Способ количественного определения макроэлементов Са и Mg в листьях крапивы двудомной

(51) 01 31/16 (2006.01) 61 36/00 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ определение комплексонометрическим методом,при этом,подготовку листьев крапивы осуществляют путем сжигания сырья, обработкой полученной золы водой очищенной (1100), затем обрабатывают адсорбентом углем активированным в количестве (5100) и в растворе ионы кальция и магния в концентрированном виде определяют в одной пробе комплексонометрическим методом при их совместном присутствии. Предлагаемый способ по сравнению с аналогом упрощает получение ионов кальция и магния за счет того, что исключен длительный этап кипячения лекарственного растительного сырья, который к тому же снижает точность определения содержания этих ионов. В связи с тем, что по известному способу получаемый для исследования комплексонометрическим методом раствор содержит примеси посторонних окрашенных пигментов, которые вызывают мутность и значительно снижают точность количественного определения. Поэтому предлагаемый способ количественного определения макроэлементов кальция и магния позволяет повысить точность определения и упростить методику определения.(72) Келимханова Сауле Есенкуловна Чекотаева Кларина Абиевна Сатаева Лариса Габбасовна(73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Казахский национальный медицинский университет им. С.Д. Асфендиярова Министерства здравоохранения Республики Казахстан(56) А.Л. Сорокина, Т.А. Скалозубова,А.И. Марахова. Определение кальция и магния в листьях крапивы двудомной //Фармация, 2013, 2,с.5-8(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ МАКРОЭЛЕМЕНТОВ С ИВ ЛИСТЬЯХ КРАПИВЫ ДВУДОМНОЙ(57) Изобретение относится к области фармакогнозии, а именно к разработке способов количественного определения кальция и магния в листьях крапивы. Способ включает количественного определения макроэлементов Са ив листьях крапивы двудомной,включающий подготовку к исследованию листьев крапивы, проведение выделения ионов Са ииз листьев крапивы и Изобретение относится к области фармакогнозии, а именно к разработке способов количественного определения кальция и магния в листьях крапивы двудомной. Определение содержания макроэлементов в лекарственном растительном сырье (Л) вызывает огромный интерес, т.к. высокая биологическая активность некоторых лекарственных растений обусловлена именно ролью отдельных химических элементов. Особый интерес вызывают макроэлементы кальция и магния, которые в организме участвуют в процессах передачи нервных импульсов, обеспечивают равновесие между процессами возбуждения и торможения в коре головного мозга. Недостаток этих ионов вызывает снижение функции щитовидной железы,остеопороз, рахит, панкреатит и др. заболевания. В настоящее время на фармацевтическом рынке РК предлагается широкий спектр химических синтетических препаратов, содержащих ионы кальция, но к сожалению, практически все они имеют противопоказания и могут вызывать серьезные побочные эффекты и реакции. Поэтому применение лекарственных растений, в которых макроэлементы находятся в достаточно большом количестве и биоусвояемой форме, может быть более эффективным для нормализации минерального баланса в организме. Одним из основных природных источников ионов кальция и магния являются листья крапивы двудомной,это самый широкодоступный,экономически выгодный источник. Кальций в листьях крапивы содержится в огромном количестве в цистолитах, это большие каменные мешки, пропитанные углекислым кальцием и растущие внутрь клетки. Цистолиты встречаются в клетках эпидермиса верхней и нижней сторон листа и отчетливо видны в микроскоп в виде больших округлых или овальных образований. К тому же в крупных жилках листа крапивы вдоль проводящих пучков идут тяжи клеток с друзами кальция оксалата, образуя длинные цепочки. Вторым важным ионом листьев крапивы является магний,который составляет основу строения зеленых пигментов -хлорофиллов в виде -порфиринового скелета. Таким образом, листья крапивы двудомной можно рассматривать как потенциальный природный источник ионов кальция и магния, и учитывая то, что в Государственной фармакопее 1 не приводится метод количественного определения,считаем целесообразным проводить стандартизацию листьев крапивы по содержанию ионов кальция и магния. В настоящее время основным методом определения макро и микроэлементов является атомно-абсорбционная спектроскопия. Метод основан на поглощении излучения оптического диапазона невозбужденными свободными атомами исследуемого образца. Данный метод находит применение и в анализе лекарственных растений и лекарственных форм, полученных из них. (С.А. Листов, Т.А. Непесов, Э.С. Сахатов. Содержание тяжелых металлов в настоях и отварах из 2 лекарственного растительного сырья. // Фармация.1992.- 4. с.37-41) Недостатками данного способа являются необходимость использования дорогостоящего оборудования, требующего высокой квалификации химиков- аналитиков, наличия дорогих стандартных образцов и набора ламп на каждый из элементов для получения сравнительных спектров поглощения. Таким образом, для проведения рутинного анализа этот метод является неоправданно дорогим и трудоемким. Наиболее близким к разработанному способу является комплексонометрический метод определения кальция и магния в листьях крапивы двудомной (А.А. Сорокина, Т.А. Скалозубова,А.И. Марахова. Определение кальция и магния в листьях крапивы двудомной. //Фармация - 2013.2, с.5-8). Определение ионов кальция и магния этим методом основано на способности ионов кальция и магния, выделенных из лекарственного сырья,образовывать комплексы с ЭДТА в стехиометрическом соотношении. Выделение ионов проводят экстракцией водой, очищенной при нагревании на кипящей водяной бане в течение 30 минут. Полученный экстракт фильтруют и в фильтрате проводят определение ионов кальция и магния титрованием раствором натрия ЭДТА в присутствии индикатора. Пример 1. Определение ионов кальция. Способ осуществляют следующим образом около 5-10 г лекарственного сырья крапивы двудомной помещают в колбу со шлифом,прибавляют 100 мл воды очищенной, колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 минут. Затем охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объем до метки. К полученному извлечению добавляют раствор натрия гидроксида для осаждения ионов магния в виде магния гидроксида так как они мешают определению. Полученный осадок отфильтровывают, фильтрат нейтрализуют соляной кислотой до 10-12, в коническую колбу вносят 25 мл полученного фильтрата, 25 мл воды очищенной, небольшое количество индикатора кислотного хром-темно синего и титруют 0,05 М раствором натрия ЭДТА до перехода красной окраски в сине-фиолетовую. Пример 2. Определение ионов магния. Способ осуществляют следующим образом около 5 г лекарственного сырья крапивы двудомной помещают в колбу со шлифом, прибавляют 100 мл воды очищенной, колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 минут. Затем охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объем до метки. В коническую колбу вносят 25 мл полученного фильтрата, 25 мл воды очищенной, аммиачного буфера до 10,небольшое количество индикатора пирокатехиного фиолетового и титруют 0,05 М раствором натрия ЭДТА до перехода зелено-голубой окраски в синефиолетовую. Содержание ионов магния проводят без осаждения ионов кальция,используя способность ионов магния образовывать цветные комплексы при 10 с пирокатехиновым фиолетовым. Существенными недостатками известного способа являются низкая точность количественного определения, обусловленная нечеткой фиксацией перехода окраски индикатора в точке эквивалентности. Причиной тому экранирующее действие сопутствующих окрашенных пигментов,выделяющихся в испытуемый раствор при экстракции листьев крапивы(значительная мутность и темно-зеленый цвет раствора, не исчезающие даже при неоднократном фильтровании через бумажный фильтр) невозможность концентрирования ионов и определение их в одной пробе при совместном присутствии. Задачей изобретения является разработка способа количественного определения ионов Са ив листьях крапивы двудомной, позволяющего повысить точность определения ионов Са ии упростить методику определения содержания этих ионов в листьях крапивы двудомной. Технический результат способ включает подготовку к исследованию листьев крапивы,проведение выделения ионов Са ииз листьев крапивы и определение комплексонометрическим методом, при этом, подготовку листьев крапивы осуществляют путем сжигания сырья, обработкой полученной золы водой очищенной (1100), затем обрабатывают адсорбентом углем активированным в количестве (5100) и в растворе ионы кальция и магния в концентрированном виде определяют в одной пробе при их совместном присутствии. Способ осуществляется следующим образом определение суммы ионов кальция и магния в одной пробе, проводят минерализацию листьев крапивы около 5-10 г сухим способом по методике ГФ 1 издания, 2 том, с.24. К полученной золе добавляют 20 мл кислоты хлороводородной и нагревают на водяной бане в течение 5 минут до полного растворения, затем прибавляют 5 г порошка активированного угля и тщательно перемешивают. Полученную смесь фильтруют через бумажный фильтр в коническую колбу вместимостью 100 мл(раствор А). Из полученного фильтрата берут 10 мл раствора в коническую колбу вместимостью 250 мл,вносят 5 мл аммиачного буфера с 10 и 5-7 капель индикатора кислотного хром темно-синего и медленно титруют раствором натрия ЭДТА 0,05 М до устойчивой голубой окраски. Параллельно проводят контрольный опыт. Определение массовой доли ионов кальция из полученного раствора А отбирают аликвотный объем 10 мл прибавляют к нему 3 мл раствора гидроксиламина и 3 мл раствора натрия цитрата,вносят 6 мл раствора натрия гидроксида и 5-7 капель индикатора кислотного хром темно-синего и быстро титруют раствором натрия ЭДТА 0,05 М до перехода окраски из малиново-фиолетовой в синюю. Объем натрия ЭДТА пошедший на титрование магния, определяют по разности объемов натрия ЭДТА пошедшего на титрование суммы кальция и магния и одного кальция. Обработка результатов 1. Массовую долю ионов кальция (1) ввычисляют по формуле С - молярная концентрация раствора ЭДТА,моль/мл 1-объем раствора ЭДТА, израсходованный на титрование контрольной пробы, мл- объем раствора ЭДТА, израсходованный на титрование кальция, мл 2- объем исследуемого раствора, взятый на титрование, мл- навеска сырья, взятая на определение, г 100- коэффициент пересчета в 100 г сырья 40,08 - атомная масса кальция, г 1. Массовую долю ионов магния (Х 2) ввычисляют по формуле 1-объем раствора ЭДТА, израсходованный на титрование контрольной пробы, мл- объем раствора ЭДТА, израсходованный на титрование суммы кальция и магния, мл 2- объем исследуемого раствора, взятый на титрование, мл 24,305 - атомная масса магния, г Остальные обозначения те же, что и в формуле Лекарственное Общее соединение растительное сырье ионов кальция и магния Предлагаемый способ по сравнению с аналогом упрощает получение ионов кальция и магния за счет того, что исключен длительный этап кипячения лекарственного растительного сырья, который Содержание ионов магния в снижает точность определения содержания этих ионов. В связи с тем, что по известному способу получаемый для исследования комплексонометрическим методом раствор 3 содержит примеси постороних окрашенных пигментов, которые вызывают мутность и значительно снижают точность количественного определения. Предлагаемый способ количественного определения макроэлементов кальция и магния позволяет повысить точность определения и упростить методику определения содержания этих ионов. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ количественного определения макроэлементов Са ив листьях крапивы двудомной,включающий подготовку к исследованию листьев крапивы, проведение выделения ионов Са ииз листьев крапивы и определение комплексонометрическим методом,отличающийся тем, что подготовку листьев крапивы осуществляют путем сжигания сырья,обработкой полученной золы водой очищенной(1100), затем обрабатывают адсорбентом углем активированным в количестве (5100) и в растворе ионы кальция и магния в концентрированном виде определяют в одной пробе комплексонометрическим методом при их совместном присутствии.