Вакцина против трихофитии животных

НАЦИОНАЛЬНОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(73) Всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (КН)(56) Патент Великобритании По 1330240, кл. А 5 В 1973 А.с. СССР Не 955571, кл. А 61 К 39/00, 1980(57) Использование биотехнология средства тгцифтешои профилактики против грихофитии животных Сущность изобретения в состав вакцины дополнительно вводят антиген из штамма Г- тчттгбгорпутез вгнки п 27 ДЕП. Вакцина Вернет содержит также антиген из цламма Тг четшсозцт 1 ЗОЛ и сахарозо-жепатиновый ста ШТИЗЗТОО в эффективных соотношениях. Ис попьзование вакцины -Вермет в ветеринарной Гтатпикедозвопит повысить эффективность меч ропрнятии по борьбе с трихофитией животныхТФ-130 (К) против трихофитии животных. преимущественно крупного рогатого скота. содержащая антиген из штамма Тгюнорпутоп тачтгоппе М 130 (аул. Тг. чеггосозот) или антиген из штамма Тг. гачйгоггпе 130 Л и желатин-сахароаннй стабилизатор 1, 2. Недостатком известных вакцин является то, что онипрофилактируют заболеваниеАнтиген из штамма Тг. чегшсозот Антиген из штаммадля изготовления вакцины используют штамм Тг. тетаогорнутеэ ВГНКИ не 27.штамм Тг. птелтаогорлутев ВГНКИ Не 27 получен из эпизоотического. выделенного от белой мыши, методом направленного ступенчатого отбора по признакуспорсобразования наиболее быстро растущих колония с активным накоплением микроконидий.Штамм Тг. глепгаоторлутвз М 27 депонирован а коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного науте-исследовательского института контроля. стандартизациии сертификации ветеринарных п репаратов и имеет регистрационный номер 27.Штамм гриба Тг, тептаогорпутез ВГНКИ Мг 2 характеризуется следующими признаками и свойствамиМорфологические признаки. Мицелий не окрашен, ровный. ветвистьгй. септиро ванный. может распадаться на фрагменты.терминальные гифьг не всегда образуют спирали обычно 3-5 завитков. диаметр мицелия 20-10 мкм. Микроконидии многочисленные. круглые. тирушевидндьге. удлиненные. близкие к палочковиднои форме. располагающиеся на поверхности мицелия гроздьями. чаще отдельно. размер 155-552 мкм. Макроконидии единичные. Количество перегородок 1-5. чаще 1-2, размером 10-30 к- 3-8 мкм. культурах ЗО-ЗО-дневного возраста могут наблюдать ся кламидоспоры округлой формы с двукон турноо оболочкой. всегда единичные. 3.0-5.0 мкм в диаметре. Артроспорьг возникают на отдельных участках мицелия. тонкостенные. по форме напоминают овальные или палочковидные микроконидии 30-911 мкм. Куп ьтуральные свойства. На сусло-агар4 только у одного вида животных - крупного рогатого скота и только к одному виду возбудителя Тг. Гачдтоггпе.Целью изобретения является разработка высокоиммуногеннод вакцины против трихофитии животных вызываемой Тг, чеггцсозит. Тг. иетгцсозцт маг. аитотгорысит. Тг,гпептаогорпутев. Тг. еошлит, Тг. загюаочн.Это достигается тем. что вакцина дополнительно содержит антиген из штамма Тг. телтаогорбутев ВГНКИ М 27 при следующем соотношении компонентов. (масжобдъ)растет в виде плоской белой. бархатистой колонии онезначительным возвышением вНа агаре Сабуро растет в виде плоской. белой. бархатистой с кремовом оттенком колонии с небольшим воавышением в центре, растущий край ровный. реверс бледножелтыи. иногда более темный в центре,размер колонии 50-90 мм(15-20 дневная культура).На среде Геннеберга растет в виде белой. бархатистой, радиально-складчатой ко лонии. растущий край паутинистый. реверсСпорообразование. Максимальный уровень спорообрааования на сусло-агаре 198,4 - 259.2 млн/ома Вирулентныв свойства. При внутримы шечном введении культура штамма Тг.гпептаогорбутез М 27 у морских свинок. кроликов. овец. коз, телят спустя 2-3 недели на месте инъекции развивается специфический локализованный поверхностный очажок диаметром 2.0-2.5 см. который самопроизвольно излечивается в течение 15-20 дней. Микологически выделить возбудитель не удается. При нанесении культуры штамма неиммунизированным животным на скарифицированную кожу в дозе 025 млн/см микроконидии на месте аппликации развивается в течение 10-20 дней типичный трихофитийный очаг. Выделенный из патологического материала штамм по своим свойствам соответствует исходному.Антигенные свойства. На введение культуры штамма а организме телят. овец.кроликов образуются специфические агглютннины в титрах 1 д 0 -11280. Иммуногенные свойства. При двукратном внутримышечном введении теллтамфкрф пикам вакцины. изготовленной из данного штамма. в дозе. содержащей 10-20 млн живыкмикроконидий. у-животных формируется напряженный иммунитет к последующему заражению трикофитией продолжительностьюШтамм Тг. гп птаргорпутез ВГНКИ та 27 отличается от ан - оптических слабой вирулентностью, отсутствием заражения при контакте между животными, высокой активностью накопления микроконидий и иммуногвнностью при внутримышечном введенииживотным. .уеггисозипт 130 Л и Тг. тептаогорлутев ВГНКИ 052 выращивают раздельно в матрасных колбах на сусло-атаре он 62-63) при температуре 2628 С в течение 12-20 дней. выращенную грибницу каждой культуры в условиях асвптикиснимают с поверхности питательной среды специальными скребками и помещают в стерильные банки. Г рибную массу каждого литамма гомогенизируют в миксерах или коллоидной мельнице. а затем с помощью стерильной воды полученный гомогенат Тг. уеггисоаопт 130 Л ресуспензируют до концентрации микроконидий 300 млндсмз а гомогвн ат Т . тептаогорпутез ВГНКИ М 27-4500 млн/см гесуспензирование проводят в присутствии пенициллина или стрептомицина из расчета 100 Ед на 1 тсм 3 гомогенвта. Г омогенат штамма гриба Тг. уеггосозит 130 Л Обьединяют в равном объеме с гомогвнатом штамма гриба Тг. птетаогорлутев ВГНКИ Не 21 К полученной суспензии грибной массы добавляют равное количество стабилизатора (он 62-633). содержащего в воде 10 сахарозы и 1,5 желатины. Все тщательно перемешивают. разливают-в стерильные флаконы и лиофильно высушивают.П р и м е р 2. Вакцину получают аналогично, как описано в примере 1. Для веприготовления используют гомотенат штаммов грибов Тг. уеггисозот 130 Л и Тг. тептаогорпутев ВГНКИ М 27 г концентрацией микроконидий 450 млн см . а в качестве-П р им в р 3. Вакцину против трихофитии животных приготавливают аналогично. как описано в примере 1. Для ее получения используют гомогенат штамма гриба Тг. увггосовит 130 Л с концентрацией микроконидий 600 млн/смз и гомогвнат штвмжзТг. тепгаогорпутез Мг 27 З концентрацией микроконидий 300 млн/см . В качестве ствБИЛИЗБТОРЗ ИСПОЛВЗУЮТ ВОДНЫЙ ВВСТВОП. СО держащий 20 сакарозы и 4 желатина.Готовая вакцина представляет собой однородную пористую сухую массу в виде таблеткисерого цвета. Вакцина сохраняет свои биологические свойства при условии хранения В ЗЭКПЫТЫХ СУХИХ. ТЕМНЫХ ПОМЕщенилх при температуре 210 С. Срок годности 12 мес. К вакцине прилагаются флаконы со стерильным раабавителем.П р и м е р 4. Приготовленные серии вакцины-Вермет против трихофитии животных-ло примерам 1. 2. З перед применением растворяют а-раабавителе из расчета 1 доза в 1 смз. Цолучают серии вакцины Верметд. содержащие в прививочной дозе следующую концентрацию антигенов в млн/ему (табл. 1). -Вакцину Вернет по примерам 1-3 используют для иммунизации телят, вводя внутримышечно двукратно с интервалом 10-14 дней в дозе 1 см .В качестве контроля испытывают аналогично приготовленные вакцины из штамма Тг. чеггисозот 130 Л и Тг. телтаогорпутев ВГНКИ М 27 с концентрацией микроконидий антигена в прививочной дозе 7.5 млн/сиз. Через 35 дней после второй иммуНИЗЗЦИИ ТЕЛЯТ заражают ВИПУЛЭНТЛ-ЕЫМИ КУЛЬ турами штаммов Тг. уеггосозот М 153 Т 3-153). Тг. глепгаргорпутее М 251 (тм-гет). Тг. запасом М 324 (ГС-ТЖ). -Тг. уеттсозот уаг. автопортрет 110 (тел-тез). Одновременно заражают этими же культурами шесть контрольных (иммунизированных) телят.Результаты экспериментального заражения телят представлены в табл. 2.Из таблицы следует. что 1-3 серии вакцины Вермет у иммунизированных телятвырабатывают напряженный (10026) имму нитет против трикофитии при экспериментальном заражении. Иммунизация телят моновакцинами не вызывает достаточно стойкого иммунитета при последующем заражении гетерологичными культурами возбудителей трикофитии. Телята. ранее не иммунивированныо и не болевшие трихофитией. восприимчивы к экспериментальному заражению вирулентными культурами воз будителей трнхофитии. .вакцины 8 врмет аналогично примеру 4 иммунизируют И коз с последующим ихзаражением вирулентными культурами штаммов Тп-уеггисоввт М 153. и Тг, лтептаогорпутев М 251. Контрольнык животных (2 головы) не вакцинируют.Все вакцинированные животные не за-болелитрикофнтией, у контрольных были отмечены все признаки заболевания с выделением из пораженных очагов указанныхП р и м е р б. Для иммунизации 10 кроликов породы шиншилла живой массой 2.5-3.О кг используют вакцину Вермет по примеру 2. Вакцину перед применением растворяют в разбавителе из расчета 1 доза в 1 см . Получают следующую концентрацию антигенов в 1 прививочной дозеТг. тептаогорпутез В микроконидии Вакцину вводят кроликам внутримышечнодвукратно в дозе 0,5 смд. В качестве контро- ля для вакцинации 10 кроликов используют.вакцину иа штамма Тг. телтаргорлутез М 135. содержащую в 1 прививочной дозе 20 млн микроконидий в 1 смз, которую примеНПЮТ внутримышечно В 0513812 ЯГОДИЧНЫХ мышц Через 30 дней кроликов заражают накожно вирулентными культурами штаммов Тг. тептаргорлутез Не 251 и Тг. тептаогорпутез М 18. в течение 25 днейтрикофитией. а из очагов поражения выделены культуры вирулентнык штаммов. П р и м е р 7. 20 телят иммуниаируют вариантами вакцины Вермет по примеру 1 И 3 с ъонцентрациея антигенов в прививочной дозе по примеру 4. Каждой группе телят (10 голов вакцину применяют внутримышечно двукратно в объеме 1 см с интервалом 10-14 дней. Через 4 и 9 месяцев после второй иммунизации обо группы телят заражают вирулентными культурами штаммов Тг. уеггисовит. Мг 153 и Тг. тептаогорлутев Мг 251. В результате ни один теленок не заболел. Таким образом вакцина Вермет сохраняет стойкий иммунитет через 4 и 9 месяцев после заражения. Вакцина Е 5 ермет высокоэффективна против трихофитии животных. Вакцину Вернет с профилактической целью применяют двукратно с интервалом 10-44 дней в следующих дозах телятам от 14 дней рв 4 месяцев 1 смз. старше 5 месяцев 2 см . и мелкому рогатому скоту (овцы. козы) от 3 до 6 месяцев 0.5 смз. старше 6 месяцев 1 смз. кроликам массой 2.5-З.0 кг вводятпвно. что использование вакцины Верметспособствует образованию надежного иммунитета увсех иммунизированных кроликон. в то время как использованиеизвестной вакцины Ментввак не дает на дежного аффекта - 2 кролика из 10 заболелимый для иммунизации телятлечебной целью вакцину вводят больным животным двукратно с интервалом 114 дней в удвоенной дозировке. Использование вакцины Вернет в ветеринарной практике позволит повысить эффективность мероприятий по борьбе с трихофитией животных.лримеру 1 Вакцина Вермвт по примеру 2 Вакцина Бормот по примеру 3