Штамм “мтм-нисхи” вируса контагиозной эктимы овец и коз, используемый для приготовления вирусвакцины

КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(54) ШТАММ МТМ-НИСХИ ВИРУСА КОНТАГИОЗНОЙ ЭКТИМЫ ОВЕЦ И КОЗ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ВИРУСВАКЦИНЫ(57) Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии. Штамм МТМ-НИСХИ вируса контагиозной эктимы овец и коз используется в производстве вакцины. Вакцина, изготовленная с применением данного штамма, создает иммунитет у 90-100 привитых животных.(72) Мамадалиев Сейдигапбар Мамадалиевич Троицкий Евгений Николаевич Мамбеталиев Муратбай Баракбаев Кайнар Базаркулович Хайруллин Берик Мухитович Зайцев Валентин Лукьянович(73) Дочернее государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности Республиканского государственного предприятия на праве хозяйственного ведения Национальный центр биотехнологии Республики Казахстан Министерства образования и науки Республики Казахстан 10106 Изобретение относится к ветеринарной вирусологии. Известен производственный штамм Л вируса контагиозной эктимы овец и коз (Иманов Э.Д., Аденова А.А., Хандуев Ц.Ц., Салидиной Б.С. Биология и биотехнология вируса орфа. Бишкек Илим, 1993,с. 136), используемый при производстве вакцины в Кыргызской Республике и обладающий биологической активностью не выше 10 600 ИД 5 О/см 3 и индуцирующий иммунитет у 70 привитых животных. Предложенный штамм МТМ-НИСХИ вируса контагиозной эктимы овец и козП 8-98 Д использован для приготовления сухой живой вакцины против контагиозной эктимы овец и коз. Штамм вируса обладает культуральными свойствами, высокой иммуногенной активностью и безвредностью для овец и коз. Маркерной характеристикой штамма МТМНИСХИ вируса контагиозной эктимы овец и коз является признак Прививаемости - пустулообразующая активность и реактогенность вируса, признак Иммуногенности - высокая иммуногенность в отношении овец и коз независимо от возраста, а также ТС - признак, способность вируса репродуцироваться в первичных и перевиваемых культурах клеток, и имеет выраженные культуральные свойства. Генетические свойства штамма Стабильность(постоянные) и не подвержены реверсии при пассировании на животных или в культуре клеток. При проведении сравнительных изучений с использованием рестриктазы -, для дифференциации рестрикционных характеристик штамма МТМ-НИСХИ с другими изученными штаммами-, - и . Все представленные штаммы имеют индивидуальные рестрикционные характеристики и имеют различное число фрагментов и их молекулярные размеры. Число фрагментов штамма МТМ-НИСХИ равен 10 рестриктов, а штаммов -, - иравен 7-8 рестриктов, данные результаты говорят о значительной генетической гетерогенности штаммов и изолятов полученных из различных географических регионов, что позволяет их дифференцировать. Секвенирование и последующий анализ участка ВЗ-гена штаммов МТМ-НИСХИ, А-1 и НИСХИ-ЛКВсММ-97 также позволили дифференцировать штаммы вируса контагиозной эктимы овец и коз. Гомология составляет штамм МТМНИСХИ - А-1 - 99 МТМНИСХИ - НИСХИЛКВсММ-97 - 92. Антигенные свойства Животные, иммунизированные штаммом МТМ-НИСХИ вируса контагиозной эктимы овец и коз после вакцинации приобретают иммунитет сроком на 8 месяцев. Основные условия хранения и поддержания штамма в жизнеспособном состоянии Штамм МТМ-НИСХИ вируса контагиозной эктимы овец и коз хранят в лиофилизированном виде при температуре минус 40 С, освежают и проверяют через каждые 3 года в организме 1-10 дневных ягнят и в культуре клеток кожи эмбриона овцы. 2 Штамм получен в результате пассирования в культуре клеток кожи эмбриона овцы эпизоотического вируса, штамма НИСХИ-ЛКВсММ-97, выделенного от больных эктимой ягнят на территории Кордайского района в совхозе Алматинский. Аттенуированный штамм МТМ-НИСХИ получен в декабре 1999 г., относится к семейству ,родуи депонирован 22.12.98 г. в музее (банке) микроорганизмов Научно-исследовательского сельскохозяйственного института Национального центра по биотехнологии Республики Казахстан под регистрационным номером П 8-98/Д. Штамм МТМ-НИСХИ вируса контагиозной эктимы овец и коз выращивают в первичнотрипсинизированной культуре клеток кожи овцы или субкультуре. В качестве ростовой и поддерживающей среды используется среда ПСП (полусинтетическая среда пристеночная). Максимальное накопление вируса происходит при заражении культур клеток 3-4 суточного возраста в дозе 0,1 ТЦЦ 5 О на клетку и культивировании вируса роллерным способом при температуре 37 С в течение 3-5 суток. При соблюдении данных условий культивирования биологическая активность вируса в культуре клеток составляет 107,0 ТЦД 5 О/см 3. Иммуногенность. Иммунизация овец методом скарификации вирусвакциной из штамма МТМНИСХИ в дозе 5-104,0 ТЦД 50 вызывает образование напряженного иммунитета против контагиозной эктимы овец и коз. Все иммунизированные животные оставались клинически здоровыми в течение 21 суток наблюдения после заражения эпизоотическим вирусом при 100 -ной заболеваемости контрольных ягнят. Безвредность и реактогенность. Вирусвакцина культуральная сухая из штамма МТМ-НИСХИ полностью безвредна и ареактогенна, так как у привитых ягнят не обнаружены в течение 14 суток наблюдения клинические признаки контагиозной эктимы после введения дозы вакцины, превышающей полевую в 10 раз. Вакцина, изготовленная с применением данного штамма, индуцирует иммунитет у 90-100 привитых животных. Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения. Вирусвакцина сухая культуральная против контагиозной эктимы овец и коз из штамма МТМНИСХИ, Технические условия (ТУ 640 РК 38934366-РГКП-11-99) утвержденные Главным государственным ветеринарным инспектором Директором Департамента ветеринарии МСХ Республики Казахстан и зарегистрированная 21.10.2004 г. 010/000031 в Жамбылском управлении Комитета по стандартизации, метрологии и сертификации Министерства индустрии и торговли РК. Вакцина зарегистрирована в Республике Казахстан и получено свидетельство РК-ВП-1-ВВЭ-1-2000. В 2002 году препарат перерегистрирован до 11.12.2007 г. Согласно ТУ для приготовления вирусвакцины используется штамм МТМ-НИСХИ. По государственному заказу для профилактики заболевания в 10106 Казахстане, за последние 5 лет институтом было произведено и реализовано 8904874 доз препарата. Со стороны Министерства сельского хозяйства рекламаций и претензий к качеству препарата не поступало. На основе штамма МТМ-НИСХИ разработан Набор препаратов для лабораторной диагностики контагиозной эктимы овец и коз и идентификации возбудителя болезни методами реакции диффузионной преципитации и иммуноферментного анализа,Технические условия (ТУ 3100 РК-38934366-РГКП 23-01)утвержденные Главным государственным ветеринарным инспектором Директоров Департамента ветеринарии МСХ Республики Казахстан и зарегистрированная Южным филиалом РГП КазИнСТ Госстандарта РК 022/001349 от 05.12.2000 г. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Штамм МТМ-НИСХИ вируса контагиозной эктимы овец и коз П 8-98 Д НИСХИ, используемый для приготовления вирусвакцины.