Способ использования уровня фактора некроза опухоли -а (ФНО-а)у лиц казахской популяции как суррогатного неинвазивного маркера фиброза печени при вирусном гепатите С.

(51) 01 33/53 (2006.01) 01 33/576 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ ФИБРОЗА ПЕЧЕНИ ПРИ ВИРУСНОМ ГЕПАТИТЕ С.(57) Изобретение относится к области медицины,в частности терапии, гепатологии, инфекционных болезней и касается использования ФНО-а для диагностики фиброза печени при вирусном гепатите С в казахской популяции, а также установления тяжести поражения печени, коррелируемой с активностью ФНО-а. Способ осуществляется путем измерения содержания ФНО-а в сыворотке крови методом ИФА у представителей казахской популяции,больных вирусным гепатитом С, и проведения корреляции его активности с уровнем фиброза печени по шкале . У пациентов с хроническим вирусным гепатитом С коренной казахской популяции наблюдаются изменения уровня ФНО-а повышение в 56,2 при фиброзе 1 по шкале , в 62,5 случаев при 2 и 80 при 3. Способ позволяет осуществлять корреляцию активности ФНО-а с тяжестью поражения печени у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С коренной казахской популяции.(76) Калиаскарова Кульпаш Сагындыковна ,Стикеева Райхан Куандыковна , Туганбекова Салтанат Кинесовна , Нерсесов Александр Витальевич(56) 1) Пальцев М.А., Иванов А.А. Межклеточные взаимодействия.-М. Медицина, 1995 2) Демьянов А.В., Котов А.Ю., СимбирцевА.С. Диагностическая ценность исследования уровней цитокинов в клинической практике//Цитокины и воспаление. 2003, Т 2, 3, с.20-33 3) Ершов Ф.И., Наровлянский А.Н., Мезенцева М.В. Ранние цитокиновые реакции при вирусных инфекциях// Цитокины и воспаление, 2004, 1, с.3-6. 4) Носик Н.Н. Цитокины при вирусных инфекциях // Вопросы вирусологии, 2000, 1, с.410(54) СПОСОБ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ УРОВНЯ ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛИ - (ФНО-)У ЛИЦ КАЗАХСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ КАК СУРРОГАТНОГО НЕИНВАЗИВНОГО МАРКЕРА 22203 Изобретение относится к области медицины, в частности терапии, гепатологии, инфекционным болезням и касается использования ФНО-а для диагностики фиброза печени при вирусном гепатите С в казахской популяции, а также установления тяжести поражения печени, коррелируемой с активностью ФНО-а. Поражение печени при хронических вирусных гепатитах (ХВГ) характеризуется воспалительными изменениями различнойстепени выраженностии неуклоннопрогрессирующим фиброзом. О стадии заболевания судят по степени выраженности фиброза при морфологическом исследовании,оцениваемого в баллах согласно различным системам оценки. Вариабельность темпов прогрессирования фиброза при ХВГ обусловлена влиянием множества факторов, среди которых рассматриваются факторы вируса, хозяина и внешние факторы (Ивашкин В.Т. с соавт., Рос. журн. гастроэнтер., гепатол.,колопрокт., 2002. Т 11. 3. с.24-29 Авдеева Ж.И.,Иммунология. 2002. Т.4. 2. с.225 Авезов С.А.,Рос. журн. гастроэнтер., гепатол., колопрокт., 2002. Т . 5. с.79 Царегородцева Т.М., Мед. иммунология. 2002 Т.4.2. с.167 Шапиро И.Я.,Мед.иммунология. 2002. Т.4. 2. с.169.). Однако, не проводились исследования по корреляции уровня ФНО-а у больных гепатитом С с морфологическими маркерами фиброза. О роли генетических факторов хозяина могут свидетельствовать данные о более тяжлом течении ХВГ с высокой частотой развития ГЦК в некоторых регионах или этнических группах -в Японии,Италии, Испании, а также о различиях в частоте хронизации и тяжести течения ХВГ у чернокожих американцев и лиц белой расы, проживающих в одном и том же регионе. В настоящее время изучается несколько групп генетических факторов. Особый интерес представляет изучение генетических факторов, которые могут определять индивидуальные особенности фиброгенеза - прогрессиирующего накопления внеклеточного матрикса вследствие повреждения печени. Полиморфизм генов профиброгенных факторов приводит к изменению уровней секреции соответствующих белков или их структуры, что в свою очередь может иметь определенное значение в патогенезе фиброза печени. Группы генетических факторов Определяющие иммунный ответ Определяющие полиморфизм профиброгенных факторов межклеточного взаимодействия Определяющие активацию коагулопатии Ген гемохроматоза Ангиотензиноген является значимым элементом РАС. Была установлена строгая корреляция между концентрацией ангиотензиногена в плазме крови и давлением выявлено влияние различных генотипов и повышенного уровня экспрессии гена ангиотензиногена на кровяное давление. Для мутаций Т 174 М и М 235 Т установлено наличие ассоциации с различными сердечно сосудистыми заболеваниями. Роль гена ангиотензиногена как независимого фактора риска ИБС была показана., установившими связь между 235 Т аллелем и увеличением риска развития ИБС(Царегородцева Т.М., Мед. иммунология. 2002. Т 4 2. с.167 Курманова Г.М., Дисд.м.н./Научный центр гигиены и эпидемиологии (НЦЭГ).2004. с.296,Шабалдин А.В., Иммунология.-2007. -Т. 28, 2. с.68-72). Недостатком является то, что этот фактор не является маркером фиброза печени, т.к. его обнаружение носит узконаправленный характер и чаще всего связывают с заболеваниями сердечнососудистой системы. Трансформирующие факторы роста - белки,секретируемые видоизменнными клетками (полипептиды, секретируемые многими типами 2- фактор некроза опухоли -а-ген клеток. Могут стимулировать рост одних и тормозить рост других типов клеток. Семейство- включает в себя многие из морфогенетических протеинов (Царегородцева Т.М., Мед. иммунология. 2002. Т.П.4 2. с.167). Трансформирующий фактор роста- оказывает провоспалительный эффект, действуя как хемоатрактант для Мц и Мф, а также противовоспалительный эффект, ингибируя пролиферацию лимфоцитов способствует восстановлению тканей. Недостатком указанных генетических факторов является то, что они не могут быть маркерами фиброза печени (.1994 369 64-67), т.к. не являются специфическими для заболеваний гепатобилиарного тракта, т.е. выявляются при широком спектре патологии различного генеза. ИЛ-1 продуцируется мононуклеарами периферической крови. Повышение ИЛ-1 в сыворотке крови сопутствует целому ряду заболеваний воспалительного и аутоиммунного характера Йегер Л., Клиническая иммунология и аллергология. - М.,1990. с. 474-482. 22203 ФНО-а и ИЛ-1 способны активировать звездчатые клетки печени, играющие ключевую роль в фиброгенезе печени Казаков А.А., Мед. иммунология. 2002. Т 4.2. с.122-123. Кроме того,ФНО-а и ИЛ-1 способствуют развитию жировой инфильтрации печени и могутрегенерацию печеночной ткани Ризопулу А.П.,Мед. иммунология. 2002. Т.4. 2.с.252-253 Недостатком является то, что нет корреляции между биохимическими и морфологическими показателями фиброза и уровнем этого цитокина. Исследования показали, что чем активнее цитолитический синдром при ХВГС, тем выше уровень -1. Таким образом, и литературные данные, и наши исследования показали, что -1 не является прямым маркером фиброза, а может служить маркером цитолиза. На основании экспериментальных моделей было установлено, что в патогенезе фиброза печени одну из ключевых ролей играет фактор некроза опухолиа (Царегородцева Т.М., Мед. иммунология. 2002. Т.4.2. с.167 Шабалдин А.В., Иммунология.-2007.-Т. 28, 2. с.68-72). Фактор некроза опухоли- а (ФНО-а) является генетическим профиброгенным фактором межклеточного взаимодействия, синтезируется моноцитами/макрофагами,нейтрофилами,Тлимфоцитами, натуральными киллерами, тучными клетками. Исследования последних лет указывают,что ФНО-а вовлечн в повреждение печени,активизируя звздчатые клетки ИТО печени,интралобулярный фиброз и синтез коллагена(Шульпекова Ю., Мед. иммунология 2002 Т.4. 2. с.268 Козлов В.А., Цитокины и воспаление. -2002 Т.1, 1. с.5-8). Фактор некроза опухоли-а (ФНО-а) активирует Т и В- лимфоциты, естественные клетки-киллеры,опосредует , гепатотоксический эффект, принимает участие в апоптозе поврежденных (в том числе вирусом) клеток. Повышение уровня ФНО-а в сыворотке крови характеризует процессы воспаления и элиминации клеток путем прямой цитотоксичности или апоптоза. При ряде воспалительных и аутоиммунных заболеваний уровень ФНО-а отражает тяжесть патологического процесса Пальцев М.А.,Межклеточные взаимодействия. -М. Медицина, 1995 Демьянов А.В., Цитокины и воспаление. - 2003.- Т.2, 3. с.2033 Ершов Ф.И., Цитокины и воспаление. -2004 -1. с.3-6 Носик Н.Н., Вопросы вирусологии. -2000. 1. с 4-10. Задачей данного исследования было выявить возможность использования ФНО-а у больных коренной казахской популяции с хроническим вирусным гепатитом С как суррогатного маркера активности фиброза печени. Целью исследования явилось определение уровня ФНО-а при хроническом вирусном, гепатите С (ХВГС) у пациентов коренной казахской популяции в зависимости от стадии фиброза. Обследовано 29 больных хроническим вирусным гепатитом С коренной казахской популяции в возрасте от 15 До 65 лет (средний возраст 44,32,7 лет).обеих группах всем больным для постановки диагноза бралась кровь, для измерения содержания ФНО-а в сыворотке методом ИФА. При анализе изменений уровня ФНО-а наблюдалось повышение у 9 (56,2) пациентов 1 группы, у 5 (62,5) пациентов 2-ой группы и у 4 (80) пациентов 3 группы Наряду с этим всем больным проводилась пункционная биопсия печени с подсчтом стадии фиброза по шкале . Выявлено при морфологическом исследовании по системе 1 у 16(55,17) больных (1 группа), 2 у 8(27,5) больных (2 группа), 3 у 5(17,2) больных(3 группа). Таким образом, нами установлено, что у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С коренной казахской популяции наблюдаются изменения уровня ФНО-а повышение в 56,2 при фиброзе 1 по шкале , в 62,5 случаев при 2 и 80 при 3. Способ использования показателя ФНО-а в качестве суррогатного маркера фиброза позволяет осуществлять корреляцию активности ФНО-а с тяжестью поражения печени у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С коренной казахской популяции и корреляции ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ использования фактора некроза опухолиа (ФНО-а) как суррогатного неинвазивного маркера фиброза печени при вирусном гепатите С,отличающийся тем, что представителям казахской популяции, больным вирусным гепатитом С,проводится измерение содержания ФНО-а в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа и осуществляют корреляцию его активности с уровнем фиброза печени по шкале .