Вакцина против мыта лошадей

(51) 61 39/09 (2006.01) 61 39/02 (2006.01) 61 31/04 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ Технический результат,обеспечиваемый изобретением, выражается в получении стабильной,безвредной и высокоэффективной вакцины против указанной инфекции. Вакцина против мыта лошадей, включающая мытный антиген, Т-активин и бициллин, воду дополнительно содержит триметаприм,при следующем соотношении компонентов, мас. Инактивированная культура мытного стрептококка в концентрации 51010 КОЕ/л 8,0-10,0 Т-активин 15,0-20,0 бициллин с содержанием 30-40 млн ЕД 10,0-15,0 3 раствор триметаприма 1,0-1,5 дистиллированная вода остальное.(72) Бижанов Алим Байжанович Каратаев Болат Шайзадаевич Намет Айдар Мырзахметулы(73) Товарищество с ограниченной ответственностью Казахский научноисследовательский ветеринарный институт(54) ВАКЦИНА ПРОТИВ МЫТА ЛОШАДЕЙ Изобретение относится к области ветеринарии, в частности, к профилактике и терапии мыта лошадей. Известна вакцина против мыта лошадей,включающая мытный антиген, Т-активин и бициллин Патент РК 3681, кл. А 61 К 39/00, 1996. Недостатком известной вакцины является то, что у вакцинированных животных иммунитет сохраняется только в течение 6 месяцев. Задачей изобретения является получение вакцины против мыта лошадей, позволяющей повысить иммуногенность, уменьшить кратность введения, ускорить сроки выздоровления и исключить поствакцинальные осложнения. Технический результат,обеспечиваемый изобретением, выражается в получении стабильной,безвредной и высокоэффективной вакцины против указанной инфекции. Вакцина против мыта лошадей включает инактивированную культуру мытного стрептококка,в концентрации 51010 КОЕ, Т-активин, бициллин с содержанием 30-40 млн ЕД, воду, триметаприм, при следующем соотношении компонентов, мас.инактивированная культура мытного стрептококка, в концентрации 51010 КОЕ 8-10 Т-активин 150-200 бициллин с содержанием 30-40 млн ЕД 100-150 3 раствор триметаприма 10-15 дистиллированная вода остальное Штамм бактерий,используемый для изготовления инактивированной вакцины против мыта лошадей, депонирован в Лаборатории по изучению генофонда микроорганизмов ТОО КазНИВИ и обладает следующими свойствами.СМ-1, серогруппа С. Происхождение штамма бактерий. Штамм бактерий выделен из не вскрывшихся флюктуирующих подчелюстных лимфатических узлов больной мытом лошади в Актюбинской области, способ выделения - посев гноя на МПБ,МПА. Сравнен с типовым штаммом 13 БСК, коллекционный номер В-0231. Выделенный штамм характеризуется следующими признаками. Назначение штамма бактерий продуцирет гемолитический токсин, лейкоцидин, токсин общего действия, агрессин, гемолизирует эритроциты лошади и не лизирует эритроциты золотистых хомячков и кроликов. Состав среды и условия культивирования агар Хоттингера с добавлением 5-10 сыворотки крови лошади и 1 глюкозы. Морфолого-культуральные свойства. Рост на агаре Хоттингера при температуре 37 С,оптимальное- 1,2- 7,4, в течение 18-24 часов. Грамположительные бактерий мелкие, округлой формы, прозрачные гладкие, росинчатые, вязкой консистенции, сливающиеся колонии, трудно снимаемые петлей, при просмотре на свет прозрачные с голубоватым оттенком, при хранении в течение 2-4 сут колонии становятся сероватобелыми, непрозрачными, но сохраняют гладкие очертания. 2 Физиолого-биохимические свойства. Принадлежность к трофической группе прототроф. Типы катаболизма аэроб или факультативный анаэроб. Симбиотрофные отношения паразитизм. Источники углерода ферментирует глюкозу,сахарозу и мальтозу с образованием кислоты без газа, не ферментирует манит, сорбит, раффинозу,арабинозу, глицерин, галактозу, лактозу. Другие характерные физиологические особенности обмена образует индол, сероводород,не редуцирует лакмус, не свертывает молоко, не разжижает желатин. Маркерные признаки штамма гемолизирует эритроциты лошади и не гемолизирует эритроциты золотистых хомячков и кроликов. Способ, условия и состав сред для хранения. Лиофильно высушенный. Способ, условия и состав сред для размножения штамма агар Хоттингера с добавлением 5-10 сыворотки крови лошади и 1 глюкозы. Штамм бактерийСМ-1,серогруппа С, используемый для получения вакцины против мыта лошадей. Идентификацию штамма микроорганизмов проводят по основным морфологическим,культуральным и физиологобиохимическим свойствам,согласно определителя(1974,1984, 1997, справочные издания). Пример 1. Для приготовления вакцины против мыта лошадей культуру мытного стрептококка,полученную путем пассажей в МПБ и МПА,смешивают с 0,3 раствором триметаприма и ставят на инактивацию в термостат при 36-37 С в течение 18-20 ч. Полученную суспензию центрифугируют при 3000 об/мин в течение 25-30 мин, супернатант удаляют, а осадок бактерий разводят стерильной дистиллированной водой до концентрации 51010 КОЕ в 80-100 см 3 (по оптическому стандарту), добавляют 200 см Тактивина и бициллина, с содержанием 30-40 млн ЕД растворенного в 100-150 см дистиллированной воды, и доводят общий объем дистиллированной водой до 850 см, после чего к полученной смеси добавляют 10-15 г 3 раствора триметаприма и при постоянном помешивании доводят общий объем дистиллированной водой до 1 литра. Пример 2. Вакцину против мыта лошадей используют подкожно однократно при следующем соотношении компонентов,мас. инактивированная культура мытного стрептококка,в концентрации 51010 КОЕ/Л 8,0 Т-активин 15,0 бициллин с содержанием 30-40 млн ЕД 10,0 3 раствор триметаприма 1,0 дистиллированная вода остальное. Пример 3. Вакцину против мыта лошадей используют так же, как в примере 2 при следующих соотношениях компонентов,мас. инактивированная культура мытного стрептококка,в концентрации 51010 КОЕ/Л 9,0 Т-активин 18,0 бициллин с содержанием 30-40 млн ЕД 13,0 3 раствор триметаприма 1,3 дистиллированная вода остальное Пример 4. Вакцину против мыта лошадей используют так же, как в примере 2 при следующих соотношениях компонентов,мас. инактивированная культура мытного стрептококка,в концентрации 51010 КОЕ/л 10,0 Т-активин 20,0 бициллин с содержанием 30-40 млн ЕД 15,0 3 раствор триметаприма 1,5 дистиллированная вода остальное Пример 5. Иммуногенную активность вакцины определяют на 100 жеребятах. Заведомо здоровых жеребят разделяют на 10 групп по 10 голов в каждой, девять опытных, а десятая контрольная. Препараты вводят внутримышечно в области крупа, однократно, в дозе 0,1 см 3 на 1 кг массы животного. Через 2,6 и 12 месяцев иммунизированных и контрольных жеребят заражают вирулентной культурой мытного стрептококка. Результаты испытания представлены в таблице 2. Пример 6. Для определения терапевтической эффективности вакцины проводят эксперименты на 4 группах больных мытом жеребят, по 10 голов в каждой, три опытных и четвертая - контрольная. Жеребятам вакцину вводят внутримышечно,однократно, в дозе 0,2 см на 1 кг массы животного. На 6-7 сутки после введения вакцины у жеребят температура тела снизилась до нормы,восстановился аппетит, полностью рассосалась отечность подчелюстных лимфатических узлов и животные выздоровели, тогда как жеребята четвертой контрольной группы продолжали болеть клинической формой мыта. Результаты определения профилактической эффективности вакцины против мыта лошадей представлены в таблице 1. Из таблицы 1 следует, что на 60 день после введения иммунизирующих препаратов в первой группе остались в живых 95 мышей - 95, во второй и третьей группах получены аналогичные результаты, при 100 гибели мышей в четвертой группе. Результаты определения иммунизирующих свойств вакцины против мыта лошадей представлены в таблице 2. Из таблицы 2 следует, что при контрольном заражении на 2 месяц после введения вакцины в первой группе заболело мытом в легкой форме 2 жеребенка, в остальных группах заболели мытом в легкой форме по 1 жеребенку. При контрольном заражении на 12 месяц после введения вакцины во всех группах получены аналогичные результаты,при 100 заболевании контрольных животных. Использование вакцины против мыта лошадей однократно внутримышечно, в дозе 0,2 см 3 на 1 кг массы животного приводит к полному клиническому выздоровлению жеребят от мыта в течение 6-7 суток, т.е. в 3-4 раза сокращает сроки выздоровления, а в дозе 0,1 см 3 - предохраняет от заражения 90 привитых животных в течение 12 месяцев, а заболевшие жеребята переболевают мытом в легкой абортивной форме. Таблица 1 Результаты определения профилактической эффективности вакцины против мыта лошадей(на белых мышах) Группа Препараты Количество Срок проверки животных соотношение компонентов, белых мышей, иммунитета,доза и кратность введения гол. дни на 1 кг массы животного(масс.) 1 51010 КОЕ мытного 100 15 антигена - 8,0, 30-40 млн ЕД бициллина - 10,0,100 30 Т-активина- 15,0,3 раствора триметаприма 100 60- 1,0, однократно 2 51010 КОЕ мытного 100 15 антигена - 9,0, 30-40 млн ЕД бициллина - 13,0,100 30 Т-активина - 18,0,3 раствора триметаприма 100 60- 1,3, однократно 3 51010 КОЕ мытного 100 15 антигена - 10,0, 30-40 млн ЕД бициллина - 15,0,100 30 Т-активина - 20,0,3 раствора триметаприма 100 60 Результат Прцент заражения иммунных выжило, пало, гол. мышей гол. 95 Таблица 2 Результаты определения иммунизирующих свойств вакцины против мыта лошадей (на жеребятах) Группа животных Вакцина против мыта лошадей соотношение компонентов на 1 кг массы животного (масс.) 51010 КОЕ мытного антигена 8,0, 30-40 млн ЕД бициллина 10,0, Т-активина - 15,0, 3 раствора триметаприма - 1,0, однократно 510 КОЕ мытного антигена 9,0, 30-40 млн ЕД бициллина 13,0, Т-активина - 18,0, 3 раствора триметаприма - 1,3, однократно 51010 КОЕ мытного антигена 10,0, 30-40 млн ЕД бициллина 15,0, Т-активина - 20,0, 3 раствора трим етаприма - 1,5, однократно Контрольная группа, препараты не вводились ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ В акцина против мыта лошадей, включающая инактивированный мытный антиген, Т-активин,бициллин с содержанием 30-40 млн ЕД и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что в качестве инактивированного мытного антигена она содержит инактивированную культуру мытного стрептококка в концентрации 51010 КОЕ/л микробных клеток на 1 л, и дополнительно 3 Процент иммунных жеребят 86,6 раствор триметаприма при следующем соотношении компонентов, мас. инактивированная культура мытного стрептококка в концентрации 51010 КОЕ/л 8,0-10,0 Т-активин 15,0-20,0 бициллин с содержанием 30-40 млн ЕД 10,0-15,0 3 раствор триметаприма 1,0-1,5 дистиллированная вода остальное.