Способ получения препарата плантафермин

(51) 61 35/74 (2006.01) 12 1/20 (2006.01) 61 1/00 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ активных штаммов 27 и 22 или 27,27,22,7. Задача изобретения - расширение спектра действия и повышение антимикробной активности препарата плантафермин. Сущность изобретения. Для выращивания бактерий в процессе производства препарата плантафермин предложена питательна питательная среда на основе пептона, дрожжевого и мясного экстрактов и минеральных компонентов взамен гидролизатно-молочной среды. Техническим результатом является получение препарата плантафермин при выращивании бактерий на предложенной питательной среде,превосходящий прототип по спектру антимикробного действия и величине активности.(76) Саданов Аманкелди Курбанович Гаврилова Нина Николаевна Ратникова Ирина Александровна Бектурганов Нуралы Султанович(56)21861 4, 16.11.2009 Ратникова И.А. Биологические основы создания пробиотиков направленного действия для медицины,сельского хозяйства и перерабатывающей промышленности автореф.док. биолог. наук. Алматы, 2010. 16 с.2440123 2, 20.01.20122004/0022775 1, 05.02.2004(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ПЛАНТАФЕРМИН(57) Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в процессе производства лечебного препарата плантафермин, включающего микробную массу живых клеток антагонистически Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в процессе производства лечебного препарата плантафермин. Известна микробная масса живых клеток антагонистически активных штаммов 27 и 22 или 27,27,22,7, выращенную на гидролизатно-молочной среде(Фармакопейная статья Плантафермин сухой ФС РК 42-2003). Задана изобретения - расширение спектра действия и увеличение антимикробной активности препарата плантафермин. Поставленная задача достигается тем, что при производстве препарата плантафермин для выращивания молочнокислых и бифидобактерий используют вместо гидролизатно-молочной среды(ГМС) питательную среду, основу которой составляют пептон, мясной и дрожжевой экстракты,глюкоза и минеральные компоненты. Сущность изобретения поясняется следующими конкретными примерами. Пример 1. Ассоциацию культур .27 и .22 выращивают в течение 24 ч при 37 С на предложенной питательной среде(таблица 1) и в качестве контроля - на гидролизатномолочной среде, используемой для производства плантафермина (г/л) гидролизованное молоко 500,0 мл пептон - 2,0 лактоза - 10,0 натрия хлорид - 3,5 цистеин солянокислый - 0,15 агар микробиологический - 0,75, вода питьевая - до 1 л. Затем определяют антагонистическую активность в отношении взятых в опыт тест-культур следующим образом. Чашки Петри с ровным дном помещают на горизонтальную поверхность. На водяной бане расплавляют в колбах стерильную плотную питательную среду следующего состава (г/л) бульон Хоттингера - 30,0 пептон - 5,0 натрия хлорид - 5,0 глюкоза -10,0 агар-агар - 20,0 вода питьевая для доведения объема среды до 1 л. После охлаждения до 45-50 С в агаризованную среду вносят взвесь тест-культуры из расчета 1,0 см 3 одномиллиардной взвеси на 100 см 3 среды. Содержимое колбы перемешивают и разливают в чашки Петри по 10 см 3 в каждую. В застывшей среде бором вырезают лунки, обычно по шесть. В приготовленные лунки вносят по 0,1 см 3 односуточной культуры ассоциаций. Затем чашки выдерживают около 3 ч при комнатной температуре для диффузии раствора в агар, после чего помещают в термостат при температуре 37 С на 16-18 ч. Измеряют диаметр зон подавления роста тесткультур. Для каждого образца рассчитывают среднее арифметическое значение не менее чем из трех определений. Как видно из таблицы 2,препарат плантафермин, содержащий .21 и .22, обладает более широким спектром действия и более высокой антимикробной активностью в отношении испытанных тест-культур при выращивании бактерий в питательной среде на основе пептона, дрожжевого и мясного экстрактов при следующем соотношении компонентов (г/л) глюкоза - 8,0-15,0 дрожжевой экстракт - 1-5 мясной экстракт - 2-5 пептон - 5-10 аммоний лимоннокислый - 3-5 натрий уксуснокислый - 3-5 Калий фосфорнокислый 1-замещенный - 1-4 натрий фосфорнокислый 2-замещенный - 1-4 магний сернокислый - 0,1-0,2 марганец сернокислый - 0,030,05 кобальт хлористый - 0,01-0,03 агар микробиологический - 0,75 вода питьевая - до 1 л. Так, в отличие от контрольного, полученного при выращивании бактерий на среде ГМС, у него выявлена антагонистическая активность в отношениии отмечено повышение антагонистической активности практически в отношении всех исследованных тесткультур. Пример 2. Ассоциацию культур .27, .27, .22,7 выращивают на предложенной среде и определяют антагонистическую активность, как указано в таблице 2. Как видно из представленной таблицы 3,использование предложенной питательной среды для выращивания бактерий позволяет расширить их спектр действия и повысить антагонистическую активность по сравнению с использованием для этих целей гидролизатно-молочной среды. Таблица 1 Фосфорнокислый калий Фосфорнокислый натрий Варианты питательной среды 1 2 3 4 5 6 Примечание все варианты сред дополнительно содержат сульфат магния (0,03-0,05), хлористый кобальт 0,01-0,03), агар микробиологический (0,75) Таблица 2 Антагонистическая активность плантафермина (27 и 22) в зависимости от состава питательной среды Тест-культуры Зоны подавления роста тест-культур, мм 3 4 5 6 20,00,57 21,00,23 21,00,57 18,00,49 Таблица 3 Антагонистическая активность плантафермина (27,22,27,7) в зависимости от состава питательной среды Тесткультуры Зоны подавления роста тест-культур, мм 3 4 5 6 21,01,00 21,00,32 21,00,57 20,00,33 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ производства препарата плантафермин,включающий выращивание микробной массы живых клеток антагонистически активных штаммов 27 и 22 или 27,выращивание бактерий производят на питательной среде следующего состава (г/л) глюкоза - 8,0-15,0 дрожжевой экстракт - 1-5 мясной экстракт - 2-5 пептон - 5-10 аммоний лимоннокислый - 3-5 натрий уксуснокислый 3-5 калий фосфорнокислый 1-замещенный - 1-4 натрий фосфорнокислый 2-замещенный - 1-4 магний сернокислый - 0,1-0,2 марганец сернокислый - 0,030,05 кобальт хлористый - 0,01-0,03 агар микробиологический - 0,75 вода питьевая - до 1 л.