Способ получения вакцины против диктиокаулеза овец

(51) 61 39/00 (2010.01) 61 37/00 (2010.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ раствором, встряхивание полученной смеси в шуттель-аппарате, помещение смеси в холодильник,центрифугирование смеси, удаление осадка и использование надосадочной жидкости в качестве целевого продукта, отмывание половозрелых форм диктиокаул проводят физиологическим раствором,добавляют в него пенницилин 250 тыс. ЕД, после чего диктиокаулы шуттелируют по 5 минут в течение 8 часов, с перерывом каждые 55 минут,затем диктиокаулы подвергают центрифугированию при 7000 об/мин в течение 10 минут, осадок удаляют, а к надосадочной жидкости добавляют этиловый спирт 96,8 в соотношении 32 соответственно, полученную смесь встряхивают беспрерывно на шуттель-аппарате в течение 20 мин,выдерживают при температуре -5 С в течение 2 часов, затем вновь центрифугируют при 5000 об/мин в течение 10 минут, после чего осадок удаляют,а к супернатанту добавляют физиологический раствор в соотношении 13 соответственно и подвергают воздействию ультразвуком с частотой 22 кГц и интенсивностью 100 вт/см 2 в течение 20 минут, после чего полученный целевой продукт консервируют в 0,2 растворе пропионовой кислоты и лиофилизируют.(72) Аманжол Рафилбек Аманжоллы Сулейменов Маратбек Жаксыбекович Тулеуханов Али(73) Товарищество с ограниченной ответственностью Казахский научноисследовательский ветеринарный институт(56) Шихобалова Н.П. Вопросы иммунитета при гельминтозах. М.-Л. Издательство АН СССР, 1950,с. 118-119(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ДИКТИОКАУЛЕЗА ОВЕЦ(57) Изобретение относится к области ветеринарной гельминтологии, а именно к изготовлению вакцины для специфической профилактики диктиокаулеза овец. Технический результат,обеспечиваемый изобретением,выражается в повышении иммуногенности и устранении токсичности. Способ получения вакцины против диктиокаулеза овец включает отмывание половозрелых диктиокаул физиологическим раствором, высушивание диктиокаул в термостате,растирание диктиокаул в тонкий порошок,разведение полученного порошка физиологическим 25243 Изобретение относится к области ветеринарной гельминтологии, а именно к изготовлению вакцины для специфической профилактики диктиокаулеза овец. Известен способ получения вакцины против диктиокаулеза овец, включающий отмывание половозрелых диктиокаул физиологическим раствором, высушивание диктиокаул в термостате,растирание диктиокаул в тонкий порошок,разведение полученного порошка физиологическим раствором,встряхивание полученной смеси в шуттель-аппарате, помещение смеси в холодильник, центрифугирование смеси,удаление осадка и использование надосадочной жидкости в качестве целевого продукта(Шихобалова Н.П. Вопросы иммунитета при гельминтозах. - М. - Л. Издательство АН СССР,1950.-. 118- 119). Недостатком данного способа является, что антиген обладает токсическими, гемолитическими свойствами и не высокой специфичностью. Задачей изобретения является создание вакцины против диктиокаулеза овец, обеспечивающей высокую профилактическую эффективность и повышенную иммуногенность. Технический результат,обеспечиваемый изобретением,выражается в повышении иммуногенности и устранении токсичности. Способ получения вакцины против диктиокаулеза овец, включающий отмывание половозрелых диктиокаул физиологическим раствором, высушивание диктиокаул в термостате,растирание диктиокаул в тонкий порошок,разведение полученного порошка физиологическим раствором, встряхивание полученной смеси в шуттель-аппарате, помещение смеси в холодильник,центрифугирование смеси, удаление осадка и использование надосадочной жидкости в качестве целевого продукта, отмывание половозрелых форм диктиокаул проводят физиологическим раствором, добавляют в него пенницилин 250 тыс. ЕД, после чего диктиокаулы шуттелируют по 5 минут в течение 8 часов, с перерывом каждые 55 минут,затем диктиокаулы подвергают центрифугированию при 7000 об/мин в течение 10 минут, осадок удаляют, а к надосадочной жидкости добавляют этиловый спирт 96,8 в соотношении 32 соответственно, полученную смесь встряхивают беспрерывно на шуттель-аппарате в течение 20 мин,выдерживают при температуре -5 С в течение 2 часов, затем вновь центрифугируют при 5000 об/мин в течение 10 минут, после чего осадок удаляют,а к супернатанту добавляют физиологический раствор в соотношении 13 соответственно и подвергают воздействию ультразвуком с частотой 22 кГц и интенсивностью 100 вт/см 2 в течение 20 минут, после чего полученный целевой продукт консервируют в 0,2 растворе пропионовои кислоты и лиофилизируют. Изобретение осуществляется следующим образом. Пример 1. Живые половозрелые формы диктиокаул в количестве 70-80 экземпляров 2 отмывают 5-6 раз стерильным физиологическим раствором и помещают в стерильный 0,85 раствор хлористого натрия, затем в них добавляют 250 тыс. ЕД пенициллина. Посуду с диктиокаулами шуттелируют по пять минут в течение 8 часов, с перерывом каждые 55 минут, при этом визуально контролируют жизнеспособность гельминтов, затем оставляют на 10 часов при температуре 18 С,подвергают центрифугированию при 7000 об/мин в течение 10 минут. Осадок удаляют, а к надосадочной жидкости добавляют охлажденный этиловый спирт 96,8 в соотношении 32 соответственно. Полученную смесь шуттелируют беспрерывно в течение 20 минут. Затем выдерживают при температуре -5 С в течение 2 часов, затем вновь центрифугируют при 5000 об/мин в течение 10 мин., осадок удаляют, а к супернатанту добавляют физиологический раствор в соотношении 13 соответственно и подвергают воздействию ультразвуком с частотой 22 кгц и мощностью 100 вт/см 2 в течение 20 мин. Полученный после озвучивания целевой продукт консервируют в 0,2 растворе пропионовой кислоты и лиофилизируют. Пример 2. Иммуногенность вакцины контролируют реакцией ИФА (иммуноферментный анализ) по титру антител в сыворотке крови экспериментальных животных. Титр антител считают удовлетворительным при положительных результатах ИФА при разведении антигена 1640 и сыворотки 1800. Напряженность иммунитета проверяют экспериментальным заражением иммунизированных животных. Полученную вакцину вводят подкожно в безшерстную область в дозе 1,0 см 3 на голову животных. Иммунизируют ягнят за 1-1,5 месяца до выгона на пастбища. Иммунитет у привитых животных образуется не позже 21-25 дня после вакцинации. Продолжительность иммунитета не менее года. Полученная вакцина обладает повышенной иммуногенностью, нереактогенна и проявляет высокую профилактическую эффективность против диктиокаулеза овец. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения вакцины против диктиокаулеза овец, включающий отмывание половозрелых диктиокаул физиологическим раствором, высушивание диктиокаул в термостате,растирание диктиокаул в тонкий порошок,разведение полученного порошка физиологическим раствором, встряхивание полученной смеси в шуттель-аппарте, помещение смеси в холодильник,центрифугирование смеси, удаление осадка и использование надосадочной жидкости в качестве целевого продукта, отличающийся тем, что отмывание половозрелых форм диктиокаул проводят физиологическим раствором, добавляют в него пенициллин 250 тыс. ЕД, после чего диктиокаулы шуттелируют по 5 минутв течение 8 25243 часов, с перерывом каждые 55 минут, затем диктиокаулы подвергают центрифугированию при 7000 об/мин в течение 10 минут, осадок удаляют, а к надосадочной жидкости добавляют этиловый спирт 96,8 в соотношении 32 соответственно,полученную смесь встряхивают беспрерывно на шуттель-аппарете в течение 20 мин, выдерживают при температуре -5 С в течение 2 часов, затем вновь центрифугируют при 5000 об/мин в течение 10 минут, после чего осадок удаляют, а к супернатанту добавляют физиологический раствор в соотношении 13 соответственно и подвергают воздействию ультразвуком с частотой 22 кГц и интенсивностью 100 вт/см 2 в течение 20 минут, после чего полученный целевой продукт консервируют в 0,2 растворе пропионовой кислоты и лиофилизируют.