Способ коррекции постреанимационной болезни у крыс

(51) А 61 К 35/30 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(57) Изобретение относится к медицине, в частности, к клеточным биотехнологиям. Задачей данного изобретения является разработка способа, позволяющего улучшить течение постреанимационного периода у крыс-самцов путем включения в комплекс реанимационных мероприятий внутрибрюшинного введения взвеси нейроцитов коры головного мозга плодов крыс и антиортостатического положения животного. Предлагаемый способ является эффективным,так как включение в комплекс реанимационных мероприятий внутрибрюшинного введения в момент начала ритмичной сердечной деятельности взвеси фетальных нейроцитов и антиортостатического положения животного позволяет улучшить течение постреанимационного периода у крыс-самцов.(56) Семченко В.В., Ерениев С.И., Маковецкий К.К. Порог судорожной активности мозга и показатели высшей нервной деятельности в постреанимационном периоде при внутримозговой аллотрансплантации ткани эмбрионального неокортекса // Бюлл. эксперим. биол. и медицины. 1996. 2. с.234-237(54) СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ПОСТРЕАНИМАЦИОННОЙ БОЛЕЗНИ У КРЫС 21664 Изобретение относится к медицине, в частности,к реаниматологии. Известен способ коррекции болезни оживленного организма (В.В. Ленский, М.С. Богушевич,В.В. Гальчин, В.А. Востриков Краниоцеребральное перераспределение крови и устойчивость организма к гипоксии при клинической смерти от асфиксии//Материалы международного симпозиума Центральная нервная система и постреанимационная патология организма, Москва, 1989.-с. 68). Для восстановления нарушенных функций организма в постреанимационном периоде собакам, перенесшим клиническую смерть от механической асфиксии продолжительностью 5-8 минут, моделировали главный фактор невесомости- кранионаправленное перераспределение циркуляции жидких сред организма животное в течение часа от начала оживления находилось в антиортостатическом положении -90. Кроме того, во время реанимации осуществлялось внутриартериальное нагнетание реополиглюкина с адреналином. Данный способ является малоэффективным, так как в комплекс реанимационных мероприятий не введены препараты, обладающие полифункциональными свойствами и средства, обладающие высокой биологической активностью. Кроме того,эффективность данного способа на доказана на других видах животных и при менее продолжительных сроках клинической смерти Известен способ коррекции постреанимационной болезни (Семченко В.В., Ерениев С.И., Маковецкий К.К. Порог судорожной активности мозга и показатели высшей нервной деятельности в постреанимационном периоде при внутримозговой аллотрансплантации ткани эмбрионального неокортекса //Бюлл. эксперим. биол. и медицины.1996.- 2. - с.234-237). После моделирования клинической смерти и последующей реанимации в мозг оживленных крыс вводятся кусочки коры головного мозга плодов крыс 15-18 дневной гестации. Данный способ является, все же,малоэффективным, так как введение кусочков коры головного мозга плодов крыс осуществляется в более поздние сроки развития постреанимационной болезни,так как наиболее выраженные терапевтические эффекты отмечаются при использовании интенсивных мер в первые 60 минут от начала оживления. Кроме того, введение клеточных трансплантатов в мозг сопровождается значительной травматизацией, что усугубляет течение постреанимационного периода. Учитывая недостатки вышеперечисленных способов мы предложили свой способ коррекции постреанимационной болезни в эксперименте. Задачей настоящего изобретения является разработка способа, позволяющего улучшить течение постреанимационного периода у крыс-самцов путем включения в комплекс реанимационных мероприятий внутрибрюшинного введения взвеси нейроцитов коры головного мозга плодов крыс и антиортостатического положения животного. Способ осуществляется следующим образом. 2 Крысам-самцам моделировали 4-минутную клиническую смерть от механической асфиксии по методу Н.В. Шима (Шим Н.В. Экспериментальная модель реанимации белых крыс после клинической смерти после асфиксии и влияние экзогенного гепарина на продолжительность клинической смерти // Патогенез и экспериментальная терапия терминальных состояний. - Омск, 1979.-с.57-62). Затем крысам с началом ритмичной сердечной деятельности внутрибрюшинно, в растворе Хенкса вводили взвесь фетальных нейроцитов, приготовленную из кусочков коры головного мозга плодов крыс 15-18 дневной гестации. Объем кусочков составлял в среднем 1 мм 3. Количество вводимых кусочков определяли из следующего расчета 1 кусочек на 25 г массы животного. Животным контрольной группы вводили соответствующее количество раствора Хенкса. В последующем в течение 1 часа животные находились в антиортостатическом положении - 90, когда циркуляция жидких сред организма осуществлялась в краниоцеребральном направлении. Регистрировали время возобновления основных жизненных функций. Для оценки эффективности нейротрансплантаций в подопытных группах мы изучили динамику показателя общего состояния (Лысенков С.П., Корпачев В.Г., Тель Л.З. Балльная оценка общего состояния крыс, перенесших клиническую смерть // Клиника, патогенез и лечение неотложных состояний Науч. труды.- Новосибирск, 1982.-с.8-13) у крыс через 0,5, 1, 3, 6 и 24 часа восстановительного периода после оживления. Полученные результаты мы сравнивали с фоновыми показателями, а также между экспериментальными группами ( группа- контрольная,группа-подопытные животные, которым с началом ритмичной сердечной деятельности вводилась взвесь фетальных нейроцитов). Эксперименты выполнены на 29 крысах-самцах в возрасте 12 месяцев. Скорость возобновления основных жизненных функций в контрольной группе животных была следующей. Ритмичная сердечная деятельность регистрировалась через 1,130,28 минут, появление первого вдоха на 4,011,29 минуте, роговичный рефлекс определялся через 5,871,09 минут. Через 0,5 часов после начала оживления показатель общего состояния (ПОС) равнялся 56,000,57 баллам. Дыхание было аритмичное, с участием вспомогательных мышц спины и плечевого пояса, рефлекс переворачивания при положении на спине у крыс отсутствовал либо был слабо выражен, удерживать физиологическую позу животные не могли. На звуковой раздражитель реакция была снижена. Отмечался гипертонус мышц верхних и нижних конечностей. Определение поведенческих реакций, зрения, отношения к воде и пище было затруднено из-за тяжести состояния животных. Температура тела снижалась и составляла 32,971,60 С при средней исходной температуре - 35,700,32 С (р 0,001). В последующие 30 минут ПОС составлял 44,002,61 баллов, что было значимо меньше(р 0,001) фоновых данных (30 минута постреанимационного периода). Темп восполнения неврологического дефицита был замедлен. У более чем половины крыс дыхание оставалось учащенным. В ответ на болевой и звуковой раздражители крысы отвечали незначительной двигательной реакцией. Физиологическую позу животные удерживать не могли. К данному временному промежутку температура достоверным образом не различалась с исходными цифрами (р 0,05). Данный уровень температурного гомеостаза сохранялся до 24 ч постреанимационного периода (ПРП). Спустя 3 часа с момента начала оживления ПОС составлял 31,422,38 баллов (р 0,001). Наблюдалось улучшение неврологического статуса. Крысы могли удерживать физиологическую позу, но были гипоактивны, при попытке движения отмечалась выраженная атаксия. У большинства животных появилось зрение. К 6-му часу восстановительного периода ПОС составлял 23,421,55 баллов (р 0,001). Крысы попрежнему были гипоактивны, при попытке передвижения отмечалась атаксия. Ответ на болевой и шумовой раздражители был адекватным. Через 24 ч от начала реанимации у 70 крыс отмечались клонико-тонические судороги. ПОС составил 10,001,38 баллов (р 0,001). Животные были неопрятными, на действия экспериментатора отвечали агрессивными реакциями. В подопытной группе скорость восстановления витальных функций значимо не различалась по сравнению с контролем. К 30-й минуте постреанимационного периода ПОС составил 51,851,06 баллов, что было достоверно меньше,чем в контроле (р 0,01). Около 80 крыс слабо реагировали на звуковой и болевой раздражители. Более быстрый, по сравнению сгруппой, темп восстановления неврологического статуса сохранялся до 24 ч ПРП. У 80 крысгруппы к 3 му часу ПРП появлялось зрение. На звуковой и болевой раздражители животные реагировали адекватно. Начиная с 6-го ч наблюдения отмечалось более ускоренное, в среднем в 2 раза, восполнение темпов неврологического дефицита. Крысыподопытной группы были более подвижны, чем животные контрольной группы. Быстрее восстанавливалась адекватная реакция на болевой и слуховой раздражители. Судорожный синдром был менее выражен. К первым суткам восстановительного периода температура тела регистрировалась на цифрах, значимо больших по сравнению с исходными значениями и с параметрами,зарегистрированными в контроле (36,360,39 С,р 0,01). Показатель выживаемости был выше, чем у нелеченных крыс, однако данное различие было недостоверным (76,911,86 вгруппе и 87,508,26 вогруппе, р 0,05). Таким образом, по результатам нашего исследования можно сделать вывод о том, что включение в комплекс реанимационных мероприятий внутрибрюшинного введения в момент начала ритмичной сердечной деятельности взвеси фетальных нейроцитов и антиортостатического положения животного позволяет улучшить течение постреанимационного периода у крыс-самцов. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ коррекции постреанимационной болезни,включающий моделирование клинической смерти и реанимирование, отличающийся тем, что крысам с началом ритмичной сердечной деятельности внутрибрюшинно вводят взвесь фетальных нейроцитов и крысы в течение часа находятся в антиортостатическом положении.