Способ получения токсоплазменного антигена для серологической диагностики

Формула / Реферат

Изобретение относится к области иммунологии и может найти широкое применение для серологической диагностики токсоплазмоза человека и жи­вотных в лабораторной практике.
Способ получения токсоплазменного антигена для серологической диагностики включает заражение штаммом токсоплазм мышей, получение перитонеального экссу­дата, добавление к нему стерильного физиологического раствора и центрифугирование при 3000 об/мин, 2-кратное добавление к осадку физиологического раствора с после­дующим его пропуском через тонкую иглу с помощью шприца, центрифугирование при 3000 об/мин, добавление к осадку физиологического раствора с последующим воздейст­вием ультразвуковыми колебаниями частотой 22 кГц, центрифугирование при 8000 об/мин, разбавление осадка, его центрифугирование, отделение надосадочной жидкости, центрифугирование в течение 15 минут, растворение полученного осадка в дистиллиро­ванной воде, центрифугирование, при этом заражение осуществляют штаммом Toxoplasma gondii Rh, а к перитонеальному экссудату добавляют стерильный физиологический раствор в соотношении 1:10, центрифугирование осуществляют при 3000 об/мин в течение 15 минут, 2-кратное добавление физиологического раствора с последующим пропуском через тонкую иглу с помощью шприца осуществляют в соотно­шении осадок: физиологический раствор 1:50, центрифугирование осуществляют при 3000 об/мин в течение 15 минут, полученную надосадочную жидкость центрифугируют, добавляют к осадку физиологический раствор в соотношении 1:50, фильтруют, получен­ный фильтрат подвергают воздействию ультразвуковых колебаний акустической мощно­стью 70 вт/см2 в течение 30 минут, затем центрифугируют при 8000 об/мин в течение 30 минут, осадок разбавляют дистиллированной водой в соотношении 1:50, устанавливают рН 11,5 с помощью 1,0н раствора едкого натра, центрифугируют при 5000 об/мин в тече­ние 15 минут, рН надосадочной жидкости устанавливают до 4,5 с помощью 1,0 раствора серной кислоты, выдерживают в водной бане при температуре 40 °С в течение 20 минут, центрифугируют при 5000 об/мин в течение 15 минут, полученный осадок растворяют в дистиллированной воде, затем вносят охлажденный этиловый спирт в соотношении 4:1 и выдерживают при температуре 0 °С в течение 18 ч, а центрифугирование осуществляют при 5000 об/мин в течение 15 минут, затем осадок растворяют при температуре -4 °С в дистиллированной воде, рН доводят до 8,0, а концентрацию белка устанавливают до 1 мг/мл.
Предложенный способ прост по технике выполнения и не требует больших материальных затрат и затрат рабочего времени.

МПК / Метки

МПК: A61K 39/002

Метки: способ, токсоплазменного, получения, антигена, диагностики, серологической

Код ссылки

<a href="https://kz.patents.su/0-pp12343-sposob-polucheniya-toksoplazmennogo-antigena-dlya-serologicheskojj-diagnostiki.html" rel="bookmark" title="База патентов Казахстана">Способ получения токсоплазменного антигена для серологической диагностики</a>