпены 2 Цис-пинокарвон Монотерпенолы 3 Линалоол 4 Транс-р-мент-2-ен-ол 5 Сабинол Эфиры 6 3-метил-3-бутенилизовалерат 7 3-метил-3 -бутенилвалерат 8 3 -метил-2-бутенилвалерат 9 Бензилвалерат 10 2-фенилэтилбутират 11 2-фенилэтилизовалерат 12 Фарнезилацетат Эфиры ряда фенола 13 Метилкарвакрол 14 Эвгенолацетат 15 Метилтимол 16 Изоанетол Сесквитерпенолы 17 Основные биологические активности необходимые для проявления радиопротекторных свойств эфирного масла почек тополяБиологическая активность иммуностимулирующая,противовоспалительная,бактерицидная,антиинфекционная,противовирусная,спазмолитическая Более половины компонентов эфирного масла почек тополя бальзамического обладают антиоксидантной и иммуностимулирующей биологическими активностями, чем объясняется эффективные радиопротекторные свойства. Опыты по подтверждению радиопротекторных свойств эфирного масла почек тополя бальзамического проводились на подопытных мышах-альбиносах, самцах, массой от 20,5-27,4 г(30 животных) подвергшихся облучению в дозе 200300 рентген за 152 и 228 секунд соответственно, на аппарате Агат-с, в качестве радиоактивного элемента в установке используется кобальт-60. Пример 1. Экспериментальные животные разбиты на три группы 1 группа - мыши, получавшие кормовую добавку эфирного масла почек тополя бальзамического и облученные в дозе 200 рентген Группа особей 1 2 3 за 14 суток до облучения 21,3 21,6 20,9 2 группа - мыши, облученные в дозе 200 рентген 3 группа - мыши контрольные. Эфирное масло почек тополя бальзамического(собранных в фазу покоя) вводили перорально в виде кормовой добавки первой группе, в дозе 0,0002 мг/кг в сутки, ежедневно на протяжении 14 суток до облучения и 7 суток после облучения. Все животные содержались в виварии на обычном рационе. Во второй группе через 7 суток после облучения у всех животных отчетливо проявлялись отклонения в поведении, нарушился аппетит,шерсть выглядела свалявшейся, в течение эксперимента погибло 2 особи. У животных первой и третьей групп, видимых изменений не наблюдалось. Проведено определение массы животных до облучения и после облучения данные приведены в таблице 3. Таблица 3 Средняя масса 1 особи, г в день облучения через 7 суток после облучения 23,4 23,6 23,2 20,5 23,1 23,9 В полученных данных наглядно отрицательное действие радиации на подопытных животных. Так во второй группе, подвергшейся облучению,средняя масса мышей снизилась с 23,2 г. до 20,5 г. С другой стороны, в первой и третьей группах масса животных продолжала увеличиваться. Степень радиационного поражения оценивали по наиболее надежному в радиологии критерию основным клиническим показателям крови(количество лейкоцитов и эритроцитов) по общепринятым методикам. Исследования содержания лейкоцитов периферической крови животных проводили двукратно, до облучения, на основании чего определяли исходный уровень лейкоцитов,принимали за 100, и течение 14 дней после облучения с интервалом 7 суток. Кровь забирали в меланжеры для белой крови их хвостовых вен. Определение общего числа лейкоцитов проводили в камере Горяева, а дифференцированный подсчет лейкоцитов проводили в мазках периферической крови. На каждом мазке считали по 200 клеток, затем определяли их процентное соотношение, а так же вычисляли абсолютное количество клеток каждого Среднее количество лейкоцитов 1 мм 3 крови 6,110-9 3,910-9 6,010-9 Результаты анализа крови мышей, явно подтверждают количественное уменьшение лейкоцитов в крови облученных животных второй группы на 32 по сравнению с количеством лейкоцитов до облучения. При этом количество лейкоцитов в крови мышей получавших эфирное масло почек тополя бальзамического, осталось практически неизменным. Содержание эритроцитов,гемоглобина,тромбоцитов в 1 мм 3 крови приведено в таблице 5. Очевидно уменьшение форменных элементов крови облученных животных второй группы. При этом количество эритроцитов,гемоглобина,тромбоцитов в крови мышей получавших эфирное масло почек тополя бальзамического, осталось практически неизменным. Пример 2. Мышей подвергали облучению в дозе 300 рентген. Группа особей 1 2 3 за 14 суток до облучения 21,8 22,0 23,2 Во второй группе через 7 суток после облучения у всех животных отчетливо проявлялись отклонения в поведении, нарушился аппетит,шерсть выглядела свалявшейся, в течение эксперимента погибло 2 особи. У животных первой и третьей групп, видимых изменений не наблюдалось. Проведено определение массы животных до облучения и после облучения данные приведены в таблице 6. Таблица 6 Средняя масса 1 особи, г в день облучения через 7 суток после облучения 23,9 24,0 24,0 20,3 24,6 25,3 В полученных данных наглядно отрицательное действие радиации на подопытных животных. Во второй группе, подвергшейся облучению, средняя масса мышей снизилась с 24,0 г. до 20,3 г., а в первой и третьей группах масса животных продолжала увеличиваться. Степень радиационного поражения оценивали по наиболее надежному в радиологии критерию основным клиническим показателям крови(количество лейкоцитов и эритроцитов) по общепринятым методикам, аналогично примеру 1. Содержание лейкоцитов в 1 мм 3 крови приведено в таблице 7. Таблица 7 Среднее крови количество лейкоцитов 1 мм 3 5,910-9 3,110-9 6,110-9 Результаты анализа крови мышей, явно подтверждают количественное уменьшение лейкоцитов в крови облученных животных второй группы на 32 по сравнению с количеством лейкоцитов до облучения. При этом количество лейкоцитов в крови мьппей получавших эфирное масло почек тополя бальзамического, осталось практически неизменным. Содержание эритроцитов,гемоглобина,тромбоцитов в 1 мм 3 крови приведено в таблице 8. Таблица 8 Очевидно уменьшение форменных элементов крови облученных животных второй группы. При этом количество эритроцитов,гемоглобина,тромбоцитов в крови мышей получавших эфирное масло почек тополя бальзамического, осталось практически неизменным. Аллергенность эфирного масла тополя изучалась методом непрямой дегрануляции тучных клеток крыс. Испытания проводили на здоровых белых лабораторных крысах самцах массой 200 - 250 г. Метод основан на способности тучных клеток к выбросу гранул гистамина при введении аллергена. Оценка результатов осуществлялась после подсчета показателя дегрануляции тучных клеток (ПДТК) по формуле ПДТК(1 а 16 с 1 д)/100 где а, б, с,д - количество (среднее из трех повторений) дегранулированных тучных клеток соответственно степени дегрануляции, а - количество клеток со слабо выраженной дегрануляцией, б - с умеренно выраженной, с - с резко выраженной ид-полностью дегранулированные клетки). Для более достоверной оценки проводили три опыта. Во всех трех опытах ПДТК не превышает 2,5. 1-й опыт ПДТК 2,08. 2-й опыт ПДТК 2,13. 3-й опыт ПДТК 1,91. Таким образом, можно констатировать, что эфирное масло не является аллергенным. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Применение эфирного масла почек тополя бальзамического, собранных в фазу покоя, в качестве радиопротекторного средства.