Способ выявления бактерионосительства при бруцеллёзе крупного рогатого скота

(51) 61 39/10 (2006.01) 01 33/53 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ специфичности, чувствительности способа и ускоренном выявлении бруцеллеза крупного рогатого скота. Способ выявления бактерионосительства при бруцеллзе крупного рогатого скота, включающий однократное внутримышечное введение животным специфического бруцеллзного препарата,проведение иммунологических исследований и оценку бактерионосительства по их результатам,через 30 минут после введения специфического бруцеллзного препарата, вводят внутримышечно однократно раствор для инъекций, в виде смеси водного раствора формальдегида 36,5-ной концентрации и раствора натрия хлорида 0,85-ной концентрации при соотношении весовых частей растворов 1250 соответственно, при этом в качестве специфического бруцеллзного препарата используют бруцеллин,который вводят внутримышечно телятам молозивного возраста в дозе 3,0 см 3 на голову, остальному поголовью крупного рогатого скота в дозе 5,0 см 3, раствор для инъекций всем возрастным группам вводят внутримышечно в дозе 5,0 см 3 на голову, затем через 21 сутки проводят серологические исследования животных и дают оценку их бактерионосительства.(72) Султанов Ахметжан АкиевичЛаскавый Владислав НиколаевичБарамова Шолпан Аузаровнабутлп спенПанферов Владимир ИвановичМырзалиев Ахан ЖахангеровичВолков Денис СергеевичОспанов Ержан КалиолдиновичМорозов Сергей МихайловичАлпысбаева Сабира ЕгизбаевнаГалкина Ольга Александровна(73) Товарищество с ограниченной ответственностью Казахский научноисследовательский ветеринарный институтГосударственное научное учреждение Саратовский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук(54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ БАКТЕРИОНОСИТЕЛЬСТВА ПРИ БРУЦЕЛЛЗЕ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА(57) Изобретение относится к области ветеринарии,в частности, к диагностике инфекционных болезней животных. Технический результат,обеспечиваемый изобретением,выражается в повышении Изобретение относится к области ветеринарии, в частности, к диагностике инфекционных болезней животных. Известен способ выявления бактерионосительства при бруцеллезе крупного рогатого скота,включающий постановку аллергической реакции с помощью бруцеллина ВИЭВ, путем внутрикожного введения препарата в дозе 0,2 см 3 (Наставление по диагностике бруцеллза животных, утв. Минсельхозом РФ 29.09.200313-5-02/0850, введнное в действие с 1 января 2004 года). Однако, данный способ применим только для невакцинированных против бруцеллза животных, в частности, свиней. Наиболее близким к заявляемому является способ выявления бактерионосительства при бруцеллзе у крупного рогатого скота, включающий однократное внутримышечное введение животным специфического бруцеллзного препарата,проведение иммунологических исследований и оценку бактерионосительства по их результатам(Патент РФ 2008918, кл. А 61 39/00, опубл. 1994). Недостатком указанного способа является то, что он может использоваться только на невакцинированных против бруцеллза животных,кроме того введение вакцины из штамма 82 приводит к усилению аллергических реакций у них и не может применяться на вакцинированном поголовье. Задачей изобретения является повышение эффективности выявления бактерионосительства при латентном течении бруцеллзной инфекции у крупного рогатого скота. Технический результат,обеспечиваемый изобретением,выражается в повышении специфичности, чувствительности способа и ускоренном выявлении бруцеллеза крупного рогатого скота. Способ выявления бактерионосительства при бруцеллезе крупного рогатого скота, включающий однократное внутримышечное введение животным специфического бруцеллзного препарата,проведение иммунологических исследований и оценку бактерионосительства по их результатам,через 30 минут после введения специфического бруцеллзного препарата, вводят внутримышечно однократно раствор для инъекций, в виде смеси водного раствора формальдегида 36,5-ной концентрации и раствора натрия хлорида 0,85-ной концентрации при соотношении весовых частей растворов 1250 соответственно, при этом в качестве специфического бруцеллзного препарата используют бруцеллин,который вводят внутримышечно телятам молозивного возраста в дозе 3,0 см 3 на голову, остальному поголовью крупного рогатого скота в дозе 5,0 см 3, раствор для инъекций всем возрастным группам вводят внутримышечно в дозе 5,0 см 3 на голову, затем через 21 сутки проводят серологические исследования животных и дают оценку их бактерионосительства. 2 Предлагаемый способ осуществляется следующим образом. Пример 1. Приготовление раствора для инъекций. Для приготовления раствора для инъекций берут 36,5-ный медицинский раствор формальдегида и раствор натрия хлорида 0,85-ной концентрации при соотношении весовых частей растворов 1500 соответственно. К 0,2 см 3 36,5-ного медицинского раствора формальдегида добавляют стерильный 99,8 см 3 0,85-ный физиологический раствор хлорида натрия. Смесь растворов тщательно перемешивают и хранят в темном месте при температуре 15-35 С. Специфический бруцеллезный препарат является аллергеном и представляет собой стерильную прозрачную жидкость коричневато-жлтого цвета без опалесценции,который содержит специфические вещества белковой природы,извлечнные из бруцелл. Пример 2. Всем животным, в том числе и молодняку, начиная с 2-х дневного возраста, как иммунизированным против бруцеллза, так и неиммунизированным, вводят внутримышечно бруцеллин, а через 30 минут - раствор для инъекций в дозе 5,0 см 3 на голову. При этом, молодняку молозивного возраста бруцеллин вводят внутримышечно в дозе 3,0 см 3 на голову, а взрослому поголовью - в дозе 5,0 см 3 на голову. Через 10 и 28 дней после введения препаратов проводят серологические исследования. Пример 3. Для выявления отсутствия токсического действия, раствор для инъекций вводят внутримышечно белым мышам в дозах 5,0 25,0 50,0 см 3/кг, с содержанием 0,2 см 3 раствора 36,5-ного формальдегида и 99,8 см 3 0,85 раствора хлорида натрия и методом пробитанализа поиопределяют токсичность и устанавливают оптимальную концентрацию формальдегида в растворе. В результате препарат в дозе 10 раз превышающий концентрацию готовой лекарственной формы не оказала существенного влияния на белых мышей. Полученные данные свидетельствуют о низкой токсичности раствора для инъекций на основе малых концентраций формальдегида. Пример 4. Опыты проводились в крестьянском хозяйстве Аккольского района Акмолинской области на крупном рогатом скоте. Животные были сформированы в 2 группы. 1 группа состояла из 100 голов взрослых животных, не реагирующих на бруцеллез, (коров и телят прошлого года) и 2-х телят в возрасте до 9 дней, родившихся от здоровых животных. Взрослым животным вводят однократно внутримышечно каждому по 5,0 см 3 бруцеллина, а через 30 мин - по 5,0 см 3 раствора для инъекций. Телятам препарат вводят также однократно внутримышечно по схеме 3,0 см 3 бруцеллина, а через 30 мин - 5,0 см 3 раствора. 2 группа состояла из 58 бычков разных возрастов,которым вводят однократно внутримышечно каждому по 5,0 см 3 бруцеллина, а через 30 мин - по 5,0 см 3 раствора для инъекций. Серологические исследования коров проводят через 10 и 28 дней, а быков и телят через 28 дней после введения препаратов в реакции агглютинации,реакции связывания комплемента,реакции длительного связывания комплемента, постановки роз-бенгал пробы и путм постановки иммуноферментного анализа. Для доказательства эффективности достигаемого результата проводят серологические исследования до формирования иммунитета, через 10 дней после обработки животных препаратами и спустя 28 дней после. Результаты серологических исследовании крупного рогатого скота на бруцеллз приведены в таблице 1. Из таблицы 1 видно, что из 100 здоровых коров,исследованных на бруцеллез после введения препаратов, реагировало по всем серологическим тестам при первом исследовании 28 голов (28), а при повторном - 30 (30). Данное стадо коров до введения препаратов числилось благополучным по бруцеллезу,т.е. при предварительном диагностическом исследовании животные не реагировали на бруцеллез. Появление 28 положительных показаний серологических тестов при исследовании заведомо здоровых коров после первичного и 30 положительных случаев после вторичного введения препаратов обусловлено действием специфического бруцеллезного аллергена совместно с раствором для инъекций на основе малых концентраций формальдегида, что, в конечном итоге, способствовало провокации латентно протекающих форм бруцеллезной инфекции в организме животных. Использование способа выявления бактерионосительства при бруцеллезе крупного рогатого скота позволит точно поставить диагноз,своевременно принять необходимые меры по изоляции больных животных, не допустить дальнейшее рассеивание бруцеллзной инфекции и вовремя оздоровить неблагополучные хозяйства от этой болезни. Таблица 1 Результаты серологических исследований крупного рогатого скота на бруцеллз Вид и возраст животных Коровы здоровые Бычки здоровые Телята до 9 дней,рожденные от здоровых животных Позитивные показания серологических тестов РБП РА РДСК ИФА РБП РА РДСК ИФА Всего абс/ через 10 дней после иммунизации через 28 дней после иммунизации 14 6 18 28 27 16 22 30 30/30 не иссл. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ выявления бактерионосительства при бруцеллзе крупного рогатого скота, включающий однократное внутримышечное введение животным специфического бруцеллзного препарата,проведение иммунологических исследований и оценку бактерионосительства по их результатам,отличающийся тем, что дополнительно через 30-40 минут после введения специфического бруцеллзного препарата вводят внутримышечно однократно раствор для инъекций в виде смеси водного раствора формальдегида 36,5-40-ной концентрации и изотонического раствора натрия хлорида 0,85-0,95-ной концентрации при соотношении весовых частей растворов 1250, а в качестве специфического бруцеллзного препарата используют бруцеллин, при этом бруцеллин вводят в дозе 2,5-5,0 мл на голову, раствор для инъекций - в дозе 4-6 мл на голову, причм препараты вводят иммунизированным и неиммунизированным против бруцеллза животным всех возрастных групп, а оценку бактерионосительства осуществляют по результатам серологических исследований. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что молодняку молозивного возраста бруцеллин вводят в дозе 2,5-3,0 мл на голову 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что взрослому поголовью бруцеллин вводят в дозе 4,5-5,0 мл на голову 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что серологические исследования проводят через 10-28 дней после введения препаратов.