Штамм протозоа trypanosoma equiperdum p-0002, используемый для изготовления гипериммунной сыворотки

(51) 12 1/20 (2006.01) 01 33/49 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ПОЛЕЗНОЙ МОДЕЛИ К ПАТЕНТУ изготовления гипериммунной сыворотки,применяемого для серологической диагностики трипаносомоза лошадей. Технический результат,обеспечиваемый полезной моделью, выражается в выделения высокоактивного и стабильного антигена для получения специфической гипериммунной сыворотки при диагностике в ИФА трипаносомоза лошадей. Штамм протозоаР-0002 депонирован в ТОО Казахский научно исследовательский ветеринарный институт(КазНИВИ), используемый для изготовления гипериммунной сыворотки для серологической диагностики трипаносомоза лошадей.(72) Шалабаев Болат Абуович Кадыров Серикбай Оразбаевич Бердахметызы Слиа(73) Товарищество с ограниченной ответственностью Казахский научноисследовательский ветеринарный институт(54) ШТАММ ПРОТОЗОА-0002, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ(57) Полезная модель относится к области ветеринарии,в частности ветеринарной иммунологии и может быть использовано для Полезная модель относится к области ветеринарии,в частности ветеринарной иммунологии и может быть использовано для изготовления гипериммунной сыворотки,применяемого для серологической диагностики трипаносомоза животных. Известен штамм,используемый для изготовления трипаносомного антигена при серологической диагностике лошадей Патент Российской Федераций 2327169, 01 33/531 (2006.01), 2008. Недостаткам данного штаммаявляется его невысокая специфическая активность при серологической диагностике лошадей. Задачей изобретения является получения штамма,пригодного для изготовлении специфической гипериммунной сыворотки при диагностике в ИФА трипаносомоза животных. Технический результат,обеспечиваемый полезной моделью, выражается в выделения высокоактивного и стабильного антигена для получения специфической гипериммунной сыворотки при диагностике в ИФА трипаносомоза лошадей. Гипериммунизация(гипериммунизация) повторная иммунизация,обеспечивающая длительное поддержание в организме высокого титра антител к соответствующему антигену Гипериммунизация животных используется,например,для получения диагностических сывороток. Сыворотка гипериммунная ( ) содержащая антитела в более высоких титрах, чем обычная иммунная сыворотка, что достигается повторной иммунизацией животного-донора. Штамм протозоаР-0002 депонирован в ТОО Казахский научно исследовательский ветеринарный институт(КазНИВИ), используемый для приготовления гипериммунной сыворотки для серологической диагностики трипаносомоза лошадей. Идентификацию штамма протозоа проводят по основным культурально - морфологическим,биохимическим и антигенным свойствам, согласно определителю И.И.Казанский Паразитические простейшие Казахстана, Алма-Ата, 1951, с. 12-42 М.В.Крылов Определитель паразитарных простейших, Санкт-Петербург, 1996, с.44-49 Жизнь животных (под ред. Л.А.Зенковича), М.,1968, т.1, с. 107-109 Многофункциональные взаимоотношения паразита и хозяина при су-ауру и случной болезни животных, В.Г.Меньшиков,автореф. док. дисс. М., 1999, с.34. Селекция штамма. Штамм Р-0002 выделен из содержимого уретры самцы осла,больного случной болезнью,принадлежавшего с. Райымбек Карасайского района Алматинской области. Штамм получен путем направленного отбора. От больного случной болезнью жеребца были взяты уретральные соскобы, при микроскопическом исследовании в них обнаружены трипаносомы. Суспензией,2 приготовленной из уретральной слизи и физиологического раствора, интратестику-лярно инвазировали кролика. Тестикулярный секрет кролика является биологической средой, где после инокуляции материала, выделенного, от больной лошади размножается. После ряда пассажей через тестикулы кролика возбудитель случной болезни размножается в брюшной полости, подкожной клетчатке и в конъюнктиве кроликов, а также в крови лабораторных животных. Через 10-14 суток после интратестикулярного размножениянаблюдался выраженный отек тестикул кролика. При проколе тестикул из них обильно выделялся жидкость, в которой при микроскопии обнаруживались трипаносомы в количестве 5-10 паразитов в 100 полях зрения микроскопа. Полученным пунктатом инвазировали белых мышей. Штамм типовой вирулентный,адаптированный на лабораторных животных,предназначенный для приготовления диагностических препаратов. Изолят 84 был условно обозначен штаммом Р-0002, который депонирован в коллекции культур микроорганизмов ТОО Научноисследовательский ветеринарный институт. Штамм характеризуется следующими признаками, которыми обладаетР-0002. Морфологические признаки. Штамм Р-0002 обладает морфологическими признаками, характерными для возбудителя трипаносомоза животных. Окраска по Грамму отрицательная. Культуральные свойства. Р-0002 имеет тело веретенообразной формы, концы его сужены, передний более застроен. Вдоль тела трипаносомы продолжается жгутик, соединяющийся с ним ундулирующей мембраной. Мембраны ядерной оболочки имеют характерную трехслойную структуру,гликопротеины с молекулярной массой 65000. Размеры тела 11,9-26,1 мкм, размеры жгутика 5,53 до 6,67, ширина 1,8 мкм, цвет серый. Обладает активным поступательным движением. Применее 5,5, трипаносома неустойчива, деление клеток - бесполое продольное. Специализированные клетки не образует, при максимальной паразитемии количество их доходит от 200 до 300 трипаносом в поле зрения микроскопа. Биохимические свойства. Штамм Р-0002,штамм вирулентный,адаптированный на лабораторных животных,предназначен для приготовления диагностических препаратов. Култивирование(на белых мышах) позволяет сохранить высокую вирулентность штамма,что обеспечивает максимальную паразитарную реакцию (до 300 и выше трипаносом в поле зрения микроскопа). Штамм не культивируется на питательных средах,культурах клеток и эмбрионах. Для трипаносомы характерны паразитизм,аэробное дыхание и осмотическое питание(сапрофитное). Антигенные свойства. Отличительной особенностью является наличие большого числа(более 100) различных поверхностных антигенов и основных типов, наличие типоспецифических экзоантигенов. Титры антител в РСК И РДСК составляют предельный титр 1200, рабочий титр 140. Маркерные признаки. Вариабельность антигенной структуры. Штамм трипаносом имеет 8 мажорных полипептидов с молекулярной массой 36,44, 47, 50, 54, 71, 86, 92 кДа, из которых суперможорные с м.м. 44, 54 и 71 кДа. Патогенные свойства. ШтаммР-0002 КазНИВИ патогенен для сельскохозяйственных и лабораторных животных(лошадей, ослов, мулов, лошаков, собак, белых мышей и крыс, морских свинок, кроликов). Иммуногенность. Нет. Реактогенность. ШтаммР-0002 слабореактогенен для лошадей при внутримышечном введении. Спорообразование. Специализированные клетки не образуются. Реверсабельность и реактогенность. Штамм не отличается от эпизоотических изолятов, обладает высокой активностью при подкожном введении. Стабильность свойств при пассировании. Основные биологические свойства, в том числе патогенные и вирулентные, штаммаР-0002 стабильно сохраняются. Использование штаммаР-0002 для приготовления гипериммунной сыворотки для серологических исследований позволит надежно диагностировать латентные формы заболевания трипаносомозом лошадей на основе ИФА. ФОРМУЛА ПОЛЕЗНОЙ МОДЕЛИ Штамм протозоа-0002,депонирован в Товариществе с ограниченной ответственностью Казахский научно-исследовательский ветеринарный институт под номером 84, используемый для изготовления гипериммунной сыворотки.