Гидрохлорид 1-метил-4-фенилэтинил-4-циклопропанкарбонилоксипиперидина, обладающий антимикробной активностью

(51) 07 211/12 (2006.01) 07 211/14 (2006.01) 07 211/18 (2006.01) 61 31/445 (2006.01) 61 31/04 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН обладающему антимикробной активностью в отношении музейных штаммов микроорганизмов, в отношенииАТСС 25922,АТСС-ВАА-196,АТСС 10031,АТСС 700603,АТСС 6538-,39 иАТСС 10231. Задача изобретения заключается в расширении ассортимента средств с антимикробной активностью. Строение заявляемого соединения доказано методами ИК, данными элементного анализа.(72) Пралиев Калдыбай Джайловович Кулманов Мурат Есенгалиевич Ильин Александр Иванович Садырбаева Фарида Муратхановна Ахметова Гульмира Сериковна Ю Валентина Константиновна Исаева Улжалгас Бахытжановна Леонова Надежда Васильевна Мырзабаева Ауес Наурызбековна(73) Акционерное общество Институт химических наук им. А.Б. Бектурова Акционерное общество Научный центр противоинфекционных препаратов(57) Изобретение относится к органической химии и химии биологически активных соединений, а именно к новому соединению - гидрохлориду 1 метил-4-фенилэтинил-4 циклопропанкарбонилоксипиперидина, 31050 Изобретение относится к органической химии и химии биологически активных соединений, а именно, к гидрохлориду 1-метил-4-фенилэтинил-4 циклопропанкарбонилоксипиперидина, формулы обладающему антимикробной активностью в отношении музейных штаммов микроорганизмов. Наиболее близким известным структурным аналогом описываемого соединенияявляются 1-(2 этоксиэтил)-4-фенилэтинил-4 пропионилоксипиперидин /А.с. 1596707, кл. С 07211/48, 1995 г. 5, формулы Из используемых в настоящее время в качестве противоинфекционных средств наиболее близким по применению к заявляемому средству является стрептомицин /Машковский М.Д. Лекарственные средства, 1994, часть 2, с.375/. Недостатком применяемого препарата является его низкая активность против штаммов. Задача изобретения состоит в расширении ассортимента противоинфекционных лекарственных средств. Технический результат изобретения - повышение противоинфекционной активности в отношении штамма. Технический результат достигается новым соединением, описываемым формулой избытком циклопропанкарбонилхлорида в абсолютном диоксане при комнатной температуре приводит к образованию гидрохлорида 1-метил-4-фенилэтинил 4-циклопропанкарбонилоксипиперидина . Гидрохлорид заявляемого соединенияпредставляет собой белый кристаллический порошок с т.пл. 225-227 С (изопропанол),растворимый в воде, этаноле, ацетоне. Индивидуальность и строение заявляемого соединенияподтверждены данными элементного анализа, тонкослойной хроматографии и ИК спектроскопии. Пример 1. Гидрохлорид 1-метил-4-фенилэтинил 4-циклопропанкарбонилоксипиперидина 1,5 г (0,007 моль) 1-метил-4-фенилэтинил-4 гидроксипиперидинарастворяют в небольшом количестве абсолютного диоксана, затем к этому раствору приливают раствор 1,26 мл (0,014 моль) циклопропанкарбонилхлорида в абсолютном диоксане. При этом наблюдается разогревание реакционной смеси и изменение цвета раствора от светло-желтого до светло-коричневого цвета. Смесь оставляют при комнатной температуре на ночь. Отгоняют растворитель,остаток перекристаллизовывают из изопропанола. Получают 1,5 г (67,0 от теоретического) гидрохлорида 1 метил-4-фенилэтинил-4 циклопропанкарбонилоксипиперидина с т.пл. 225227 С,0,79 (А 23, элюент - диэтиловый эфир). Найдено,С 68,02 Н 7,04. 18222. Вычислено,С 67,59 Н 6,93. ИК спектр, см-11725 (С сл. эфирн.). Исследование биологической активности. Гидрохлорид 1-метил-4-3-(нафт-1-илокси)проп 1-ин-1-ил-4-циклопропанкарбонилоксипиперидинапод лабораторным шифром ПИП-47 изучен на противомикробную активностьв отношении музейных штаммов микроорганизмовАТСС 25922,АТСС-ВАА-196,АТСС 10031,АТСС 700603,АТСС 6538-,39,АТСС 10231. Задействованное оборудование.- система очистки воды 611 Измерительное оборудование прошло метрологическую аттестацию и поверку,испытательное оборудование - квалификацию. Материалы и методы исследования. Питательные среды и реактивы- метод Коха - определение жизнеспособности музейных культур взятых в исследование- оценка физиолого-биохимических свойств музейных культур взятых в исследование- макрометод двукратных серийных разведений на жидкой питательной среде - определение минимальной ингибирующей концентрации исследуемого вещества. Обоснование избранной схемы исследования Модель исследования включает в себя необходимый минимум тестов с различной степенью чувствительности, которые могут дать достоверную и объективную информацию о наличии антибактериальных свойств у заявляемого соединения/Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, Минздрав РФ,ИИА Ремедиум, - Москва, - 2000. - 679 с./. Все выбранные тесты являются адекватными с точки зрения получаемых в ходе их выполнения результатов. Кроме того, схема исследования проводится в соответствии с действующими на территории Республики Казахстан методическими рекомендациями и нормативными документами,утвержденными Государственными Фармакологическими комитетами Республики Казахстан рекомендации). Фарм. Гос. Ком. РК, - Алматы, 1997. - 22 с./. Результаты исследований 1. Подготовка музейных культур к исследованию реактивация,проверка жизнеспособности и контроль физиологобиохимических свойств Перед началом эксперимента микроорганизмы подверглись реактивации(оживлению) с последующим субкультивированием. Для определения жизнеспособности взятых в эксперимент микроорганизмов использовали метод Коха. Установлено, что все штаммы обладают хорошей жизнеспособностью превышающей 1011 КОЕ/мл. При контроле физиолого-биохимической активности доказано, что культуры соответствуют систематическому положению, стандартны, своих свойств в процессе хранения не изменили. 2. Определение минимальной ингибирующей концентрации (МИК) ПИП-47 Оценку минимальной ингибирующей концентрации (МИК) в отношении взятых в эксперимент микроорганизмов проводили по общепринятому методу двукратных серийных разведений в бульоне Мюллера-Хинтона. Для приготовления базового раствора ПИП-47 в концентрации 4000 мкг/мл, навеску 0,2 г растворили в 50 мл 0,9-ного раствора хлорида натрия. Далее готовили двукратные серийные разведения от 2000 мкг/мл до 2 мкг/мл (2000 мкг/мл, 1000 мкг/мл, 500 мкг/мл, 250 мкг/мл, 125 мкг/мл, 63 мкг/мл, 31 мкг/мл, 16 мкг/мл, 8 мкг/мл, 4 мкг/мл, 2 мкг/мл). В приготовленные разведения вносили свежеприготовленную суспензию микроорганизма в концентрации 106 КОЕ/мл. Контролем служила пробирка, содержащая питательную среду с тестируемым штаммом. Посевы инкубировали в термостате при 37 С в течение 18-24 ч. По истечении времени инкубации с каждого разведения произведен высев на чашки Петри содержащие агар Мюллера-Хинтона. Чашки Петри с посевами инкубировали при температуре 37 С в течение 1824 ч. МИК определяли по наименьшей концентрации ПИП-47, которая подавляла видимый рост тестируемого микроорганизма. В контроле наблюдался обильный рост тестируемых штаммов. Результаты определения МИК ПИП-47 представлены в таблице 1. Таблица 1 Данные по антимикробной активности ПИП-47 Штамм Шрифт соединения ПИП-47 антимикробной активностью ко всем взятым в эксперимент штаммам микроорганизмов. ПИП-47 3 обладает антимикробной активностью к музейным штаммамАТСС 25922,АТСС 10031 в концентрации 1000 мкг/мл, в отношении всех остальных штаммов микроорганизмов данное соединение проявляет активность в высокой концентрации 2000 мкг/мл. Стрептомицин активен в отношении грамотрицательных штаммов микроорганизмов, ,),эффективность его по отношениюсоставляет только 7082. Согласно руководству по экспериментальному(доклиническому) изучению новых фармакологических веществ тестируемое соединение может принять участие в дополнительных исследованиях по выявлению антимикробной активности на более широком спектре микроорганизмов. Описанное вещество синтезируется на основе доступного химического сырья, и оно перспективно с точки зрения создания на его основе лекарственного препарата. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Гидрохлорид 1-метил-4-фенилэтинил-4 циклопропанкарбонилоксипиперидина, формулы