Способ селекции карповых рыб

Изобретение относится к рыбоводству, а именно к селекции таких прудовых рыб, как карповые.Цель изобретения - получение высокопродуктивных гибридов рыб и сокращение сроков селекции, Повышение продуктивности гибридов обусловлено обеспечением высокого уровня направленной гетерозиготностн, так как при использовании предлагаемого способа дивергентные линии создаются на базе изменчивости, индуцированной химическими супермутагенами нитрозоэтилмочевиной (НЭМ), диазоацетилбутаном(ДЭС), обладавшими специфичностью действия на рыб. Это действие выражается в индуцировании определенного спектра наследственных изменений (мутаций), в том числе не встречающихся в природе.Для воспроизводства используют особей с наиболее высокими показателями продуктивности и плодовитости, степень генетического расхождения между линиями определяют по пяти биковым системам трансферринам, миогенам,эстеразам сыворотки крови и мышц.Спермии рыб - карпа или сазана - отбирают в чистые сухие пробирки и обрабатывают их раствором химических алкилирующих супермутагенов, приготовленных на физиологических растворах.Обработку проводят следующим образом.1. Спермии разбросанного карпа обрабатывают 0,005-ным раствором нитрозоэтилмочевины (НЭМ). Экспозиция обработки 50 мин. Обработанными мутагеном спермиями осеменяют смесь икры разбросанных самок карпа.2. Спермии разбросанного карпа обрабатывают 0,005-ным раствором этиленимина (ЭИ). Экспозиция обработки - 60 мин. Обработанными мутагеном спермиями осеменяют смесь икры чешуйчатых самок карпа.3. Спермии зайсанского сазана обрабатывают 0,005-ным раствором 1,4-бисдиазоацетилбутана (ДАБ). Экспозиция обработки- 35 мин. Обработанными мутагеном спермиями осеменяют смесь икры чешуйчатых самок карпа.4. Спермии чешуйчатого карпа обрабатывают 0,1-ным раствором диэтилсульфата (ДЭС). Экспозиция обработки - 40 мин. Обработанными мутагеном спермиями осеменяют смесь икры чешуйчатых самок карпа.Обесклеивание и инкубацию оплодотворенной икры проводят по общепринятой методике,инкубируя икру от каждого скрещивания в отдельном инкубационном аппарате. Полученных 3-дневных личинок сажают на выращивание в пруды, причем потомство, полученное от каждого скрещивания, выращивают в отдельном пруду с учетом требований, предъявляемых к содержанию племенного материала.Каждый тип скрещивания является , основой для формирования первого поколения (171) линии.Название линии соответствует мутагену, с применением которого получено потомство. Таким образом, в дальнейшем потомство от скрещивания 1 именуется линией НЭМ 171, от скрещивания 2 - линией ЭИ 171, от скрещивания 3 - линией ДАБ 171, от скрещивания 4 ДЭС 171.Осенью сеголеток из всех прудов вылавливают, учитывают выживаемость, снимают биометрические показатели из рэндомной выборки,производят массовый отбор особей, отличающихся высокой массой и хорошими экстерьерными показателями.Коэффициенты вариации массы рыб из каждой линии значительно отличаются от контроля,они составляют на первом году выращивания для линии НЭМ 171 42,3, для линии ЭИ 171 41,6, для линии ДАБ 171 40,3, для линии ДЭС 171 48,2, для контроля 23,4В качестве контроля используют потомство исходных беспородных карпов.Отбор на первом году жизни проводят с умеренной интенсивностью. Отобранных рыб метят групповьпии метками и сажают на зимовку. Выращивание рыб на втором году жизни проводят совместно. Отбор на двухлетках ведут с высокой интенсивностью, а при выращивании рыб старших возрастов ведут лишь корректирующий отбор.В табл. 1 приведены данные, показывающие различия по биохимическим маркерам полученных линий.Различие по биохимическим маркерам свидетельствует о том, что в дальнейшем гибриды этих линий будут показывать наибольшую жизнеспособность и продуктивность.Половозрелых рыб (производителей) на каждой линии первого поколения (174) воспроизводят в себе, например, икру от нескольких самок из линии НЭМ 171 осеменяют спермиями нескольких самцов из этой же линии и т. д. После инкубации получают второе поколение (172) каждой линии рыб НЭМ 172, ЭИ 172, ДАБ 172, ДЭС 172.Для закладки линий второго поколения селекции используют самок с высокой индивидуальной рабочей плодовитостью.Во втором поколении также ведут массовый отбор выдающихся по продуктивности и экстерьерным показателям особей на сеголетках и двухлетках, а на ремонтных рыбах старших возрастов лишь корректирующий отбор.. Производителей второго поколения селекции используют для получения промышленных межлинейных гибридов, для чего самок линии ДАБ 172 скрещивают с самцами линий ЭИ 172,НЭМ 172 и ДЭС 172, самок линии ДЭС 172 скрещивают с самцами линий ДАБ 172, ЭИ 172 и НЭМ 172, самок линии ЭИ 172 скрещивают с самцани линии ДАВ 172, а самок линии НЭМ 172 скрещивают с самцами линии ЭИ 172.Выбор восьми типов скрещивания из 16 возможных (имея в виду, что получено четыре линии) обусловлен тем, что только данные типымежлинейных скрещиваний дают гетерозиготные потомства, по продуктивным свойствам превосходящие потомства всех родительских форм,прощедщих через селекцию, в течение двух поколений, и значительно превосходящие потомства исходных беспородных карпов.Для выявления наиболее продуктивных и жизнеспособных скрещиваний от группы самок ДАБР 2 отбирают икру, смешивают и делят на четыре части. Одну часть икры осеменяют спермой от группы самцов лини НЭМВ, вторую - спермой самцов линии ЭИР 2, третью - спермой самцов линии ДЭСР 2, четвертую - спермой самцов линии ДАБР 2. Также поступают и с икрой самок линий НЭМ 172, ЭИ 172, ДЭСР 2. Таким образом, получают 16 скрещиваний.Каждое скрещивание в трех повторностях инкубируют в кристаллизаторах, а после выклева трехдневных личинок высаживают на подращивание в двух повторностях в садки, установленные в одном пруду. Выживших мальков от каждого скрещивания смещивают, метят подрезанием плавников и, разделив на три равные части, высаживают на выращивание в три экспериментальных пруда.Окончательную оценку потомства методом общего контроля проводят по показателям продуктивности сеголеток, выраженных в процентах продуктивности к контролю, в качестве которого используют потомство или от внутрилинейного спаривания производителей (например, НЭМ х НЭМ), или от беспородных исходных карпов.Полученные данные используют для ранжировки гибридов по проявлению эффекта гетерозиса. Данные приведены в табл. 2.Из табл. 2 видно, что наибольщие показатели продуктивности имеют межлинейные гибриды,полученные от восьми упомянутых скрещиваний,которые заняли ранги с 1 до 8.Пример 1. Свежеотцеженную сперму беспородного карпа обрабатывают . 1 ,4-бисдиазоацетилбутаном (ДАВ) в полулетальной концентрации. Для этого 1 мл маточного раствора ДАБ соединяют с 14 мл физиологического раствора и 3 части полученного рабочего раствора смещивают с 1-й частью спермы.Экспозиция обработки - 35 мин, обработанной спермой осеменяют икру беспородного карпа.Получение половых продуктов, инкубацию икры и выращивание потомства проводят в благоприятных условиях по принятой в рыбоводстве методике. Выращенных сеголеток подвергают биометрическому анализу, на основе которого отбирают рыб на племя. Следующий отбор среди потомства проводят на двухлетках.После достижения карпами (171) этой линии половозрелого состояния их воспроизводят в себе, используя лучщих самок и самцов. Выращивание 172 осуществляют обычным способом,при этом среди сеголеток и двухлеток проводят жесткий отбор по фенотипу и по пяти полиморф 383ным белковым системам определяют генетическую структуру рыб, отобранных на племя.После достижения карпами ДАБВ половозрелого состояния их используют для получения высокопродуктивных межлинейных гибридов,для чего самок ДАБР 2 скрещивают с самцами линий ЭИВ, НЭМВ и ДЭСВ. а самцов ДАБЫ скрещивают с самками линий ДЭСР 2 и ЭИР 2.Пример 2. Свежеотцеженную сперму беспородного карпа обрабатывают диэтилсульфатом(ДЭС) в полулетальной концентрации. Для этого одну часть спермы смещивают с тремя частями 0,1-ного раствора ДЭС, приготовленного на физиологическом растворе. Экспозиция - 40 мин. Спермой осеменяют икру карпа.Далее процесс проводят по примеру 1.После достижения карпами ДЭСР 2, половозрелого состояния самок линии. ДЭС 172 скрещивают с самцами линии ДАБР 2, ЭИ 172 и НЭМВ, а самцов - с самками линии ДАБР 2.Пример 3. Свежеотцеженную сперму беспородного карпа обрабатывают этиленгпиином (ЭИ) в полулетальной концентрации. Для этого 1 мл маточного 0,1-ного раствора ЭИ соединяют с 14 мл физиологического раствора и три части полученного раствора смещивают с одной частью спермы.Экспозиция - 60 мин. Спермой осеменяют икру. Далее процесс ведут по примеру 1.После достижения карпами ЭИР 2 половозрелого состояния самок по линии ЭИР 2 скрещивают с самцами линии ДАБВ, а самцов ЭИР 2, - с самками линий ДАБВ. ДЭСВ и НЭМ 172.Пример 4. Свежеотцеженную сперму беспородного карпа обрабатывают нитрозоэтилмочевиной (НЭМ) в полулетальной концентрации.Для этого 1 мл маточного 0,1-ного раствора НЭМ соединяют с 14 мл физиологического раствора, а затем три части полученного рабочего раствора смещивают с одной частью спермы. Оплодотворяют этой спермой икру. Далее процесс ведут по примеру 1.После достижения карпами НЭМР 2 половозрелого состояния самок линии НЭМ 172 скрещивают с самцами линии ЭИР 2, а самцов НЭМВ - с самками линий ДАБВ и ДЭСВ.Результаты выращивания межлинейных гибридов даны в табл. 3-10.Показатели табл. 3-10 свидетельствуют о преимуществах полученных межлинейных гибридов над контролем, что подтверждает их высокую продуктивность.Способ селекции карповых рыб, предусматривающий обработку спермы полулетальными концентрациями химических супермутагенов этиленимина (ЭИ), нитрозоэтилмочевины (НЭМ),диазоацетилбутана (ДАБ) и диэтилсульфата(ДЭС), оплодотворение икры, обработанной спермой, получение потомства и выращивание его до половозрелого состояния с получениемлиний ЭИР, НМЕ, ДАБЫ и ДЭСН, отличающийся тем, что, с целыо получения высокопродуктивных гибридов рыб и сокращения сроков,селекции, полученных производителей каждой линии воспроизводят в себе, выращивают потомство с двукратным отбором по продуктивности до половозрелого состояния, получая второе поколение каждой линии ЭИР 2, НЭМВ, ДАБР 2 и ДЭСР 2, а затем производят скрещивание самокодной линии с самцами других линий, используя следующие сочетания самок линия ДАБР 2 скрещивают с самцами линий ЭИБ, НЭМВ, ДЭСВ,самок линии ДЭСВ, скрещивают с самцами линий ДАБЫ, ЭИВ, НЭМВ, самок линии ЭИ 172 скрещивают с самцами линии ДАБР 2, а самоклинии НЭМ 172 скрещивают с самцами линии ЭИР 2.Таблица 1 Линия Белковые системы мранс- сывороточ- эстераза 1 эстераза П миогены феррины ные эстеразы мыщц мыщц ЭИ А А В В А НЭМ АС В В вв А ДАБ В А В В А ДЭС С АВ В Вв а Таблица 2 Тип скрещивания Тип потомства Средняя (по 3 повторам) Ранг продуктивность, к самки самцы Контролю ДАВ ЭИ 137,9 1 ДАВ НЭМ Межлинейные 13 5 ,4 2 гибриды ДАВ ДЭС 125,1 4 ДЭС ЭИ 134,5 3 ДЭС ДАВ 122,9 6 ДЭС НЭМ 120,8 8 ЭИ ДАВ 124,2 5 ЭИ НЭМ 112,8 11 ЭИ ДЭС 104,2 13 НЭМ ЭИ 122,5 7 НЭМ ДЭС 102,9 14 НЭМ ДАВ 98,9 16 ДАВ ДАВ Чистые линии 1 15 ,6 10 НЭМ НЭМ 100,0 15 ЭИ ЭИ 118,8 9 ДЭС ДЭС 107,7 129 10 Таблица 3 Рыбоводно-биологические Межлинейные гибри- Беспород- Разница между гибпоказатели ды ДАБ 132 х ЭИ 132 ный карп ридами и контролем Средняя плодовитость са- 170) мок, тыс. шт. икринок Выход личинок, 24,0 Выживаемость сеголеток, 19 6 от заводских личинок Средняя масса сеголеток, г 11,0 Выживаемость годовиков,о 42,0 А) от сеголеток Выкиваемость двухлеток, 23 О от годовиков Средняя масса двухлеток, г 457,0 310,0 147,0похоптщш ннй карп ду гибридн НИ Н КОН ролемРьюоподяо-биологичесхие нали- Беспорщь гашиш непохваатегш пенные ннй карп ду гибридо гибриды ми и контдэсг, х волен х ЦАРЕ,1 от людски личинок 39,7 21,5 18,3 Средняя масс сегцле-