Штамм бактерий Вrucella abortus В-0474, используемый для приготовления диагностических препаратов

(51) 12 1/20 (2010.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к ветеринарной микробиологии и иммунологии, и может быть использовано для диагностики бруцеллеза животных. Известен диагностический препарат,включающий выращивание культуры 19 на питательной среде с последующим смывом, отмывание и суспензированис бруцелл,инактивацию полученной суспензии нагреванием и добавление буферного разбавителя Предварительный патент РК 5198, кл, А 61 К 39/10, 1997. Недостатком штамма 19 при изготовлении диагностических препаратов является недостаточное накопление бакмассы на питательной среде (эритрит-агаре). Задачей изобретения является получение слабовирулентного штаммадля приготовления диагностических препаратов. Технический результат,обеспечиваемый изобретением, выражается в сохранении стабильной-формы штаммапри длительном культивировании,с хорошими ростовыми свойствами бактериального газона.(57) Изобретение относится к области ветеринарии,в частности к ветеринарной микробиологии и иммунологии и может быть использовано для диагностики бруцеллеза животных. Технический результат,обеспечиваемый изобретением, выражается в сохранении стабильной-формы штаммапри длительном культивировании,с хорошими ростовыми свойствами бактериального газона. Штамм бактерийВ-0474 64,депонирован в Лаборатории Национальной коллекции депонированных штаммов микроорганизмов Государственного учреждения Национальный центр мониторинга, референции,лабораторной диагностики и методологии в ветеринарии Комитета государственной инспекции в агропромышленном комплексе Министерства сельского хозяйства Республики Казахстан,используемый для получения диагностических препаратов. Штамм бактерийВ-047464,депонирован в Лаборатории Национальной коллекции депонированных штаммов микроорганизмов Государственного учреждения Национальный центр мониторинга, референции,лабораторной диагностики и методологии в ветеринарии Комитета государственной инспекции в агропромышленном комплексе Министерства сельского хозяйства Республики Казахстан,используемый для получения диагностических препаратов. Штамм получен путем ступенчатого отбора колоний в -форме по Уайт-Вильсону. Полученный штамм бактерийВ 047464, депонирован в Лаборатории Национальной коллекции депонированных штаммов микроорганизмов Государственного учреждения Национальный центр мониторинга,референции,лабораторной диагностики и методологии в ветеринарии Комитета государственной инспекции в агропромышленном комплексе Министерства сельского хозяйства Республики Казахстан.(72) Калыкова Гульжан Кентаевна Сейдахметова Роза Джаровна Зинина Надежда Николаевна Турлубеков Сейльбек Айдарович Еспембетов Болат Аманбаевич Кожакова Ботагоз Кабышевна Гуляева Оксана Владимировна Турсункулов Алдияр Заханович(73) Государственное учреждение Национальный центр мониторинга, референции, лабораторной диагностики и методологии в ветеринарии Комитета государственной инспекции в агропромышленном комплексе Министерства сельского хозяйства Республики Казахстан(56) Предварительный патент РК 5198, кл, А 61 К 39/10, 1997(54) ШТАММ БАКТЕРИЙ ВВ-0474, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ Штамм характеризуется следующими признаками, которыми обладает культура. Морфологические признаки. Бактерии штамма грамотрицательные, овоиды, красные от 0,4-2,50,40,6 мкм, неподвижные, специализированные клетки не образуют,Культуральные свойства. На эритрит агаре с добавками вырастают янтарные, прозрачные,выпуклые колонии, круглые с гладкими краями. Накопление бакмассы наблюдается через 24-48 часов выращивания. В питательном бульоне образуют равномерную муть с пристеночным кольцом. Аэроб. Оптимальная температура выращивания 37 С при рН 6,8-7,2. Биохимические свойства. Обладает уреазной,оксидазной и каталазной активностью. Антигенпан структура. Содержит типичный набор антигенных детерминант, характерных дляв -форме. Патогенные свойства. При определении вирулентности по методу Коротича-Галота установлено, что штаммВ-047464 имеет слабую вирулентность. Пример. Питательной средой для выращивания бакмассы в целях приготовления диагностического препарата служит биофабричная Питательная среда для выделения и культивирования бруцелл сухая (эритрит-агар) с добавлением глюкозы,глицерина, дрожжевого экстракта и -цистина. Данную среду растворяют в дистиллированной воде, доводят до кипения, кипятят 2-3 мин до полного растворения агара, затем вливают глицерин и через 1 минуту засыпают глюкозу, дрожжевой экстракт и -цистин, доводят до кипения и фильтруют через ватно-марлевый фильтр,разливают в колбы Тартаковского и автоклавируют в течение 20 мин при температуре 121. После автоклавирования колбам придают горизонтальное положение до застывания агара. Для контроля стерильности их помещают на 48 часов в термостат при температуре 37 С. Выращенную и проверенную на чистоту матриксную культуру в объеме 5-10 см 3 100 млрд взвеси микробных тел с соблюдением условий стерильности засевают в колбы Тартаковского с твердой питательной средой. Культуру, засеянную в колбы, выращивают 4872 часа в термостате при температуре 37 С, затем проводят смыв физиологическим раствором хлористого натрия. Взвесь бруцелл 2-3 раза отмывают от примесей питательной среды с помощью центрифугирования при 5000 об/м и н в течение 30-40 мин доводят до 100 млрд м.к. концентрации в физиологическом растворе и расфасовывают по 20,0 см 3 в стерильные флаконы,которые закрывают резиновыми пробками и обкатывают металлическими колпачками. Хранят диагностический препарат (антиген) при температуре 4 С. Предложенный штамм эпизоотически актуален для Республики Казахстан, а изготовленный из штаммаВ-047464 антиген является более эффективным в сравнении с противопоставленным 19. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Штамм бактерийВ-0474,депонирован в Лаборатории Национальной коллекции депонированных штаммов микроорганизмов Государственного учреждения Национальный центр мониторинга, референции,лабораторной диагностики и методологии в ветеринарии Комитета государственной инспекции в агропромышленном комплексе Министерства сельского хозяйства Республики Казахстан, под номером 64, используемый для приготовления диагностических препаратов.