Способ определения зараженности семян овощных культур фитопатогенными бактериями

(51) 01 1/00 (2011.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ овощных культур, завозимых в республику из других стран. Задачей изобретения является разработка быстрого и точного способа выявления зараженности семян овощных культур фитопатогенными бактериями, приемлемый в производственных условиях, и выбрать правильный прием для их обеззараживания. Предлагаемое изобретение позволит выявить зараженность семян овощных культур бактериальной инфекцией, выбрать приемлемый прием их обеззараживания и предотвратить потери от болезней. Способ может быть использован и в семеноводстве для определения зараженности семян фитопатогенными бактериями и при фитоэкспертизе завозимых в республику семян из других стран.(72) Джаймурзина Алия Абдрахимовна Сагитов Абай Оразович Есжанов Тынышбек Карлыбаевич Копжасаров Бакыт Кенжекожаевич(73) Товарищество с ограниченной ответственностью Казахский научноисследовательский институт защиты и карантина растений(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЗАРАЖЕННОСТИ СЕМЯН ОВОЩНЫХ КУЛЬТУР ФИТОПАТОГЕННЫМИ БАКТЕРИЯМИ(57) Изобретение относится к области сельскохозяйственного производства, а именно к защите растений и может быть использовано в семеноводстве, а также при фитоэкспертизе семян Изобретение относится к области сельскохозяйственного производства, а именно к защите растений и может быть использовано в семеноводстве, а также при фитоэкспертизе семян овощных культур, завозимых в республику из других стран. Известен способ определения зараженности семян овощных культур грибной и бактериальной инфекцией центрифугированием. Для этого отбирают две пробы по 100 семян в пробирки,заливают в них по 100 мл воды, взбалтывают 5 минут, промывную воду сливают в центрифужные пробирки и центрифугируют 3 мин, затем промывную жидкость сливают, а капли осадка просматривают под микроскопом. (Н.А. Наумова Анализ семян на грибную и бактериальную инфекцию 1970, с 28-29). Недостатком данного способа является установление зараженности семян грибами и бактериями только на поверхности, где могут находиться сапрофитные (непатогенные) бактерии,что может привести к ошибочной диагностике. Внутренняя инфекция не выявляется. Известен способ определения зараженности семян овощных культур бактериальной инфекцией визуально по симптомам. Семена после поверхностной стерилизации помещают на увлажненную фильтровальную бумагу и выдерживают в термостате при 22 в течение 4 дней с последующим анализом их инфицированности по симптомам на поверхности семян(М.И. Илюхина,Ю.И. Шнейдер Бактериальные болезни зерна пшеницы и их диагностика, 1990, с 13). Недостатком данного способа является то, что стерилизация поверхностной микрофлоры уничтожает и патогенные бактерии. На некоторых партиях семян патогенные бактерии могут находиться только на поверхности, не проникая внутрь. Симптомы на поверхности семян может вызывать и грибная микрофлора. Известен способ определения зараженности семян овощных культур бактериальной инфекцией путем тщательного ополаскивания 96 спиртом,затем заливают 2 раствором гипохлорита натрия,перемешивают в течение 2-3 минут и промывают 4 раза стерильной водой (каждый раз) в течение 1 мин). После этого семена помещают в стерильные чашки Петри (в полуоткрытые) с шестью или семислойной фильтровальной бумагой и сушат в стерильной камере в течение 12-24 часа. Простерилизованные таким образом семена проращивают в стерильных чашках Петр с питательной средой (картофельный агар), которая является провокационным фоном для проявления внутренней инфекции семян. Чашки Петри выдерживают при комнатной температуре в течение 7 суток, ежедневно их просматривают и подсчитывают количество больных и здоровых семян. Наличие бактериальной инфекции уточняют микроскопическим просмотром ( Лазарев, Г.А. Быква Методические рекомендации по изучению бактериальных болезней томата и меры борьбы с ними Санкт-Петербург, 2003, с. 24-25). Недостатком известного способа является то, что он трудоемок и требует длительного времени. Поверхностная стерилизация уничтожает патогенные бактерии. На некоторых партиях семян бактериальная инфекция может находиться на поверхности,не проникая внутрь семян. Обнаруженные бактерии при микроскопическом просмотре могут оказаться сапрофитными(непатогенными) видами. Для точной диагностики необходимо провести бактериологический анализ по выделению бактерий в чистую культуру и проверку их патогенности. Наиболее близким по технической сущности к заявляемому способу является способ определения зараженности семян, заключающий в помещении семян на увлажненную фильтровальную бумагу и выдерживание при температуре 27-32 С в течение 5-7 суток, анализ степени инфицированности семян,проводят не только на семенных, но и на поросших корнях (В.В. Котляров, А.А. Дьяченко, Д.В. Котляров. Способ определения степени инфицированности семян зерновых колосовых культур фитопатогенными бактериями,. Патент 2283560 МПК 01 1/00, 2006). Недостатком известного способа являются длительность анализов выдерживание семян на увлажненной фильтровальной бумаге провоцирует и накопление патогенных грибов, которые могут вызвать аналогичные симптомы. Для точной диагностики необходимы бактериологические анализы по выделению бактерии в чистую культуру и проверку их патогенности. Достоверно определить степень зараженности семян невозможно, так как длительное содержание семян в благоприятных для размножения бактерий условиях способствует накоплению инфекции и более сильной степени их инфицированности. Достаточно установить только зараженность семян бактериальной инфекцией. При благоприятных для развития болезни погодных условиях, имеющаяся в семенах инфекция, быстро размножится и вызовет вспышку бактериоза. Задачей изобретения является разработка быстрого и упрощенного способа определения зараженности семян овощных культур фитопатогенными бактериями,и выбрать правильный прием их обеззараживания. Технический результат. В разработанном способе определения зараженности семян фитопатогенными бактериями, семена выдерживают в увлажненных условиях 1-2 суток при 25-30 и по реакции сверхчувствительности на индикаторном растений - комнатной герани, устанавливают их зараженность. Способ осуществляется следующим образом. Для анализа использовали семена томата, капусты,лука и огурца по 5 гр., на которых заранее было установлено наличие бактериальной инфекции. Семена замачивали на 2 часа в воде, затем помещали на увлажненную фильтровальную бумагу и выдерживали в термостате при 28 одни сутки. В результате создания благоприятных условий для размножения бактерий количество их за этот период возрастает, затем семена растирали в фарфоровых ступках и добавляли воды 11, процеживали через марлю. Полученную суспензию вводили медицинским шприцом в межклеточное пространство (под эпидермис) с нижней стороны листа индикаторного растения комнатной герани. Через 1-2 суток на листьях в местах введения суспензии образовались некротические, пятна (виде пергамента). Это реакция сверхчувствительности индикаторного растения на патогенные виды бактерий. Непатогенные бактерий не вызывают такую реакцию (некроз), даже при введении высоких концентраций. Предлагаемый способ имеет ряд преимуществ перед известными способами. 1. Быстрое и точное определение зараженности семян фитопатогенными бактериями. 2. Снимается необходимость проведения поверхностной стерилизации семян. 3. Снимается необходимость проведения трудоемких и длительных бактериологических анализов. 4. Позволяет правильно выбрать прием обеззараживания семян от бактериальной инфекции. 5. Быстрая и точная фитоэкспертиза семян овощных культур, завозимых в республику из других стран на зараженность фитопатогенными бактериями. 6. Культивирование индикаторного растения в комнатных условиях круглый год. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ определения зараженности семян овощных культур фитопатогенными бактериями,включающий помещение семян на увлажненную фильтровальную бумагу, отличающийся тем, что семена инкубируются в термостате 1-2 суток при 25-300 С, оценку зараженности их фитопатогенными бактериями определяют путем инокуляции индикаторного растения - комнатной герани