17бета-N-(2,5-Бис(трифторметил))фенилкарбамоил-4-аза-5альфа-андрост-1-ен-3-он, способы его получения, фармацевтический состав и способ лечения

(51)7 07 73/00, 41/00, 61 31/58 НАЦИОНАЛЬНОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(72) БЭЧЕЛОР Кеннет Уильям , ФРАЙ Стивен Вернон(57) Описывается новое соединение формулы 17--(2,5-бис(трифторметил)фенилкарбамоил 4-аза-5-андрост-1-ен-3-он как необычайно сильный и избирательный двойственный ингибитор человеческой 5-редуктазы типа 1 и 2. Описываются также способ его получения, фармацевтический состав на основе указанного соединения и способ лечения.Предметом настоящего изобретения является конкретное производное 17 В -анилид 4-аза- 5 а -андрост 1-ен-Зона как необычайно сильный и избирательный двойственный ингибитор человеческой 5 аАндрогены ответственны за многие физиологические функции как у мужчин, так и у женщин. Действие андрогена опосредовано специфическими внутриклеточными гормональными рецепторами, экспрессируемыми в чувствительных к андрогену клетках. Тестостерон, основной циркулирующий андроген, секретируется клетками Ьеусп в тестах при стимуляции продуцируемою гипофизом лютенизирующею гормона (ЛГ). Однако для действия андрогена в некоторых тканях-мишенях, таких как предстательная железа и кожа, необходимо восстановление 4,5 двойной связи тестостерона с образованием дигидротесгостерона (ДГТ). Стероид-5 о -редуктазы в тканях-мишенях катализирует превращение тестостерона в ДГТ по НАДФ-зависимому пути, как показано на Схеме А.Р С) О хо Способность ДГТ действовать в качестве агониста в таких тканях-мишенях было ярко освещено исследованиями дефицитных по стероид-5 а редуктазе индивидов, у которых имеется рудиментарная предстательная железа и которые не страдают от юношеских угрей или мужского облысения 1. Таким образом, ожидается, что ингибирование превращения тестостерона в ДГТ в таких тканях-мишенях будет полезным при лече 10024нии различных андрогензависимых заболеваний, например доброкачественной гиперплазии предстательной железы, рака предстательной железы, угрей, мужского облысения и гирсутизма.КРОМЕ ТОЮ, Недавно было установлено,ЧТО у Людей существуют два изозима 5 а-редуктазы, которые различаются по их тканевой локализации, сродству к тестостерону, профилю рН и чувствительности к ингибиторам 2,З. Индивиды, дефицитные по стероид 5 а -редуктазе, изучавшиеся Шшрегато-Мсбйпеу, являются дефицитными по ферменту 5 а-редуктазе типа 2 45 который является доминирующим изозимом локализованным в предстательной железе, в то время как изозим типа 1 доминирует в коже. Относительное количество изозимоспецифических и двойственных ингибиторов обоих изозимов 5 а -редуктазы зависит от типа излечиваемого заболевания (доброкачественная гиперплазия предстательной железы, рак предстательной железы, угри,мужское облысение или гирсутизм), а также от стадии заболевания (профилактика в сравнении с лечением) и возможных побочньтх эффектов у отобранных пациентов(например лечение юношеских угрей у половозрелых мужчин).В силу их значительного терапевтического потенциала, ингибиторы тестостерон-5 а-редуктазы именуемые ниже как ингибиторы 5 а -редуктазы являлись объектом активных исследований во всем мире. Например 6-13. Двумя наиболее многообещающими ингибиторами 5 а -редуктазы являются МК-906 (Мегск), известный под общим названием финастерид и выпускаемый под торговой маркой Проскар и ЗКР-1 О 5657(Бшпшсйпе Вееспаш), представленные на Схеме Б.- стероид-дегидрогеназа/З-кето- А 5 -стероидизомеразы клеток бычьих надпочечников и свиной гранулемы (ЗБГСД) 4-азастероидным производным, 4-МА. представленным на Схеме В, и отсутствие ингибирования лекарственным фенасгеридом 1415 совместно с существенным значением ЗБГСД в стероидном биосинтезе 16 подтверждаюттот факт, что оптимальные ингибиторы 5 а-редуктазы типа 1 и 2 также должны быть селективными в отношении ЗБГСД надпочечников человека.-редуктазы особенно подчеркивается сообщениями о гепатотоксичности у определенных 4- азастероидов, таких как 4-МА 17,18. Одним из аспектов настоящего изобретенияявляется соединение формулы (1),СР 3известное также как 17 З -Ы-(2,5-бис(трифторметилфенилкарбамоил-4- аэа-5 а -андрост-1-ен-3-он и его фармацевтические приемлемые сольваты.Другими аспектами изобретения являются2. Способ лечения чувствительного к андрогену или опосредованного им заболевания, включающий введение эффективного количества соединения формулы ( 1) пациенту, нуждающемуся в таком лечении.3. Фармацевтичесие препараты, содержащие соединение формулы (1) в качестве активного ингредиента.4. Способ лечения чувствительного к андрогену или опосредованного им заболевания, включающий введение эффективного количества соединения формулы (1) пациенту, нуждающемуся в таком лечении, в сочетании с таким антиандрогеном, как флутамид.5. Способ лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы, включающий введение эффективного количества соединения формулы (1) пациенту, нуждаю 10024щемуся в таком лечении, в сочетании с альфа 1 андренергическим рецепторным блокатором (например теразоцином).6. Способ лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы, включающий введение эффективного количества соединения формулы (1) пациенту, нуждающемуся в таком лечении, в сочетании с антиэстрогеном.Специалистам в области органической химии известно, что многие органические соединения могут образовывать комплексы с растворителями, в которых они взаимодействуют или из которых они выпадают в осадок либо кристаллизуются. Такие комплексы известны как сольваты. Например комплекс с водой известен как гидрат. Сольваты соединения (1) находятся в рамках изобретения.Специалистам в области органической химии следует иметь в виду, что многие органические соединения могут существовать в более чем одной кристаллической форме. Например, кристаллическая форма может изменяться от сольвата к сольвату. Поэтому все кристаллические формы соединений формулы (1) или все их фармацевтически приемлемые сольваты находятся в рамках настоящею изобретения.Соединение по настоящему изобретению может быть получено способами 11, 12,включенными по сноска. Например, соединение формулы (1) может быть получено способом, представленным на Схеме 1 и Ц.сгз Вы до сгзНа Схеме 1 соединение формулы (У) дегидрогенизируют с образованием соединения формулы (1) путем обработки дегидро тонизирующей системой, например 2,3-дихлор-5,6-дициано-14-бензохиноном (ДДХ) и бис(триметил-силил)трифторацетамидом в сухом диоксане при комнатной температуре в течение 2-5 часов с последующим прогреванием при дефлегмации в течение 10-20 часов 19.Соединение формулы (У) может быть получено согласно Схеме 1 А(111). Это может быть осуществлено путем активации кислоты и реакции с анилином формулы (На). В частности, реакция может представлять собой превращение соединения формулы (11) в соответствующий галогенангидрид посредством обработки галогенизирующим агентом, таким как тионилхлорид, в апротонном растворителе, например толуоле,мегиленхлориде или тетрагидрофуране, при температуре от 5 С до 10 С в присутствии основания, например пиридина.Промежуточный галогенангидрид, например хлорангндрид, может быть подвергнут взаимодействию с замещенным анилином формулы (Па) при температуре от 25 С до 7 ОС в таком апротонном растворителе, как тетрагидрофуран, с образованием амида формулы (111). Соединение формулы (Па) является коммерчески доступным препаратомНа Стадии 2 соединение формулы (111) превращают посредством окисления, например посредством обработки водным перманганатом калия и периодатом калия в щелочных условиях при дефлегмации вНа Стадии 3 соединение формулы (111) превращают в 4-аза-5 а -андростан-3-он формулы (У) посредством обработки аммонием при дефлегмации в этиленгликоле с последующей гидрогенизацией промежуточного 4-азаандрост-5-ен-3-она в уксусной кислоте при температуре от 60 С до 70 С и давлении водорода, равном 40-60 пси, в присутствии оксида платины в качестве катализатора.По схеме же 11 соединение формулы (1) может быть получено из 3 оксо-4-аза-5 а-андрост-1-ен-17 З карбоновой кислоты формулы (У 1) 20 способом по Схеме 1 А,стадия 1.Специалисту следует учитывать, что на более ранней стадии получения соединения формулы (1) или его сольвата может оказаться необходимым и/ или желательным защитить одну или более чувствительных групп в молекуле для предотвращения нежелательных побочных реакций.Защитные группы, применяемые при получении соединения формулы (1), могут быть использованы обычным способом 21,22.Удаление любой имеющейся защитной группы может быть осуществлено обычными способами. Ариладхкильная группа, например бензил, может быть отщеплена путемгидролиза в присутствии катализатора, например палладия или древесного угля ацильная группа, например Ы- бензилоксикарбонил, может быть удалена посредством гидролиза, например с бромоводородом в уксусной кислоте, или путем восстановления,например каталитической гидрогенизации.Следует иметь в виду, что в любом из описанных выше способов может оказаться желательным или даже необходимым защитить любые чувствительные группы в молекуле, как уже отмечалось ранее. Поэтому реакционная стадия, включающая удаление защитных групп из защищенного производного обшей формулы (1) или его соли, может быть осуществлена в результате реализации любого из следующих существующих способов(1) удаление любых защитных групп и(П) превращение соединения формулы (1) или его сольвата в его фармацевтически приемлемый сольват.Будучи используемыми в качестве последней основной стадии в последовательности получения, основные методы, описанные выше для получения соединений по изобретению, могут также быть применены и для введения желательных групп на промежуточной стадии при получении искомого соединения. Поэтому следует иметь в виду,что в таких многостадийных процессах последовательность реакций следует выбирать таким образом, чтобы реакционные условия не оказывали воздействия на те группы, присутствующие в молекуле, наличие которых желательно в конечном продукте.Соединение формулы (1) и промежуточные соединения (П) - (И), представленные на Схемах 1 и П, могут быть очищены обычными способами, известными из уровня техники, например хроматографией или кристаллизацией.Ферментативные активности можно определять, используя Микросомы, полученные из 1) ткани предстательной железы пациетов с доброкачественной гиперплазией предстательной железы (ДПГ) 2) 5 Р 9 клеток,инфицированных рехомбинантным бакуловирусом, который экспрессирует человеческую 5 а -редуктазу типа 2. Микросомы получали путем гомогенизации ткани или клеток с последующим дифференциальным центрифугированием гомогената. Микросомные экстракты инкубировали с различными концентрациями 1,2,67-ЗН-тестостерона, 1 мМ НАДФ и различными количествамисоединений формулы 1, то есть тестируемым соединением, в буфере, содержавшем НАДФрегенерирующую систему, способную поддерживать концентрацию НАДФ в течение периода времени в пределах интервала,равного 0,5-240 минутам. В качестве конт. рольного исследования проводили соответствующие инкубации при отсутствии тест-соединения. Для измерений ИК 5 о для клона 1 все компоненты, задействованные в анализе, за исключением тестостерона,подвергали предварительной инкубации в течение 10 минут при рН 7,0, а после добавления 100 нМ тестостерона пробы выдерживали в течение 10-120 минут для прохождения анализа. Для измерения ИК 5 о для клона 2 все компоненты, задействованные в анализе, за исключением тестостерона,подвергали предварительной инкубации в течение 20 минут при рН 6,0, а после добавления 8 нМ тестостерона пробы выдерживали в течение 20-40 минут для прохождения анализа. Процент превращения тестостерона в ДГТ в присутствии тест-соединений по сравнению с соответствующим превращением в контрольном исследовании устанавливали с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения (ЖХВР) с радиохимическим обнаружением. Результаты этих анализа, выраженные в виде ИК 5 о,представлены в Таблице 1. З В чгидрокси- А 5 ютероид-дегидротеназа/Зкето- А 5 -стероид изомеразаФерментативные активности измеряют,используя Микросомы, полученные из тканей человеческих надпочечников. Микросомы получали посредством гомогенизации этой ткани с последующим дифференциальным центрифугированием гомогената. Микросомные экстракты инкубировали с различными КОНЦСНТРЗЦИЯМИ дигидроэпиандростерона(ДГЭА), 1 мМ НАД и переменными количествами соединения формулы (1), то есть тест-соединения, в буфере с рН 7,5 в течение периода времени в интервале от 1 до 60 минут. В качестве контрольного исследования проводили соответствующие инкубации при отсутствии тест-соединения. Процент превращения ДГЭА в андростендион в присутствии тест-соединений по сравнению с соответствующим превращением в контрольном исследовании устанавливали с помощью ЖХВР с радиохимическим обнаружением. Результаты этих анализов, выраженные в виде Ка,представлены в Таблице 1. 1 п уйуо определение ингибиторов стероид-5 а11 что активность ингибиторов стероид-5а -редуктазы может быть определена в